壳聚糖海绵填充用于下颌阻生齿拔除术后疗效及对术后并发症的影响

目的 探讨壳聚糖海绵填充对下颌阻生齿拔除术后疗效及对术后并发症的影响。方法 选择2020年2月至2022年9月重庆大学附属三峡医院收治的下颌阻生智齿患者97例,以治疗方法不同将其分为研究组(50例)与对照组(47例)。两组均接受十字形分牙法拔牙,对照组不放置任何填充物,研究组于拔牙窝置入壳聚糖海绵填充。比较两组手术相关指标、术后肿胀程度、疼痛程度、生活质量、张口受限程度,比较两组术前及术后1 d炎症因子水平,记录两组并发症发生情况。结果 两组拔牙时间、术中出血量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组术侧口角到耳屏最下点的体表距离差值、视觉模拟评分法评分、症状严重程度量表评分均低于对照组(P<0.05)。研究组张口受限程度优于对照组(P<0.05)。术后1 d,两组血清白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α水平高于术前,且研究组高于对照组(P<0.05)。研究组并发症总发生率低于对照组(P<0.05)。结论 壳聚糖海绵填充可改善下颌阻生智齿患者术后肿胀、疼痛、张口受限等症状,减轻炎症反应,且可降低拔牙术后并发症发生风险。

雌激素介导下Wnt/β-catenin信号通路调控人牙周膜干细胞的成骨分化

背景:已有实验发现,雌激素能促进人牙周膜干细胞骨向分化,但雌激素调控人牙周膜干细胞成骨分化的具体机制目前尚未明确。目的:探讨雌激素通过Wnt/β-catenin信号通路对人牙周膜干细胞骨向分化的调控作用。方法:采用消化组织块法联合有限稀释克隆法分离培养并纯化得到人牙周膜干细胞,取第3代人牙周膜干细胞随机分为3组:单纯成骨诱导液组(对照组);含1×10^(-7)mol/L雌激素成骨诱导液组(雌激素组);含100μg/L Wnt3a成骨诱导液组(Wnt3a组)。各组在成骨诱导1,3,5,7 d时检测碱性磷酸酶活性,成骨诱导7 d时采用Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、GSK-3β、P-GSK-3β、CyclinD1以及成骨相关蛋白Runx-2、OCN的表达水平。结果与结论:(1)各组碱性磷酸酶活性随时间推移均呈上升趋势。雌激素组和Wnt3a组在诱导1,3,5,7 d各时间点碱性磷酸酶表达水平均高于对照组(P<0.05);而雌激素组和Wnt3a组表达水平差异无显著性意义(P>0.05);(2)雌激素组和Wnt3a组β-catenin、P-GSK-3β、CyclinD1的表达水平高于对照组(P<0.05),而GSK-3β表达水平低于对照组(P<0.05),同时雌激素组和Wnt3a组的成骨中晚期标志物Runx2、OCN表达水平均高于对照组(P<0.05)。雌激素组和Wnt3a组间Wnt/β-catenin信号通路相关因子和成骨中晚期相关蛋白的表达差异无显著性意义(P>0.05);(3)结果表明,雌激素可促进人牙周膜干细胞的成骨分化,这种促进作用的实现可能与雌激素微环境下活化人牙周膜干细胞中的Wnt/β-catenin信号通路有关。

雌激素微环境下非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路调控人牙周膜干细胞成骨分化的研究

目的:探讨雌激素作用下非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells hPDLSCs)成骨分化的调控。方法:将第3代hPDLSCs分为空白组、对照组、雌激素组、抑制剂组,成骨诱导7d检测ALP活性,Real-time PCR检测各组Wnt信号通路基因及成骨基因表达水平。结果:ALP检测结果示对照组较空白组ALP活性增加(P<0.05),雌激素组和抑制剂组较对照组ALP活性增加(P<0.05),但雌激素组和抑制剂组ALP活性差异无统计学意义(P>0.05)。Real-time PCR检测结果显示对照组较空白组Wnt信号通路基因β-catenin、CaMKⅡ、NLK及成骨基因RUNX2、OCN表达增加(P<0.05),雌激素组和抑制剂组较对照组Wnt信号通路基因β-catenin、CaMKⅡ、NLK及成骨基因RUNX2、OCN表达增加(P<0.05);抑制剂组较雌激素组β-catenin表达下降(P<0.05),而CaMKⅡ、NLK表达增加(P<0.05),但两组成骨基因RUNX2、OCN表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:雌激素可能通过增强非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路的活化促进hPDLSCs的成骨分化。

正畸牙压力区牙周膜细胞自噬相关蛋白Beclin-1与微管相关蛋白2轻链3的表达

目的探究正畸牙压力区牙周膜细胞自噬相关蛋白Beclin-1与微管相关蛋白2轻链3(LC3Ⅱ)的表达。方法将60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组和9个实验组,实验组正畸加力0.392 N近中移动右上第一磨牙,加力时间分别为15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、12 h、1 d、3 d、7 d,空白对照组不做任何处理。处死大鼠后,行苏木精-伊红(HE)染色观察压力区牙周膜形态学变化、免疫组织化学染色检测Beclin-1与LC3Ⅱ的表达、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色计数破骨细胞。结果 HE染色显示,加力1 d后压力区牙周膜透明样变出现,并随加力时间延长逐渐加重。免疫组织化学染色显示,实验组Beclin-1和LC3Ⅱ表达均上调,1 h达峰值,随后逐渐降低,1 d时再次增强达一小峰值,后又回降,7 d时降低至基线水平。破骨细胞中也可见Beclin-1和LC3Ⅱ的表达。TRAP染色提示,加力1 d后破骨细胞数量开始增加。结论自噬或许通过介导牙周膜透明样变发生和影响破骨细胞生物学作用参与正畸牙压力区牙周膜改建的过程。

钙离子对人牙囊细胞增殖、迁移和成骨分化的影响

目的:探讨Ca2+对人牙囊细胞增殖、迁移及成骨分化能力的影响。方法:分离、培养人牙囊细胞(human dental follicle cells,hDFCs),免疫荧光染色检测hDFCs来源,茜素红S和油红O染色鉴定多向分化能力;设置不同Ca2+浓度,CCK8法检测1、3、5、7 d时hDFCs的增殖能力;Transwell小室检测24 h时hDFCs的迁移能力;茜素红染色半定量分析法检测钙结节形成;反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测成骨分化相关基因RUNT相关转录因子2(runtrelated transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:与对照组相比,3、5、7 d时,3、4、5 mmol/L Ca2+显著促进hDFCs增殖(P<0.05);3、4、5、6 mmol/L Ca2+显著促进hDFCs迁移(P<0.01),高浓度Ca2+对其增殖、迁移无显著影响(P>0.05)。茜素红染色结果表明,Ca2+浓度达4 mmol/L时,可显著促进矿化结节生成(P<0.01),矿化物生成与Ca2+呈浓度依赖性。RT-qPCR结果表明,Ca2+上调成骨分化相关基因RUNX2、OCN的表达(P<0.01)。结论:低浓度Ca2+有利于人牙囊细胞增殖与迁移,而高浓度Ca2+更有利于人牙囊细胞成骨分化。

饥饿环境中活性氧激活人牙周膜细胞自噬的研究

目的:研究饥饿环境下人牙周膜细胞(hPDLCs)的自噬水平变化,探讨活性氧(ROS)在自噬过程中的作用。方法:分离培养hPDLCs, EBSS模拟营养缺乏环境,透射电镜观察自噬小体的产生评估hPDLCs中的自噬水平;抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理抑制ROS的生成,DCFH-DA染色检测ROS水平,RT-qPCR、Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1、p62表达情况,探究饥饿环境下自噬激活的调控机制。结果:经EBSS饥饿培养,hPDLCs自噬激活。NAC通过抑制ROS生成,部分逆转了饥饿的hPDLCs中的自噬水平。结论:ROS作为信号分子介导自噬,饥饿通过诱导ROS生成激活hPDLCs自噬,保护细胞免受营养缺乏的损害。