含银脱细胞真皮基质抗性的实验研究

目的制备含银脱细胞异种真皮,观察其抑菌效果,为临床上治疗大面积深度烧伤或严重创伤后皮肤损毁提供一种良好的真皮替代物。方法用0.25%胰蛋白酶和0.5%曲拉通(TritonX-100)溶液联合脱细胞法制备脱细胞异种真皮后,用0.2%硝酸银溶液浸泡制备出含银脱细胞异种真皮。以原子吸收光谱仪测量含银脱细胞异种真皮的Ag+含量,并对其进行微生物检测和组织学观察。结果①脱细胞异种真皮基质中的表皮已经完全除去,胶原纤维粗细均匀,排列规则,无明显的变性,真皮中无细胞及细胞碎片存在;②含银脱细胞异种真皮的含银量高,体外抑菌作用明显强于单纯脱细胞异种真皮(P<0.05)。结论含银脱细胞异种真皮在脱除了基质中有免疫原性的细胞成分的同时,又保留了组织的基本结构和完整的胶原纤维支架,从而成为低抗原性的真皮支架,且又因含有银离子而具有较好局部抗菌作用,因而是一种良好的真皮替代物。

抗菌静脉导管的初步研究

目的 :制作抗菌导管 ,预防静脉导管感染。方法 :用洗必尽和医用聚氨酯为主要成份涂覆硅胶胶管制成抗菌导管。抗菌试验包括 :(1)涂覆液MIC测定 ;(2 )体外抗菌作用观察 ;(3)体外抗菌作用持续时间观察 ;(4 )导管加温对抗菌作用的影响 ;(5 )动物试验检测抗菌效果。结果 :涂覆液对金黄色葡萄球菌MIC90 为 8.5 μg/ml、MIC50 为 2 .8μg/ml;对绿脓杆菌MIC90 为 31.3μg/ml、MIC50 为 15 .6 μg/ml;涂覆导管在琼脂培养基中对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌及大肠杆菌产生抑菌圈 ,而未涂覆导管不产生抑菌圈 ;涂覆导管浸泡在金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌及大肠杆菌菌悬液中 ,抑菌时间分别为 15 .6± 0 .6d ,3.0± 0 .4d和 3.6± 0 .2d ;涂覆导管高温处理 ,抑菌作用与未高温处理涂覆导管无差异 ;在兔皮下包埋涂覆导管 ,病理检查见管周组织结构清晰 ,炎性渗出物少 ,而未涂覆导管病理检查见组织结构紊乱 ,炎性渗出物多。结论 :实验结果证实涂覆导管有较强抗菌效果 ,对其临床实用价值 。

严重烧伤复合爆震伤并发顽固性腹胀一例

探讨烧伤合并震爆伤的临床特征及治疗手段。方法:报告一例严重烧伤复合爆震伤并发顽固性腹胀病人的救治过程,结合相关文献研究该病人在治疗过程中出现顽固性腹胀的原因,以及与烧伤及震爆伤的临床表现,探讨相关临床处理措施。结论:对于烧伤复合震爆伤的病人应先以处理出现及可能出现的致命伤为主,早期预防呼吸系统并发症,合理地尽早处理、消灭创面,根据患者病情个体化制定抗感染、抗休克及营养支持方案,积极申请多学科会诊是本例病人救治成功的重要经验。

改良负压封闭引流技术治疗难愈性创面的体会

目的探讨VSD和改良后的VSD在治疗深度和难愈创面的优劣及注意事项。方法选择8例四肢术后不愈、骨及钢板外露、反复感染的深度创面,应用VSD治疗,其中3例再采用改良后VSD治疗,观察创面肉芽生长、创面培养、创面愈合情况。结果 8例患者均经VSD治疗,其中:5例患者14～21d揭除敷料,肉芽生长旺盛,适宜皮片或皮瓣移植,创面愈合;另3例患者,使用VSD 14～21d揭除敷料后清创缝合、皮片或(和)皮瓣移植,术后创面再次感染,行改良的VSD治疗14d后,再行清创缝合、皮片或皮瓣移植,创面愈合。结论使用VSD治疗有利于创面肉芽生长,促进了创面愈合;对反复感染及反复形成窦道的深度、难愈性创面使用改良的VSD治疗可进一步减少创面感染,加快创面的缩小、愈合。

烧伤病区连续3年医院感染调查分析

目的 研究烧伤病区医院感染的临床特点 ,以指导临床控制。方法 选择我院烧伤科 2 0 0 0～ 2 0 0 2年连续3年住院患者的出院病历 2 2 5 3份 ,对该时段医院感染进行回顾性的调查、总结和分析。结果 2 0 0 0～ 2 0 0 2年连续 3年烧伤病区医院感染率为 10 .2 1% ,例次感染率为 10 .5 8% ,漏报率为 18.0 7%。结论 烧伤患者因为皮肤屏障破坏、免疫功能受损等因素 ,医院感染率高 ,特别需要加强控制 ,以降低医院感染率。

肠内营养联合生长激素对烫伤大鼠肠道的保护作用

目的探讨早期肠内营养(EEN)联合重组人生长激素(rhGH)对严重烫伤大鼠肠道的保护作用。方法W istar大鼠130只,随机分为正常组(N组,10只)、对照组(C组,40只)、EEN组(40只)、EEN+rhGH组(40只),后3组均给予背部30%TBSAⅢ度烫伤,于伤后第1、3、5、9天4个时相点处死取血,分离血清测定内毒素、肿瘤坏死因子a(TNFa)含量,取部分回肠肠管行形态学观察。测定N组以上各指标,作为对照。结果(1)C组肠黏膜坏死脱落,EEN组肠黏膜出现炎症反应,EEN+rhGH组绒毛高度明显高于其他组。(2)血清内毒素水平:EEN组和EEN+rhGH组在各时相点显著低于C组(P<0.01);EEN+rhGH组在各时相点低于EEN组,但差异无显著性意义(P>0.05)。(3)TNFα水平:EEN组和EEN+rhGH组在各时相点显著低于C组(P<0.05或0.01);EEN+rhGH组在伤后第3、9天显著低于EEN组(P<0.05或0.01)。结论严重烫伤后EEN可维护肠道结构和功能,减少细菌和内毒素移位,从而减轻机体的炎症反应;EEN+rhGH的作用优于单纯EEN。

胸腺五肽对严重烧伤小儿的免疫调节作用

目的 调查胸腺五肽 (thymopentin ,TP 5 )对严重烧伤小儿T淋巴细胞亚群及NK细胞的影响。 方法 分别检测治疗组 (2 0例 )和对照组 (2 0例 )病人伤后 2、5、10、17d外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞 ,治疗组病人从伤后第 2天起接受TP 5治疗 ,1mg/d ,肌肉注射 ,疗程 15d ;对照组不给予TP 5。 结果 烧伤后第 2天二组病人T淋巴细胞及NK细胞差异无显著性 ;烧伤后 5、10、17d二组病人T淋巴细胞总数差异无显著性 ,对照组CD8+细胞显著高于治疗组 (P <0 0 1) ,对照组CD4 + /CD8+ 比值显著低于治疗组 (P <0 0 1) ;治疗组NK细胞在伤后 5、10、17d均高于对照组 (P <0 0 5 )。结论 胸腺五肽能明显提高和改善严重烧伤小儿T淋巴细胞及NK细胞功能 。

烧伤中心肺炎克雷伯菌耐药性及产酶率分析

目的为了解本文中心肺炎克雷伯菌的耐药性及产酶率;方法对临床分离菌株按标准纸片扩散法进行产超广谱β-内酰胺酶菌检测;结果检出的61株肺炎克雷伯氏杆菌中发现8株产超广谱β-内酰胺酶,约占13.1%;结论肺炎克雷伯菌检出率增高可能与它与超广谱β-内酰胺酶有关,应引起临床的特别关注。

胸腺五肽对特重烧伤病人T淋巴细胞亚群的影响

目的 :胸腺五肽 (Thymopentin ,TP 5 )对特重烧伤病人T淋巴细胞亚群的影响。方法 :分别检测治疗组 (2 0例 )和对照组 (2 0例 )病人伤后第 2、5、8、15、2 2天外周血T淋巴细胞亚群 ,治疗组病人从伤后第 2天起接受TP 5治疗 ,1mg/d ,疗程 2 0d ;对照组不给予TP 5。结果 :烧伤后第 2天两组病人T淋巴细胞无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;烧伤后第 5、8、15、2 2天两组病人T淋巴细胞总数有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,对照组CD8+ 细胞显著高于治疗组 ,其CD4 + /CD8+ 比值显著低于治疗组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论 :胸腺五肽能明显提高和改善严重烧伤病人T淋巴细胞功能 ,可作为一种良好的免疫调节剂。

彩色多普勒超声在腕部电损伤动脉检查中的应用

目的采用彩色多普勒超声(CDU)对腕部动脉检查 ,了解电损伤后血管性质的改变 ,以指导临床治疗。方法选择腕部电损伤患者10例 ,将前臂由近心端至远心端平均分为A、B、C三区 ,测尺、桡动脉血管内径 ,管壁厚度、内膜 ,彩色及脉冲多普勒血流信号 ,动脉PSV和阻力指数(RI)。结果与正常对侧比较 ,腕部电损伤后血管表现为 :1)二维超声图像 :B至C区尺、桡动脉管径缩小 ;管腔节段性扩张及“串珠样”改变 ;管壁变厚 ;血管内膜粗糙。C区损伤较B区明显。B区远端较近端管壁厚度、内膜变化更明显。A区与对侧正常肢体对应动脉表现基本相似。2)脉冲多普勒频谱表现 :PSV在B、C区平均在30cm/s,RI平均为0.7～0.9。3)彩色血流显像显示 :7例伤者腕部血管在C和B区血管透声性较差 ,彩色血流信号不完整 ,显示管壁毛刺状或充盈缺损 ,镶嵌色血流处峰值流速增快。结论CDU为电损伤后动脉的检查提供了一种非侵入性的、可靠诊断方法。CDU能较好地分析血管电损伤的程度 ,为临床治疗提供指导。

烧伤残余创面的治疗

目的 探讨烧伤残余创面的治疗。方法 分析我科自 2 0 0 0年以来烧伤残余创面患者 35例。结果 35例烧伤残余创面经全身营养支持、创面浸浴及局部使用药物等治疗后创面愈合。结论 综合治疗是治疗烧伤残余创面的重要方法。

彩色多普勒超声在腕部电损伤血管检查中的应用

目的 :采用彩色多普勒超声 (CDU)对血管检查 ,了解电损伤后血管性质的改变 ,以指导临床治疗。方法 :选择腕部电烧伤患者 10例 ,将前臂由近心端至远心端平均分为A、B、C三区 ,观测尺、桡动脉血管内径 ,管壁厚度、内膜 ,彩色及脉冲多普勒血流信号 ,动脉PSV和阻力指数 (RI)。并检测健侧相应区段动脉作为对照。结果 :与正常对侧比较 ,腕部电损伤后血管表现为 :(1)二维超声图像 :B至C区尺、桡动脉管径缩小 ;管腔节段性扩张及“串珠样”改变 ;管壁变厚 ;血管内膜粗糙。C区损伤较B区明显。B区远端较近端管壁厚度、内膜变化更明显。A区与对侧正常肢体对应动脉表现基本相似。 (2 )脉冲多普勒频谱表现 :动脉收缩期峰值血流速度 (PSV)B、C区平均在 30cm s ,阻力指数平均 0 .7～ 0 .9。 (3)彩色血流显像显示 :7例伤者腕部血管在C和B区血管透声性较差 ,彩色血流信号不完整 ,彩色血流显示管壁毛刺状或充盈缺损 ,镶嵌色血流处峰值流速增快。ES 10 0VX探测结果不如CDU准确。结论 :彩色多普勒超声 (CDU)为电损伤后的动脉检查提供了一种非侵入性的可靠诊断技术。CDU能较好地分析血管电损伤的程度 。

应用Ⅳ型胶原黏附法进行人表皮干细胞的体外快速分离与鉴定

目的:以Ⅳ型胶原黏附法体外快速分离人表皮干细胞,利用其特异性标记物β1整合素及角蛋白19鉴定所培养细胞是否为表皮干细胞。方法:实验于2004-05/2005-03在南昌大学医学院烧伤研究所完成。①包皮来自行包皮环切术的儿童,由南昌大学第一附属医院提供,患者及其家属均签署知情同意书。②取手术刚切下的新鲜包皮,剔除皮下组织,采用DispaseⅡ酶和胰蛋白酶两步法分离出角朊细胞和成纤维细胞。收集处于对数生长期的第2～3代成纤维细胞的上清液,过滤除菌后与角朊细胞无血清培养基等比例混合,再加入体积分数为0.1的胎牛血清、表皮生长因子5μg/L、氢化可的松400μg/L、氯化钙0.05mmol/L、L-谷氨酰胺0.1mol/L、牛垂体提取物1.0mg/L,组成表皮干细胞培养液。分离的表皮片浸入2.5g/L胰蛋白酶-0.2g/L乙二胺四乙酸消化液中5min,所得细胞以表皮干细胞培养液悬浮。③将获得的角朊细胞悬液接种于预铺Ⅳ型胶原的六孔板中,每孔接种约1.5mL,室温静置10min,吸除未贴壁细胞,磷酸盐缓冲液漂洗至无细胞悬浮,即为富集分离的人表皮干细胞。加入人表皮干细胞培养基常规培养,第3天换液,后每隔1d换液一次。以同一标本同一批次培养的角朊细胞作为对照。④通过检测β1整合素、角蛋白19的表达水平及其克隆形成率和克隆维持时间,对其进行鉴定,以角朊细胞作为对照。结果:①人表皮干细胞形态学观察:倒置显微镜下,从角朊细胞中分离出的表皮干细胞体积小,呈单个、圆形贴壁,分散生长;培养12d后呈克隆样生长。②人表皮干细胞的克隆形成率:与同一标本同一批次培养的角朊细胞比较,人表皮干细胞的克隆形成率高[(8.72±0.73)%,(17.04±1.01)%,P<0.01],克隆维持时间更长[(9～10)d,(15～18)d,P<0.01]。③人表皮干细胞β1整合素和角蛋白19的表达:β1整合素及角蛋白19免疫组织化学染色均呈阳性。结论:①应用Ⅳ型胶原黏附法可对人表皮干细胞进行体外快速分离。②结合细胞形态学、细胞高克隆形成率和特异性标记物阳性表达等多种手段,鉴定所培养细胞为表皮干细胞。