SD大鼠肾小管上皮细胞的原代培养和鉴定

目的:探讨大鼠肾小管上皮细胞的体外培养及鉴定方法,为肾结石病的研究提供实验平台。方法:采用机械研磨、Ⅰ型胶原酶消化法分离出肾小管节段,在含10%胎牛血清和1%上皮细胞生长因子的上皮细胞培养基中培养,0.25%胰蛋白酶消化后传代培养,并用原代和传1代细胞做免疫细胞化学染色鉴定。结果:细胞培养至第3天完全贴壁,4～7d处于对数生长期,为多边鹅卵石样;免疫细胞化学染色显示cytokeratin18表达阳性。结论:机械研磨、Ⅰ型胶原酶消化法结合使用上皮细胞培养基可以培养得到较纯的肾小管,是大鼠肾小管上皮细胞原代培养的理想方法,为进一步研究泌尿系结石病因和机制提供了实验基础。

非小细胞肺癌并肺寡转移的外科治疗

目的:探讨局部手术对非小细胞肺癌(NSCLC)肺寡转移患者的生存影响。方法:回顾分析我院2003年1月至2013年12月确诊为原发性NSCLC肺寡转移病例共21例,分两组,A组为手术组,共11例,男6例,女5例,中位年龄55岁;B组为化疗组,共10例,男6例,女4例,中位年龄60岁,比较两组患者中位生存期(MST)及5年生存率的差异,以及A组患者中原发灶TNM、p N分期、转移模式、结节数对生存期的影响。结果:两组MST分别为37个月和11.6个月,5年生存率分别为18.2%和9.1%(P<0.05);A组中单发、异时性转移、原发灶为p N0、Ⅰ和Ⅱ期的患者总生存期高于多发、同时性转移、原发灶为p N1-2、Ⅲ和Ⅳ期者(P<0.05)。结论:局部手术治疗能明显延长NSCLC肺寡转移患者的生存期和5年生存率。

micro RNA-98干扰肺癌患者外周血B细胞IL-10的表达

目的验证miR-98可抑制肺癌患者B10细胞IL-10的表达。方法收集肺癌组和对照组外周血各10例,分离培养CD19B淋巴细胞,流式细胞检测B10细胞数,RT-PCR检测B10细胞miR-98和IL-10mRNA的表达,制备miR-98脂质体及建立肺癌小鼠模型,观察miR-98脂质体对小鼠瘤体生长的抑制作用。结果肺癌组外周血B10细胞miR-98显著低于对照组,IL-10 m RNA水平显著高于对照组,B10细胞miR-98与IL-10 mRNA间存在负相关。结论在miR-98高表达的环境下,B淋巴细胞IL-10表达降低,对荷瘤小鼠应用脂质体包埋miR-98能减慢肺癌生长。

PLCE1调控p53诱导食管癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨磷脂酶Cε1(PLCE1)基因抑制食管癌细胞凋亡的作用机制。方法选用人食管癌细胞株OE33和CPC作为研究对象。采用qRT-PCR、Western blot法分别检测转染PLCE1 siRNA前、后食管癌细胞OE33和CP-C中PLCE1、p53 mRNA和蛋白水平的表达;甲基化特异性PCR重亚硫酸盐法检测p53启动子区甲基化状态;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果食管癌细胞株OE33和CP-C均高表达PLCE1,抑制PLCE1表达后食管癌细胞CP-C中p53表达上调并促进p53去甲基化,细胞凋亡明显增加。结论 PLCE1通过促进p53启动子区甲基化抑制p53的表达,从而抑制食管癌细胞凋亡。

肺切除术后持续性肺漏气治疗的研究进展

持续性肺漏气（prolonged air leak，PAL）是肺切除术后常见的术后并发症，现临床上较为统一地将其定义为肺实质切除术后肺持续性漏气超过5d，临床发生率为8％-26％。据Sakamoto等的数据统计，即便是手术损伤相对较小的胸腔镜下机械钉闭合的肺大疱切除术，其PAL的发生率也可达9．5％，故对于解剖分离更为复杂的肺段切除术、

胸腔镜交感神经切断术不同气管插管麻醉的前瞻性研究

目的比较单腔或双腔气管插管麻醉在手汗症患者行针形胸腔镜(VATS)双侧T3、4交感神经链切断术中的安全性、可行性及成本效益优势。方法前瞻性研究2013年7月-2013年12月于该科行针形VATS双侧T3、4交感神经链切断术的40例手汗症患者,随机分成两组,每组20例,分别采用单腔气管插管麻醉或双腔气管麻醉。比较两组的插管时间、手术时间、住院天数、麻醉费用及住院费用,术后30 d随访两组的手汗缓解及代偿性多汗情况。结果两组困难插管率、手术时间、住院时间、并发症发生率、手汗缓解率及代偿性多汗发生率差异均无显著性(P>0.05)。单腔气管插管组插管时间[(6.85±1.50)vs(14.70±3.31)min,t=9.664,P=0.000)]、麻醉费用[(3 028.65±252.60)vs(4 055.25±259.60)元,t=12.675,P=0.000)]及手术费用[(8 380.75±339.70)元vs(9 468.85±420.39)元,t=9.003,P=0.000]均明显低于双腔气管插管组,差异有显著性(P<0.05)。结论单腔或双腔气管插管麻醉对于针形VATS双侧T3、4交感神经链切断术均安全、可行。单腔插管与双腔插管相比,能有效缩短插管时间,具有较好的成本效益优势。

PLCE1通过调控p53抑制肺腺癌A549细胞凋亡

目的:探讨磷脂酶Cε1(PLCE1)抑制肺腺癌A549细胞凋亡的作用机制。方法:选用人肺腺癌细胞株A549作为研究对象。采用real-time PCR和Western blotting法分别检测PLCE1抑制剂U-73122处理前、后肺腺癌细胞株A549中PLCE1和p53 mRNA和蛋白水平的表达;流式细胞术检测细胞凋亡。结果:肺腺癌细胞株A549高表达PLCE1,低表达p53;抑制PLCE1表达后A549细胞中p53表达上调,细胞凋亡明显增加。结论:PLCE1通过抑制肺腺癌A549细胞株中p53的表达,从而抑制A549细胞凋亡。

庆大霉素局部注射治疗女性尿道综合征的临床研究

目的:研究在"女性前列腺"局部注射抗生素对女性尿道综合征的疗效,为其探索一种有效的治疗方法。方法:选择2009年7月至2010年12月在我院门诊就诊的患者,共入选163例。根据就诊顺序前瞻性随机分为A、B、C 3组,A组58例为实验组,B组55例、C组50例为对照组。A、B、C 3组均进行同样的常规治疗,除此之外A、B组同时采取局部注射治疗,A组注射庆大霉素8万单位(2 ml)+2%利多卡因2 ml的混合药液,B组注射生理盐水2 ml+2%利多卡因2 ml的混合药液。注射方法两组完全一致。浸润性注射在尿道后壁尿道旁腺及其周围,每周治疗2次,6次为1疗程。根据患者自主症状评分的改变评定疗效。疗程结束后第2、4周重复症状评分,症状消失为治愈,分值减少>1/2为为显效,分值减少>1/4分为有效,分值减少<1/4或者反增加为无效。结果:疗程结束后第2周症状评分,疗效A组(有效率为77.5%)明显高于B组(有效率为67.3%)和C组(有效率为68.0%),差异有显著性(P<0.05),而B、C组间无明显差异(P>0.05)。疗程结束后第4周复查,A组有效率略有下降,仍然高于B组和C组,差异有显著性(P<0.05)。结论:"女性前列腺"局部注射庆大霉素治疗女性尿道综合征有一定效果。

针吸细胞学检查及药物局部注射在女性前列腺炎诊治中的应用研究

目的研究应用针吸细胞学检查帮助诊断女性前列腺炎及在"女性前列腺"局部注射抗生素用于治疗女性尿道综合征的可行性,为其探索一种有效的诊治方法。方法选择2009年7月～2010年12月在本院门诊就诊的患者163例。随机分为A、B、C三组,A组58冽为实验组,B组55例、C组50例为对照组。A、B、C三组均进行同样的常规治疗,除此之外A、B组同时采取局部注射治疗,注射前先行穿刺细胞学检查,A组注射庆大霉素8万U(2 ml)+2%利多卡因2 ml的混合药液,B组注射生理盐水2 ml+2%利多卡因2 ml的混合药液。注射方法两组完全一致。浸润性注射在尿道后壁尿道旁腺及其周围,每周治疗2次,6次为1疗程。根据患者自主症状评分的改变评定疗效。疗程前及疗程结束后第2周、4周重复症状评分。结果 113例行针吸细胞学检查的患者中尿道旁腺周围提示急慢性炎症的71例(62.8%),对照部位穿刺阳性者53例(46.9%%),差异有统计学意义(P=0.02)。疗程结束后第2周症状评分,A组疗效(有效率为77.5%%、)明显高于B组(有效率为67.3%)和C组(有效率为68.0%),差异有统计学意义(P<0.05),而B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。疗程结束后第4周复查,A组有效率略有下降,仍然高于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 "女性前列腺"局部穿刺细胞学检查可以帮助诊断女性前列腺炎,注射抗生素为女性尿道综合征的治疗提供了一个安全、简单、有效的方法 。

针灸从“虚、郁、瘀”论治产后腰痛

针灸治疗产后腰痛,治愈时间较之普通腰痛更长,且易反复,增加患者身心痛苦。笔者在临床中发现,在针灸治疗产后腰痛同时,若能重视产后妇女体质情况,可明显地在改善气血状况的基础上,提高疗效。本文从产后妇女“虚、郁、瘀”体质考虑,在传统治疗腰痛的基础上,以固本为要,即首当补气养血、补益肾气、强腰健骨,兼以疏肝解郁、祛瘀通络。如此方可标本兼顾,避免犯“虚虚实实”之戒,即在产后“百脉空虚”之状态下,若一味行疏通经络之法,更易“损产后之不足”,不利于康复。

含钙肾结石患者肾组织TRPV5的表达及意义

目的:探讨TRPV5在含钙肾结石患者和正常无结石者肾组织中的表达差异,为寻找尿石症的病因提供理论依据。方法:收集我院2009年6～7月取得的含钙肾结石患者(结石组)和正常无结石者(对照组)肾皮质标本各5例,从形态学、蛋白水平、基因水平分别行免疫组织化学、Western blot和荧光定量PCR技术检测两组标本TRPV5的表达差异。结果:免疫组织化学检测见两组标本的肾远曲小管和集合管上皮细胞均阳性染色,且结石组强度明显低于对照组;Western blot检测结果显示结石组TRPV5蛋白印迹明显弱于对照组,利用Quanti-ty One4.62版软件灰度分析显示两组差异有统计学意义(t=6.43>3.355,P<0.01);结石组TRPV5mRNA表达明显低于对照组(t=5.34>2.306,P<0.05),相对定量显示结石组是对照组的0.248倍。结论:含钙结石患者肾TRPV5蛋白和mRNA的表达明显低于正常无结石者,TRPV5表达的减弱可能是含钙肾结石形成的一个重要因素。

TRPV5在肾草酸钙结石模型大鼠肾组织中的表达及其意义

TRPV5是瞬时性受体电位通道（TRP）vanilloid受体亚类成员之一，主要在肾远曲小管和集合管上皮细胞中表达，是介导远曲小管和集合管对钙主动重吸收的主要蛋白，在调控尿钙水平中发挥关键作用，其表达下降或活性降低可能导致尿钙水平增高。目前的研究结果认为尿钙增高是形成含钙尿路结石的主要因素之一。

顺行与逆行输尿管镜下钬激光碎石术治疗合并感染的输尿管结石比较

目的比较顺行经皮肾输尿管镜下与逆行经尿道输尿管镜下钬激光碎石取石术治疗合并感染的输尿管结石过程中手术时间、并发症、血清C反应蛋白浓度的改变等,为选择手术方式提供依据。方法选择2008年4月至2010年10月在我院住院手术治疗的合并感染的输尿管结石患者102例,根据手术适应证分组,45例接受经皮肾输尿管镜取石术,57例接受经尿道输尿管镜取石术。术前、术中、术后检查记录手术时间、住院时间、并发症等指标,并分别于术前第1天,手术后24 h测定血清C反应蛋白含量,比较两组间有无差异。结果两组患者在性别、年龄、结石大小、病程长短等方面无明显差异(P>0.05);顺行经皮肾微造瘘组的手术成功率、一期结石清除率高于逆行手术组(P<0.05),并发症发生率两组间比较差异无统计学意义(P>0.05),PCNL组平均手术时间及住院时间较长(P<0.05)。术前两组血清CRP含量无差异,术后24 h有明显差异(P<0.05),顺行组较逆行组明显减少。结论对于合并感染的输尿管结石的治疗,经皮肾输尿管镜取石术对机体全身的影响低于经尿道输尿管镜取石术,治疗方式的选择主要取决于结石的部位,对于第四腰椎平面以上的输尿管上段结石PCNL术更安全有效。

输尿管镜在妊娠期输尿管结石中的应用

目的探讨输尿管镜在妊娠期输尿管结石中应用的安全性。方法回顾性分析我院2007年6月至2012年8月妊娠合并输尿管结石需手术干预的患者11例,中位年龄27岁(20～39岁),中位孕期27周(15～34周),经超声确诊为输尿管结石9例,结石最大径5～11mm,8例行输尿管镜取石术,3例行输尿管镜探查置管术,观察手术效果及并发症。结果所有患者术程均顺利,镜下见输尿管下段结石6例,中段2例,上段3例。中、下段者均行输尿管镜取石术取出结石,3例上段者行探查置管术,所有患者留置4.8F进口双J管,术中及术后未见明显并发症,均顺利渡过妊娠期和围生期,正常分娩(37～41周),胎儿健康。结论输尿管镜手术对妊娠期输尿管结石经保守治疗无效的患者是安全、有效的。

胸腔镜脓胸清除术治疗肝移植术后脓胸

目的探讨胸腔镜脓胸清除术在肝移植术后脓胸治疗中的应用价值。方法回顾性分析2002年10月至2013年10月在中山大学附属第三医院行胸腔镜脓胸清除术的5例肝移植术后脓胸患者临床资料。患者均为男性;年龄42～56岁,中位年龄51岁。所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。患者均于气管插管全身麻醉下行胸腔镜脓胸清除术。于患侧腋中线第7肋间置入胸腔镜,腋前线第3肋间插入吸引器吸出脓液,剥离纤维板。观察患者手术情况及围手术期恢复情况。结果 5例患者均顺利完成手术并痊愈出院。胸腔镜手术时间中位数为2（1～3）h;呼吸机辅助时间26（6～42）h;术中出血量600（300～1 000）ml;胸腔置管引流时间4（2～6）h;胸腔引流量680（350～1 200）ml。全组患者无死亡,无术后脓胸复发及其它并发症发生。患者术后住院时间7（5～11）d。结论胸腔镜脓胸清除术是治疗肝移植术后脓胸的一种安全、有效的方法。

微小RNA-145调控磷脂酶Cε1抑制食管鳞癌的研究

目的探讨微小RNA（miRNA，miR）-145调控食管鳞癌（ESCC）细胞增殖与侵袭的分子机制。方法实时定量反转录聚合酶链反应（RT—qPCR）检测miR-145和磷脂酶Csl（PLCEl）mRNA表达；Westernblot检测PLCEl蛋白水平；Targetscan软件预测PLCEl是否为miR-145的靶基因；荧光素酶报告基因检测miR-145是否作用于PLCElmRNA的3’端非编码区域（3’UTR）；噻唑蓝（MTT）和划痕实验检测细胞增殖和侵袭能力。结果4种ESCC细胞miR一145相对表达量分别为0．63±0．06、0．72±0．05、0．55±0．05、0．79±0．04，均明显低于正常食管上皮细胞（P=0．000，P=0．00l，P=0．000，P=0．003）。ESCC组织中miR-145相对表达量为0．68±0．03，较正常组织降低31．9％（P=0．000）。miR-145低表达与肿瘤浸润深度及TNM分期相关（x2=8．380，P=0．039；X2=6．810，P=0．033）。Targetscan预测PLCE1是miR-145的靶基因；荧光素酶报告基因证实miR-145作用于PLCElmRNA的3’UTR。ESCC细胞中PLCE1相对表达量分别为1．69±0．04、1．46±0．06、1。31±0．06、1．60±0．08，均明显高于正常食管上皮细胞（P=0．000，P=0．000，P=0．004，P=0．001）。ESCC组织中PLCEl相对表达量为1．85±0．04，为癌旁正常组织的1．85倍（P=0．000）。PLCEl表达水平与miR-145表达水平负相关（r=-0．828，P=0．002）。过表达miR-145抑制Ecal09增殖（P=0．006），侵袭能力降低22．1％（P=0．013）；过表达PLCE1促进增殖（P=0．003），侵袭能力增强24．9％（P=0．029）；而同时过表达miR-145与PLCE1则可抑制PLCE1的促增殖（P=0．003）和侵袭能力（P=0．001）。结论miR-145通过靶向调控PLCE1抑制ESCC细胞增殖和侵袭。

肾区手术史的腹腔镜肾癌根治术后气胸的诊治

目的总结有肾区手术史的腹腔镜肾癌根治术后气胸的诊治体会。方法 2000年1月至2013年8月,中山大学附属第三医院有肾区手术史的腹腔镜肾癌根治术后共发现8例气胸患者,均经胸部X片证实,其中右侧5例,左侧3例。4例患者予以观察保守治疗,4例患者予以胸腔穿刺置管抽气治疗。结果 4例保守观察治疗气胸患者吸收好转后出院,4例行胸腔穿刺置管抽气治疗患者平均带管时间36 h,均好转出院,平均住院时间8 d,无一例患者出现脓胸。结论有肾区手术史的腹腔镜肾癌根治术后并发气胸应及时发现,立刻处理。

针刺效力影响因素探讨

近两年,针刺效力屡受国际质疑,认为针刺即安慰剂,缺乏生物效力。文章基于此国际争议,试图通过探讨和总结针刺效力影响因素,具体分别从非针刺相关特异性和针刺相关特异性角度展开,前者主要从生理基础之气血影响因素、心理活动之情志影响因素、疾病相关之辨证施穴影响因素切入,后者主要从针刺时间、针刺方法、针刺激量等切入;进而提出目前假针临床试验研究存在之不足。此文对厘清并明确针刺效力概念具有重要意义,也为今后分析西方临床研究中针刺疗效低下的原因提供参考。

国际针刺效力研究的分析现状

在医疗决策需要科学证据的时代背景下,当针刺疗法进入世界医学领域,固然也要接受提供临床证据之挑战。2016年,英美两国重要机构和杂志先后认为"没有足够证据证明针刺优于假针",进而否认针刺效力。于是国内展开多方面的研究以探究竟。文章即针对诸多国内分析现状进行综述,并提出不足之处,试图找出国外针刺效力低下的关键所在。

妊娠期尿路结石的治疗

目的:探讨妊娠期尿路结石安全有效的治疗方法。方法:回顾分析2006年1月～2011年2月妊娠合并尿路结石患者18例临床资料,平均25岁,平均孕26周,其中单纯输尿管结石14例,肾结石合并肾积脓1例,输尿管结石合并肾结石3例。1例因住院偶然发现且无症状自行出院,17例均有腰腹痛,给与解痉、止痛、抗感染等保守治疗,其中1例行经皮肾穿刺引流出大量脓液,5例行输尿管镜留置F_5进口双J管,2例行输尿管镜取石术取出输尿管下段结石。结果:经保守治疗后9例症状缓解,产后随访复查B超示结石排出;2例行URL取出结石,症状消失;5例行置管术者于产后复查B超,其中2例结石排出,3例结石残留,于产后3～6个月内行微创手术取出结石;1例中期引产,引产后通过肾造瘘管行二期手术取出肾结石,17例均顺利度过妊娠期和围生期,分娩出正常胎儿。结论:妊娠期尿路结石应依据具体病情选择不同的治疗措施,多以保守治疗为主,但微创手术也是安全有效的措施之一。