广东省猪伪狂犬病流行的危险因素分析

为了调查猪伪狂犬病(PR)流行的危险因素,从广东省173家猪场收集了110家PR阳性猪场、63家PR阴性猪场的27项数据,以及血清和组织的随机样品。病例-对照分析显示:开设分场、距最近猪场的距离小于2.5 km、购入后备母猪等11项因素与PR流行有较强的联系(P<0.05)。秩和检验表明:建场时间越长、生产周期间隔越短、人员进入场区前未更衣淋浴等8项因素对发生PR产生显著影响(P<0.05)。最后通过logistic回归分析确定,距最近猪场的距离小于2.5 km、设置分场、购买后备母猪、本场人员未更衣淋浴是PR流行的危险因素,其比数比分别为12.44、12.68、18.5、5.88,且该模型正确预测发病情形的概率为90%。

广东省猪伪狂犬病时间分布和空间分布的研究

为了研究猪伪狂犬病(PR)的流行病学,对1998—2004年间广东省PR血清流行的时间和空间分布进行了调查.结果表明:东莞、惠州、深圳、阳江、珠海的PR血清阳性率较高(>20%),清远和汕尾地区最少(<10%),最高地区是最低地区的3.82倍.有51.7%猪场血清阳性率分布在10%以下.PR血清流行在时间序列有每隔5个月出现1个峰值的可能(P>0.05).通过AR IMA模型预测,2005年1月广东省的PR血清阳性率为14.23%,与真实值15.06%符合得较好.时间-空间对应分析表明:2002、2003年为珠江三角洲PR流行的高峰期,粤北在2001年为高发年份;2002、2003年,PR的流行率均以粤东为最低.二维对应分析图概括了原始信息量的83.3%.

猪圆环病毒2型广东株全基因的克隆与序列分析

根据GenBank中发表的已知猪圆环病毒2型(PorcineCircovirus2,PCV2)全基因序列,自行设计2对特异性引物,从2株接种疑似断乳仔猪多系统衰竭综合征(post weaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS)仔猪病料的PK15细胞中提取基因组DNA,以此为模板,用PCR方法分2段扩增2个PCV2广东株(GZ株和ZS株)的全基因序列.应用序列分析软件DNAstar,对所测2组PCV2序列与GenBank中的国内外PCV2毒株进行同源性比较,并绘制系统进化发生树,进行了序列分析.结果表明,2个PCV2广东株全基因组皆为1767bp,2个毒株间全基因序列核苷酸同源性为77.0%,第一开放阅读框(ORF1)间的核苷酸同源性仅为57.7%,而第二开放阅读框(ORF2)间的核苷酸同源性却高达99.1%.ZS株和GenBank中国内外其他的PCV2参考毒株序列的核苷酸同源性在95.7%～99.5%之间;而GZ株和其他PCV2参考毒株序列的核苷酸同源性仅在74.2%～77.1%之间.

广东省实施野生动物市场干预后SARS冠状病毒污染情况分析

目的了解广东省实施野生动物市场干预后野生动物市场SARS冠状病毒污染情况,为防控SARS疫情提供科学依据。方法于2004年9月至2005年5月,每月在广州市两家经营野生动物的场所分别采集动物市场外环境样本和各种动物样本(咽拭子、肛拭子、粪便等),用Realtime-PCR法检测SARS-CoV核酸基因片段。结果2004年1月起,广东省对动物市场进行干预,在全省范围内关闭野生动物交易市场,全面禁止果子狸等野生动物的饲养、运输、销售、屠宰和食用。市场干预后,检测销售飞禽类、水禽类、畜类、兽类、水产类等的动物市场外环境样本共417份,检测动物市场蛇、水产、黄犭京、竹鼠、兔、猫、鸡、鸭、鸽子等动物样本共1 160份,均未检出SARS-CoV核酸片断。结论实施对野生动物市场干预,能有效降低动物市场各种动物SARS-CoV的携带率,对预防SARS的发生和传播起到了重要作用。

广东原禽流感疫情疫点周围猪群H_5亚型禽流感的研究

从广东省8个曾经发生禽流感疫情的原疫点及周围地区,采集猪血清和咽肛拭子,进行H5亚型禽流感在猪群中的血清学和病原学调查,结果表明:这些地区虽然发生禽流感疫情,但尚未监测到向猪群转移的迹象。

广东省猪伪狂犬病时间分布和空间分布的研究

为了研究猪伪狂犬病(PR)的流行病学,对1998～2004年间广东省PR血清流行的时间和空间分布进行了调查,结果表明:东莞、惠州、深圳、阳江、珠海的PR血清阳性率较高(>20%),清远和汕尾地区最少(<10%),最高地区是最低地区的3.82倍,

种鸡氟中毒的诊断

种鸡氟中毒的诊断余业东（广东省兽医防疫检疫站，广州５１０２３０）刘建中辛朝安邓双岳（华南农业大学动物医学系）１一般情况及问题广东省某种鸡场创建于１９９３年，１９９５年１２月存栏８８２黄羽种鸡３．２万套，后备种鸡１万余套，其中育雏及后备鸡采用平养，种鸡...

用套式PCR方法对几种猪用冻干疫苗的PCV2检测

参照Genbank已发表的猪圆环病毒2型的基因序列,取其比较保守的基因片段ORF2,利用引物设计软件Oligo5.0设计两对PCV2型特异的引物,其中第一对引物扩增跨度为ORF2全基因片段,长度为702 bp,第二对引物扩增ORF2中间的一个小片段,跨度大小为494 bp。首先用第一对引物扩增阳性DNA,阳性DNA的浓度从10^(-1)稀释到10^(-11),然后以第一次PCR产物为模板,用第二对引物进行PCR,发现这种套式PCR的方法比用普通PCR灵敏度提高10~2倍。同这种套式PCR方法对广东省市场上出售的几种猪用弱毒疫苗进行猪圆环病毒2型检测,结果发现这几种疫苗全部为阴性,本实验说明目前广东市场上出售的弱毒疫苗在制作过程中没有受到PCV2的污染,解除了广大猪场主的顾虑。

H5亚型禽流感病毒间接免疫荧光快速诊断方法的建立

本研究以当前严重威胁我国养禽业的高致病性禽流感H5亚型病毒为研究对象,病毒在犬肾细胞(MDCK)上培养增殖,经蔗糖梯度离心对病毒进行纯化,免疫清洁级的新西兰公兔,高免血清经辛酸-硫酸铵法和葡聚糖G50柱纯化,制得第一抗体。以FITC标记的山羊抗兔IgG为第二抗体,通过反应条件的优化,建立了间接免疫荧光快速诊断方法。本法的最佳检测组织为心肌和胰腺,检测时间只需3小时,本法可检出人工感染后36小时尚未表现出临床症状鸡只中的病毒,对禽流感H7亚型、H9亚型病、新城疫、传染性支气管炎和传染性喉气管炎禽出败等病料进行特异性检验结果均为阴性。运用本方法对69个禽场的临床病料进行了检测,检测结果与鸡胚分离法进行比对,9个阳性场(广东省2004年9个原疫点的病料)的9份病料中,检出8份阳性;而鸡胚分离法阴性样品,本法检测结果与之完全相符。本法用于禽流感H5亚型病毒的快速诊断具有快速、简便、敏感、特异、费用低廉和不存在交叉污染等优点,在当前流行的H5亚型高致病性禽流感快速诊断中具有良好的应用前景。

口蹄疫病毒R株基因组序列分析研究

根据GenBank上发表的口蹄疫（foot-and-mouth disease，FMD）全基因序列数据，设计了多对引物，采用RT-PCR的方法，分别对R株编码区和非编码区基因进行扩增，将各片段克隆至pMD18-T载体，进行核苷酸序列测定．按顺序拼接各基因的序列，将结果序列与GenBank上各FMDV毒株的序列进行比较和同源性分析．序列的比较和分析表明，R株编码区全长为6966个核苷酸，共编码2322个氨基酸；非编码区5’端内部核糖体结合位点（intemal ribosome entry site，IRES）长约450个核苷酸，3’非翻译区（untranslatable region，UTR）从TAA始至Poly（A）前长度为94个核苷酸，所测出Poly（A）尾长度为18个核苷酸．与GenBank世界流行毒株的序列比较，编码区核苷酸序列同源性为88％～90％，推导氨基酸序列同源性为88％～95％．