GJB2和SLC26A4基因部分罕见变异的致病性研究

目的通过对听力正常的耳聋人群亲属的基因筛查,对隐性遗传性耳聋基因部分罕见错义序列变异的致病性提出一种简单而有效的排查方法。方法收集800例具有不同程度听力障碍患者的DNA样本,通过多聚酶链反应(PCR)扩增GJB2和/或SLC26A4基因片段(包括编码外显子和邻近的侧翼区域),并对PCR产物进行Sanger测序和序列分析。当先证者含有明确致病突变时,在取得同意的情况下进一步对其听力正常的亲属进行相应基因的突变检测。结果在3个携带GJB2或者SLC26A4基因突变的先证者亲属中,一些正常听力者以复合杂合的形式同时携带GJB2或者SLC26A4基因的一个致病性明确突变和一个致病性不明确的罕见序列变异,包括GJB2基因p.T123N/c.235del C突变(2例)和SLC26A4基因p.A434T/c.919-2A>G突变(1例)。结论 GJB2基因p.T123N和SLC26A4基因p.A434T可基本排除为外显率较高的致病性突变的可能性。以上关于隐性遗传性耳聋基因疑似突变致病性的排除方法相对简便易行,通过大样本量的基因筛查可以为临床遗传性耳聋基因诊断和遗传咨询提供更可靠、明确的依据。

运用耳聋基因隐性突变携带者重测序策略纠正假阳性变异的致病性误判

目的·运用隐性突变携带者重测序策略发现并归类耳聋致病基因罕见良性变异,为遗传性耳聋的高通量二代测序结果解读提供良性多态参考数据库。方法·在已明确隐性耳聋基因双等位基因致病突变的耳聋患者的正常听力亲属中进行相应突变筛查,发现单杂合致病突变的携带者。运用靶向捕获二代测序技术在这些携带者中对相应耳聋基因进行外显子重测序,对所发现的对侧等位基因变异进行非致病性推断。结果·共30位正常听力的耳聋病例亲属被明确为某一已知耳聋基因隐性致病突变的杂合携带者。通过相应基因的靶向二代测序,在对侧等位基因上共发现32个非同义变异,在隐性完全外显的遗传模式下可被归类为良性非致病变异。其中SLC26A4基因p.A434T变异、LOXHD1基因p.R266Q变异、MYO15A基因p.K96Q变异、GJB2基因p.T123N变异及CDH23基因p.V1299I变异,共5个罕见变异等位基因频率小于0.005,部分变异被Polyphen-2、PROVEAN、SIFT或Mutation Taster软件预测为致病突变,或被耳聋变异数据库或人类基因组突变数据库记载为致病突变。结论·运用隐性突变携带者重测序策略可有效纠正部分被误判为致病的罕见良性变异,提高二代测序在单基因隐性遗传病病因诊断中的准确性和有效性。

食品检验检测过程中的质量控制及细节问题

食品安全问题受到了人们的广泛关注,食品质量检验与检测的质量管理也越来越受到重视。加强食品安全与卫生管理问题,对保证人们的食品安全、提高人们的生活品质具有十分重要的意义。食品检验人员须履行其职责,对食品的质量进行严格的控制,以保障食品质量安全。因此,笔者从食品安全管理的角度,对食品检验的质量管理进行探讨,以期能提高食品的安全水平,为人们的健康提供安全保证。

沉默DEPDC1基因表达对鼻咽癌细胞系HNE-1生长和细胞周期的影响

为探讨沉默DEPDC1基因表达对鼻咽癌细胞系HNE-1生长和细胞周期的影响,该实验设计合成靶向DEPDC1的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人鼻咽癌HNE-1细胞。转染后,采用荧光定量PCR、免疫印迹、MTT及流式细胞术方法检测细胞内DEPDC1的表达量以及细胞周期、生长增殖、凋亡的变化及其可能机制。结果显示,转染DEPDC1 siRNA后,DEPDC1基因在mRNA及蛋白水平的表达量明显降低;大量细胞被阻滞于G2/M期,生长增殖减慢,凋亡增加。荧光定量PCR结果表明,抑制NF-κB激活的A20基因表达量明显上调,受NF-κB调控的肿瘤相关靶基因的表达量下降,包括C-MYC、MMP9、ICAM-1、BCL-2基因。由此说明,沉默DEPDC1基因可以影响HNE-1细胞的周期,抑制其生长增殖,促进凋亡,其机制可能与抑制NF-κB通路有关。

耳鼻喉科考试试卷分析

目的评估重庆医科大学第一临床学院2007级学生耳鼻喉科学考试试卷的质量。方法以第一临床学院2007级学生耳鼻喉科学考试202份试卷为研究资料。将每名学生的总成绩和每题的答对情况等数据，利用SASS15．0软件包进行统计分析，计算每道考题的得分均数、标准差、难度系数及区分度，并对成绩分布进行正态性检验。结果考试成绩呈负偏态分布，平均分80．9，标准差10．9分；最低分56．5，最高分98．0；难度系数0．781，区分度0．308。结论本试卷题型全面，区分度良好，较客观反映了学生对本学科课程的掌握程度，但是也存在学生成绩分布不尽合理、试题难度偏易等问题，反映出在教学过程中还存在一些薄弱环节。