雌激素受体基因多态性与子宫内膜异位症关联研究

目的: 通过对雌激素受体基因多态性与子宫内膜异位症 (EM) 关系的研究, 明确遗传因素对EM的影响, 从分子遗传学的角度探讨EM的发病机制、早期诊断指标及方法。方法: 取 49名病理确诊为子宫内膜异位症的患者为EM组, 50名月经正常, 生育过正常小孩, 查无乳腺癌及妇科肿瘤, 在该院腹腔镜下或开腹做输卵管结扎或输卵管吻合术等, 排除EM、腺肌症的女性作为正常对照组。每位妇女取静脉血 2ml, 用酚 氯仿法提取和纯化DNA, 用设计雌激素受体 (ER) 基因类扩增ER基因 1号内含子及部分 2号外显子之间一段靶DNA引物, PCR变性、退火和延伸条件分别为 94℃30s、60℃40s、72℃90s,共 35个循环。PCR扩增产物用 1 5%agarose电泳检查扩增结果, 扩增产物大小为 1 3kb。PCR扩增后分别取 15UPvuⅡ与 10UXbaI内切酶于 37℃酶切至少 3h, 酶切产物经 1 5%琼脂糖溴乙锭电泳分离, 紫外灯下判断结果。结果: 标本经酶切后可产生 3种酶切格局: 使用PvuⅡ酶切可区分出 3种基因型: PP型 (终产物为一 1 3kb大小的条带), Pp型 (终产物为 1 .3kb、850bp、450bp大小的 3条带), pp型 (终产物为 850bp、450bp大小的 2条带), 使用XbaⅠ进行酶切可以区分出XX型 (1 .3kb), Xx型 (1. 3kb、910bp、390bp), xx型 (910bp、390bp) 3种基因型。

复发性外阴阴道假丝酵母菌病阴道局部IFN-γ和IgE水平测定

目的测定复发性外阴阴道假丝酵母菌病(Recurrent Vulvovaginal Candidiasis,RVVC)患者阴道冲洗液中IFN-γ和IgE的浓度,探讨RVVC患者阴道局部免疫环境的改变情况。方法 ELISA法检测单纯性外阴阴道假丝酵母菌病(uncomplicated VVC)组和RVVC组患者阴道冲洗液中IFN-γ和IgE的浓度,以健康体检妇女为对照组。结果 RVVC组和单纯性VVC组患者阴道冲洗液中IFN-γ的浓度明显低于对照组(p<0.05),RVVC组较单纯性VVC组低(p<0.01)。RVVC组和单纯性VVC组患者阴道冲洗液中IgE的浓度明显高于对照组(p<0.01),RVVC组和单纯性VVC组比较无显著性差异(p>0.05)。结论 RVVC的发病可能与阴道局部免疫环境的改变有关。

血管细胞粘附分子-1与妊高征的关系探讨

目的 :通过对妊高征病人血管细胞粘附分子的测定 ,了解妊高征病情的严重程度。方法 :以酶联免疫吸附试验 (ELISA )法测定正常孕妇与妊高征病人血清血管细胞粘附分子 -1(VCAM 1)的含量。结果 :轻度妊高征VCAM 1为 ( 18 2 4± 2 17)ng/mL ,中度妊高征VCAM 1为 ( 2 1 77± 2 14 )ng/mL ,重度妊高征VCAM 1为 ( 2 2 75±3 73 )ng/mL ,正常孕妇VCAM 1为 ( 17 49± 1 13 )ng/mL。妊高征组血清VCAM 1比正常孕妇组高 ,差异具有统计学意义。结论 :孕妇血清中的VCAM 1水平有差异 ,并与妊高征病情严重程度有关 。

半胱氨酸代谢相关酶基因突变与妊高征

目的研究亚甲基四氢叶酸还原酶(methyleneletrahydrofolate reductase,MTHFR)基因错义突变667C→T 与妊娠高血压综合征的关系。方法应用多聚酶链反应—限制性内切酶长度多态性片断(PCR-RFLP)技术检测61例妊娠高血压综合征(妊高征组)患者及56例正常孕妇(对照组)的 MTHFR 基因错义突变667C→T。结果妊高征组 MTHFR 基因677C→T 突变纯合子(11.5%)较对照组(7.1%)明显升高。T 等位基因突变频率妊高征组(44.2%)也较对照组(17.9%)升高,差异有统计学意义(P＜0.05)。妊娠征组与子痫前期组的 MTHFR 基因677C→T 突变纯合子及 T 等位基因突变频率的比较差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 MTHFR 基因677C→T 突变是导致孕妇易感妊高征的独立危险因素,但与妊高征的病程无关。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与习惯性流产关系研究

目的 探讨广东地区汉族妇女亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与习惯性流产关系 .方法 采用多聚酶链式反应限制性片段长度多态分析 (PCR -RFLP)的方法 ,对 5 0例习惯性流产和 5 6例正常对照的广东地区汉族妇女进行MTHFR6 77C→T突变检测 .结果 习惯性流产组与正常对照组之间基因型的分布有显著差异 :χ2 =11.0 7,p<0 .0 5 ;但两组间等位基因突变频率无显著差异 :χ2 =2 .0 6 ,p>0 .0 5 .流产组 6 77C→T突变纯合子 ( 2 4 .0 % )较对照组 ( ( 7.1% )明显升高 .等位基因突变频率流产组 ( 2 6 .0 % )较对照组 ( 17.9% )升高 .结论 MTHFR 6 77C→T纯合子突变与习惯性流产有明确的相关关系 .

血清可溶性血管细胞黏附分子-1在妊高征中的表达及其意义

目的 测定正常中期和晚期妊娠及妊高征孕妇血清中的可溶性血管细胞黏附分子 - 1(sVCAM - 1)的含量并进行比较。方法 采用ELISA法测定 30例妊高征 ,32正常晚期妊娠及 30例正常中期妊娠孕妇的血清sVCAM - 1的含量。结果 正常中孕组与正常晚孕组血清sVCAM - 1对比无明显差异 ,P >0 0 5 ;妊高征组血清可溶性VCAM - 1比正常组孕妇明显增高 ,P =0 0 0 5 ,且增高与其舒张压呈正相关 ,r =0 5 91,P <0 0 5。结论 sVCAM - 1在妊高征患者表达升高 。

TAP基因与妊娠期高血压疾病关系的初步探讨

目的:探讨TAP(transporter associated with antigen processing)基因与妊娠期高血压疾病发病的相关性.方法:选取2002年6月至2005年9月在广州医学院第二附属医院就诊的30例重度子痫前期患者为研究对象,随机选择50例正常孕妇作为对照.所选孕妇均为初孕,无输血史,孕35～40周.各取2 mL外周静脉血抽提DNA,应用PCR-ARMS(扩增阻碍突变系统)方法检测TAP333、637、379、565、665 5个基因位点,分别对TAP基因的基因型、等位基因型、单倍体型进行统计分析.结果:在所有标本中,检出4种TAP1单倍体型及7种TAP2单倍体型,其中TAP2H未能检出.TAP2B(P＜0.01,RR=2.78),TAP2F(P＜0.05,RR=3.61)在妊娠期高血压疾病组中的分布频率显著高于对照组.余单倍体型在两组中的分布无统计学意义.TAP1及TAP2共10种等位基因及各种基因型在正常孕妇组和病例组分布频率的比较均无统计学意义.结论:TAP2B及TAP2F可能为妊娠期高血压疾病的易感基因.

对氧磷脂酶活性和其调控基因多态性与妊娠期高血压疾病的相关性

目的研究对氧磷脂酶（PON）活性以及PON1调控基因在191位的Glu/Arg多态性在正常妊娠的变化及与子痫前期发生的关系。方法采用乙酸苯酯法测定PON1活力,采用聚合酶链式反应扩增测定PON1基因多态性。结果正常妊娠与先兆子痫间PON1 192位点QQ、QR、RR 3种基因型及Q、R 2种等位基因频率分布差异无统计学意义。正常妊娠期的PON1的活性是上升的,并且PON1活性的上升有两个加速期,分别是孕13-20周和28-33周之间。先兆子痫的PON1的活性较正常妊娠是低的,差异有显著性。结论子痫前期的发生与血清PON1基因多态性之间无明显相关性;在中国孕妇人群中,血清PON1活性对子痫前期的发生、发展所起的作用比基因多态性更重要。

血淋巴细胞SCE诊断对消化性溃疡及胃癌的前瞻性研究

1992年9月-1994年5月对80例良、恶性消化性溃疡病 患者用双盲法同步进行内镜检查及淋巴细胞SCE(姐妹染色单体交换频率)检测,最后结合病理对SCE诊断价值进行前瞻性分析比较。

SCE结合淋巴细胞微核率对诊断恶性肿瘤的研究

本文以SCE（姐妹染色单体互换）及淋巴细胞微孩率为指标检测了28例恶性肿瘤患者，51例相应疾病患者，33例恶性肿瘤者的一级亲属，28例正常人，结果表明恶性肿瘤患者的SCE和淋巴细胞微核率都显著增高（P＜0．01），SCE和微核率显著正相关（r＝0．98，P＜0．01），认为SCE和微核率反映了两种不同的细胞遗传效应的损伤，是染色体不稳定性的表现，而染色体不稳定性是恶性肿瘤的物质基础。

22部分三体一例及其在遗传上的探讨

22三体综合征较罕见,在新生儿中发生率为1/3万～5万。本病例为一女性新生儿,有明显的小头、小下颌,腭裂,钩形鼻,伴先天性心脏病。外周血淋巴细胞培养GTG显带,结果显示核型为47,XX,+der(22),t(11,22)(q25;q13)。家系调查发现,患儿异常核型的产生系由于带有t(11,22)平衡易位的母亲其生殖细胞在减数分裂过程中发生了3:1的分离,产生AB、CB、CD不平衡配子所致。本文通过对异常核型的患儿临床体征及染色体核型分析,追朔其遗传学上产生的原因并进行讨论,强调了平衡易位携带者产前诊断的重要性。

血淋巴细胞SCE对胃溃疡及胃癌诊断的前瞻性研究

本文用双盲法对61例良、恶性胃溃疡病人的外周血淋巴细胞SCE进行观察，并以41例正常人为对照，结果显示胃癌患者（n＝30）的SCE率最高，其次是胃溃疡（GU）患者（n＝31），最后是正常人（P＜0．01）．胃癌分化程度低比分化程度高组SCE率显著升高，同时对SCE与纤维胃镜（FGS）对胃癌诊断价值进行前瞻性比较．作者认为染色体不稳定是胃癌发生的物质基础，提示SCE对鉴别GU恶变及临床观察有一定帮助．

同型半胱氨酸代谢相关酶基因多态性与习惯性流产关系的研究

目的 探讨胱硫醚β合成酶(cystathionineβsynthase, CBS)基因844ins68、甲硫氨酸合成酶(methione synthase, MS)基因A2756G、亚甲基四氢叶酸还原酶(methylene tetrahydrofolate re ductase, MTHFR)基因C677T三种同型半胱氨酸代谢相关酶基因突变与习惯性流产的关系。 方法 用PCR扩增50 例习惯性流产患者(习惯性流产组)及56 例正常孕妇(对照组)的CBS、MS、MTHFR基因突变点,直接或经限制性内切酶消化后行凝胶电泳确定其基因型。 结果 习惯性流产组MTHFR C677T突变纯合子(12/50,24.0%)较对照组(4/56,7.1%)明显升高(P<0.05),且等位基因突变频率习惯性流产组(26/100, 26. 0%)较对照组(20/112, 17. 9%)升高(P< 0.05)。CBS844ins68、MS A2756G各种基因型频率在流产组与正常对照组之间的差异无统计学意义。 结论 MTHFR C677T纯合子突变与习惯性流产有明确的相关关系;CBS 844ins68、MS A2756G突变可能不足以构成习惯性流产的独立遗传性危险因子。

抗原加工相关转运体基因多态性及夫妻共享率与妊娠期高血压疾病的相关性

目的基于妊娠期高血压疾病的免疫病因学，通过测定重度子瘸前期患者和正常孕妇抗原加工相关转运体（transporter associated with antigen processing，TAP）基因（TAP）多态性及夫妻共享率来探讨该基因与妊娠期高血压疾病发病的相关性。方法取102例重度子痫前期患者及其配偶为研究对象，随机选择200名正常孕妇及其配偶作为对照。所选孕妇均为初孕，无输血史，孕35～40周。各取2mL外周静脉血抽提DNA，应用PCR-扩增阻碍突变系统方法检测TAP333、637、379、565、665五个基因位点，分别对TAP基因的单倍体型进行统计分析。结果在所有标本中，检出4种TAP1单倍体型及7种TAP2单倍体型，其中TAP2H未能检出。TAP2B（x^2=9．19，P〈0．01，RR=4．18），TAP2F（x^2=5．34，P〈0．05，RR=4．63）在子痫前期组中的分布频率显著高于对照组。余单倍体型在两组中的分布差异无统计学意义。TAP1B（X^2=4．87，P〈0．05，RR=3．14），TAP1C（x^2=5．42，P〈0．05，RR=4．90），TAP2B（x^2=9．65，P〈0．01，RR=5．39）在子痫前期组与正常孕妇组的夫妻共享率比较，子瘸前期组的夫妻共享率显著增高，有统计学意义。结论TAP2B和TAP2F可能使妊娠期高血压疾病的易感性增高。TAPIB，TAPIC，TAP2B基因共享率升高时，母胎相容性增大，妊娠期高血压疾病发生的可能性增加。

妊高征患者尿酶变化的临床意义

目的：探讨妊高征患者随意尿Ｎ－乙酰－β－Ｄ葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）及溶菌酶变化的临床意义。方法：采用对硝基酚比色法及琼脂平板扩散法，检测妊高征患者１５６例（妊高征组），正常妊娠妇女１１０例（正常妊娠组）的尿ＮＡＧ、尿溶菌酶变化，并与尿蛋白／肌酐比值及β２－微球蛋白比较。结果：（１）中度、重度妊高征患者尿ＮＡＧ及溶菌酶均较轻度妊高征患者及正常妊娠妇女显著升高（Ｐ＜０．０１），且病情越重，升高越显著。（２）妊高征患者尿ＮＡＧ与尿蛋白／肌酐比值呈明显正相关关系（ｒ＝０．８５４，Ｐ＜０．０１）。（３）中度、重度妊高征患者尿溶菌酶与血β２－微球蛋白呈正相关关系（ｒ＝０．８７４，Ｐ＜０．０５）。结论：孕妇随意尿ＮＡＧ、溶菌酶的含量可反映妊高征的病情变化。

孕妇感染人类微小病毒B19的研究

目的通过检测孕妇血中微小病毒Ｂ１９的感染，了解对新生儿的影响。方法应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测２９例临床有感染症状的孕妇血清中微小病毒Ｂ１９ＤＮＡ。结果２９例孕妇血清中微小病毒Ｂ１９ＤＮＡ阳性反应的有４例，其新生儿有１例因胎儿水肿死亡，２例出现溶血性黄疸，１例低体重儿。结论应用ＰＣＲ技术检测孕妇血清微小病毒Ｂ１９ＤＮＡ有临床实用价值。

LMP2基因多态性及夫妻共享率与重度子痫前期的相关性研究

目的 测定重度子痫前期（severe pre-eclampsia，S-PE）患者和正常孕妇多功能蛋白酶（large muhifunctional protease，LMP2）基因多态性及夫妻共享率，探讨该基因与S-PE发病的相关性。方法 选择102例S-PE患者及其配偶为研究对象，随机选择200例正常孕妇及其配偶作为对照。所选孕妇均为单胎初孕，孕35～40周。各取2ml外周静脉血抽提DNA，应用PCR—RFLP方法进行LMP2基因分型。结果 LMP2R／H在S-PE患者中的分布频率显著高于正常孕妇组（53．9％和35．5％，P〈0．01），LMP2R／R在S-PE患者中的分布频率显著低于正常孕妇组（41．2％和58．5％，P〈0．01）。LMP2R／H在S-PE组的夫妻共享率与正常孕妇组的相比显著增高（24．5％和10．5％，P〈0．01）。结论 LMP2R／H很可能为S-PE发病的易感基因；而LMP2R／R可能是S-PE的保护基因。