SFE-HPLC测定银杏叶粗提物中黄酮类化合物的含量

采用超临界流体萃取法提取银杏叶粗提物中总黄酮苷 ,确定最佳萃取条件为 :压力 4136 4Pa;温度6 0℃ ;静态萃取时间 4min;动态萃取体积 4m L ;改性剂加入量 0 .2 m L乙醇 ;用 HPL C测定含量 ,结果表明 :本法简便快速 ,萃取完全 ,为银杏叶粗提物的分离、纯化。

人神经干细胞微囊泡对谷氨酸诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:探究人神经干细胞微囊泡(human neural stem cell microvesicles,hNSC-MVs)对谷氨酸诱导PC12细胞损伤的作用及可能机制。方法:采用谷氨酸处理大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC12细胞,建立兴奋性损伤模型;实验分为3组:对照组,PC12细胞未经任何处理;谷氨酸组,谷氨酸处理PC12细胞24 h;hNSC-MVs+谷氨酸组,200 mg/L hNSC-MVs预处理PC12细胞24 h,再加入谷氨酸处理24 h。MTT法检测各组PC12细胞存活率;免疫印迹实验检测细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达。结果:PC12细胞能内化hNSC-MVs。谷氨酸对PC12细胞具有毒性作用,其半数抑制浓度为25 mmol/L。与谷氨酸组相比,hNSC-MVs+谷氨酸组PC12细胞存活率明显增高(P<0.01)。与对照组相比,谷氨酸组Bax蛋白表达显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低,而与谷氨酸组相比,hNSC-MVs+谷氨酸组Bax蛋白表达明显下调,Bcl-2蛋白表达明显上调(P均<0.01)。结论:hNSC-MVs可能通过抑制谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,从而发挥保护作用。

海绵城市建设的难点与技术要点探析

城市化建设进程的不断加深给我国城市建设发展提出了更高的要求。在这样的情况之下,为了更好地满足人们的实际生活需求,不断的提升城市建设过程当中的环保水平和节能水平,相关的工作人员就必须要全面加强对海绵城市建设的研究。根据实际的情况合理的选择适合的海绵城市建设的技术和有效方案,不断地提升海绵城市建设的科学性、规范性、有效性。本文首先分析了海绵城市建设存在的技术难点,然后进一步的分析了海绵城市建设技术要点的实际应用。

人胚胎干细胞源神经干细胞微囊泡对巨噬细胞极化的影响

目的:探究人胚胎干细胞源神经干细胞微囊泡对巨噬细胞极化的影响。方法:Dil标记神经干细胞微囊泡,流式细胞仪和共聚焦显微镜观察THP-1巨噬细胞对微囊泡的内化;实时荧光定量PCR筛选微囊泡最适浓度;100 ng/mL脂多糖刺激THP-1细胞6 h后,微囊泡处理12 h,实时荧光定量PCR检测巨噬细胞炎性因子IL-1β,肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及IL-6的mRNA表达水平;微囊泡处理24 h,蛋白免疫印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和精氨酸酶1(Arginase-1,Arg-1)蛋白表达水平;流式细胞术检测THP-1巨噬细胞M1极化表面标志CD86表达。结果:THP-1巨噬细胞在12 h和24 h均能明显内化神经干细胞微囊泡;0.12μg/mL微囊泡具有最适调控作用;与未处理细胞相比,脂多糖处理后明显增加THP-1细胞IL-1β,TNF-α,IL-6等mRNA和iNOS蛋白,Arg-1蛋白表达差异无统计学意义(P<0.05);经神经干细胞微囊泡处理后THP-1细胞IL-1β,TNF-α,IL-6等mRNA和iNOS蛋白表达明显降低(P<0.05);与未处理细胞相比,脂多糖和微囊泡处理后THP-1巨噬细胞CD86表达差异无统计学意义。结论:人胚胎干细胞源神经干细胞微囊泡能够减少THP-1细胞炎性细胞因子和iNOS表达,抑制巨噬细胞M1极化。

人神经干细胞源施万样细胞微囊泡促进大鼠神经元轴突生长

目的:探究人神经干细胞源施万样细胞微囊泡对大鼠神经元轴突生长的影响。方法:选取出生4~5 d的SD大鼠乳鼠,摘取背根神经节(dorsal root ganglion,DRG),获得DRG神经元;用施万样细胞微囊泡刺激DRG神经元,行βⅢ-微管蛋白免疫荧光染色,观察轴突生长情况;分别用0、5、20、40 mg/L施万细胞微囊泡刺激神经元样N2a细胞19 h,用荧光定量PCR检测N2a细胞生长相关蛋白43(growth associated protein 43,GAP43) mRNA表达;分别用0、20、40 mg/L施万细胞微囊泡刺激N2a细胞48 h,行过碘酸-雪夫染色,检测细胞内糖原生成情况。结果:施万样细胞微囊泡组的DRG神经元轴突长度明显长于PBS组(P <0. 05)。施万样细胞微囊泡可被N2a细胞吞噬。与0 mg/L组相比,5 mg/L组GAP43 mRNA表达差异无统计学意义(P> 0. 05);20、40 mg/L组GAP43 mRNA表达量、突起增长率及碘酸-雪夫染色细胞阳性率均明显高于0 mg/L组(P均<0. 05)。结论:施万细胞微囊泡在体外能够促进大鼠神经元轴突生长。