金属蛋白酶组织抑制因子-1在糖尿病肾病患者中的表达

目的观察金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在糖尿病肾病不同临床阶段的变化规律,进而探讨TIMP-1在糖尿病肾病发生、发展过程中的作用。方法选取健康对照组(NC)20例,2型糖尿病组(DM)20例,临床期糖尿病肾病组(DN)20例及糖尿病肾病肾功能衰竭组(DNF)20例为研究对象,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测各试验对象血清中TIMP-1的含量,采用方差分析和q检验比较各组TIMP-1水平的差异性;TIMP-1在不同性别间的差异分析用t检验,TIMP-1水平与年龄的关系采用直线相关分析和t检验。结果正常对照组血清TIMP-1水平为825.97±137.34(ng/ml),糖尿病组1259.05±218.47(ng/ml),临床期糖尿病肾病组1508.31±282.57(ng/ml),糖尿病肾病肾功能衰竭组2131.42±441.25(ng/ml)。糖尿病组、临床期糖尿病肾病组及糖尿病肾功能衰竭组血清中TIMP-1水平比正常对照组显著增高(P均<0.01)。临床期糖尿病肾病组比糖尿病组、糖尿病肾病肾功能衰竭组比临床期糖尿病肾病组的TIMP-1水平也明显增高(P<0.05,P<0.01)。TIMP-1血清水平在性别间的差异无统计学意义。在DM组和DNF组,TIMP-1水平与年龄正相关,相关系数r分别为0.4866(P<0.05)和0.6229(P<0.01),两相关系数差异无显著性。结论随着糖尿病肾病的病情进展,血清中TIMP-1水平逐渐增高,提示TIMP-1可能参与了糖尿病患者动脉硬化、动脉粥样斑块的形成及高血压的血管重塑过程;TIMP-1可能介导了肾小球细胞外基质(ECM)积聚、肾小球基底膜(GBM)重塑、肾小球硬化,在糖尿病肾病发生、发展过程中起着重要作用。

微小RNA-141-3p靶向调控含CUE结构域蛋白2基因对雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞损伤的影响

目的 探讨微小RNA-141-3p(miR-141-3p)靶向调控含CUE结构域蛋白2(CUEDC2)对雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞损伤的影响。方法 2018年7月至2019年12月,从美国ATCC购买大鼠胰腺腺泡细胞AR42J。100 nm/L雨蛙素(CAE)刺激大鼠胰腺腺泡细胞AR42J 6 h建立急性胰腺炎细胞模型。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测雨蛙素干预后AR42J细胞中miR-141-3p和CUEDC2的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和蛋白质印迹法验证miR-141-3p和CUEDC2的靶向关系。利用脂质体转染法将miR-141-3p抑制物(anti-miR-141-3p)、miRNA抑制物阴性对照(anti-miR-NC)、CUEDC2过表达载体(pcDNA-CUEDC2)、空载体(pcDNA)分别转染AR42J细胞,经雨蛙素干预处理后,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平,酶联免疫吸附试验(Elisa)试剂盒检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果 雨蛙素干预处理后AR42J细胞中miR-141-3p的表达水平显著升高[(2.43±0.24)比(1.00±0.09)],CUEDC2的表达水平显著降低。miR-141-3p靶向负性调控CUEDC2表达。与转anti-miR-NC和雨蛙素协同处理组比较,转染anti-miR-141-3p和雨蛙素协同处理组AR42J细胞凋亡率显著增加[(27.48±2.33)%比(15.64±1.51)%],Bax蛋白的表达显著增加,Bcl-2蛋白的表达显著降低,TNF-α[(136.54±14.58)ng/L比(226.48±20.54)ng/L]和IL-6[(115.89±11.65)ng/L比(193.47±18.63)ng/L]的分泌显著降低;与转染pcDNA和雨蛙素协同处理组比较,转染pcDNA-CUEDC2和雨蛙素协同处理组AR42J细胞凋亡率显著增加[(23.87±2.35)%比(14.23±1.44)%],Bax蛋白的表达显著增加,Bcl-2蛋白的表达显著降低,TNF-α[(158.74±15.32)ng/L比(236.87±18.66)ng/L]和IL-6[(135.77±14.97)ng/L比(189.67±17.32)ng/L]的分泌显著降低;转染si-CUEDC2可逆转转染anti-miR-141-3p对雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞损伤的影响。结论 抑制miR-141-3p通过靶向CUEDC2可促进急性胰腺炎腺泡细胞的凋亡,抑制TNF-α和IL-6分泌,从而减轻雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞损伤。

基质金属蛋白酶抑制因子-1与糖尿病肾病尿蛋白水平的关系

①目的探讨糖尿病肾病(DN)患者血清基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)与尿蛋白水平的关系及其对TIMP-1作用的影响。②方法20例DN患者血清TIMP-1检测采用ELISA法,并同时检测24小时尿蛋白定量、血糖、糖化血红蛋白(GHbA1)。③结果20例患者血清TIMP-1及24小时尿蛋白定量在男、女性别之间分布无显著性差异(P>0.05),血清TIMP-1水平与24小时尿蛋白定量呈显著性正相关(r=0.84,P<0.01),但均与年龄、病史长短、血糖及糖化血红蛋白水平无相关性。④结论TIMP-1可能抑制了细胞外基质(ECM)的降解,促使肾小球基底膜(GBM)重塑,与蛋白尿的产生相关。

TIMP-1在糖尿病肾病中的水平变化及临床意义

目的观察金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）在糖尿病肾病不同临床阶段的变化规律，进而探讨TIMP-1在糖尿病肾病发生、发展过程中的作用。方法选取健康对照组（NC）20例，2型糖尿病组（DM）20例，临床期糖尿病肾病组（ON）20例及糖尿病肾病肾衰竭组（DNF）20例为研究对象，利用酶联免疫吸附实验（ELISA）分别检测各试验对象血清中TIMP-1的含量，并比较各组TIMP-1水平的差异性，分析TIMP-1水平与年龄及尿蛋白量的相关性。结果正常对照组血清TIMP-1水平为（825．97±137．34）ng/ml，糖尿病组（1259．05±218．47）ng／ml，临床期糖尿病肾病组（1508．31±282．57）ng／ml，糖尿病肾病肾衰竭组（2131．42±441．25）ng／ml。TIMP-1血清水平在性别间的差异无统计学意义。在DM组和DNF组，TIMP-1水平与年龄正相关。在DN组，TIMP-1与24h尿蛋白定量正相关（r=0．84，P〈0．01）。结论随着糖尿病肾病的病情进展，血清中TIMP-1水平逐渐增高，且与尿蛋白量呈显著正相关，提示TIMP-1可能参与了糖尿病患者动脉硬化、动脉粥样斑块的形成及高血压的血管重塑过程；TIMP-1可能介导了肾小球细胞外基质（ECM）积聚、肾小球基底膜（GBM）重塑、肾小球硬化，在糖尿病肾病发生、发展过程中起着重要作用。