标本贮存时间和温度对流式细胞术分析淋巴细胞亚群的影响

目的:评估样本贮存时间和温度对流式细胞仪分析外周血淋巴细胞亚群影响。方法:流式细胞术分析采血后不同贮存时间和温度对20例随机抽取患者外周血淋巴细胞亚群百分比和平均荧光强度(MFI)的影响。结果:室温和低温贮存60h内淋巴细胞亚群百分比均无明显改变;室温贮存48h、低温贮存36h淋巴细胞荧光抗体MFI可见明显变化,室温贮存24h、低温贮存12h FSCA MFI可见明显下降;低温贮存下T淋巴细胞百分比和MFI比相同时间室温贮存变化更明显。结论:标本采集后室温贮存36h内进行淋巴细胞亚群检测,检测时适当调高FSC电压或降低FSC阈值,可保障检测结果稳定。

FCM分析淋巴细胞亚群和DNA倍体在淋巴结肿大患者中的诊断意义

目的评价淋巴结细针穿刺进行淋巴细胞亚群和DNA倍体分析,在淋巴结肿大患者诊断与鉴别诊断中的应用价值。方法应用流式细胞术(FCM)对淋巴结肿大患者淋巴结细针穿刺液进行淋巴细胞亚群和DNA倍体分析,并与病理组织诊断和细胞形态学比较。结果 1淋巴结肿大97例,淋巴结炎44例,非霍奇金淋巴瘤(NHL)24例,淋巴结转移癌29例,与病理组织诊断总体符合率为95.8%。2淋巴结炎患者没有异常淋巴细胞抗原表达;NHL存在异常淋巴细胞抗原表达;淋巴结转移癌患者可见一前向散射光(FS)或侧向散射光(SS)较大的CD45阴性无血液系统来源标记的细胞群。3淋巴结炎患者均为正常细胞周期,NHL和淋巴结转移癌患者出现S期比例增加或异常细胞峰。结论淋巴结穿刺进行淋巴细胞亚群和DNA倍体分析是判断肿大淋巴结性质的有效手段,有助于淋巴结肿大特别是淋巴瘤和淋巴结转移癌的早期诊断及鉴别诊断。

CD14＋HLA-DR low／-预测急性胰腺炎严重程度的作用研究

目的：探讨CD4＋CD25＋/highCD127low/-和CD14＋HLA-DRlow/-预测急性胰腺炎严重程度的作用。方法流式细胞仪检测AP患者（ acute pancreatitis ， AP）外周血CD4＋CD25＋/high CD127 low/-、CD14＋HLA-DRlow/-、CD64指数的水平，并与C-反应蛋白（CRP）、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（ APACHEⅡ）评分、CT严重度指数（ CTSI ）进行相关性分析。结果重症胰腺炎、轻型胰腺炎组CD4＋CD25＋/high CD127 low/-、CD14＋HLA-DRlow/-、CD64指数均明显高于正常对照组，重症胰腺炎组CD14＋HLA-DRlow/-高于轻型胰腺炎组；动态观察结果显示，轻型胰腺炎组CD4＋CD25＋/high CD127 low/-、CD14＋HLA-DRlow/-、CD64指数、CRP均先升高后明显回落；而重症胰腺炎组却持续升高；相关性分析显示，CD14＋HLA-DRlow/-与 CD64指数、CRP、APACHEⅡ、CTSI 成明显正相关。结论 CD14＋HLA-DRlow/-与AP严重程度密切相关，可作为疾病严重程度的指标。

脓毒症患者调节性T细胞与CD_(64)指数的相关性研究

目的探讨CD4+CD25+/highCD127low/-、CD14+HLA-DR+在脓毒症发生发展中的作用。方法流式细胞术检测脓毒症患者(其中生存组17例,死亡组11例)CD4+CD25+/highCD127low/-、CD14+HLA-DR+、CD64指数,同时测定白细胞数(WBC)和C-反应蛋白(CRP)的水平,并与正常对照组比较。结果脓毒症组CD4+CD25+/highCD127low/-、CD64指数均明显高于正常对照组,CD14+HLA-DR+明显低于正常对照组;动态观察结果显示,随着疾病的进展,生存组CD4+CD25+/high CD127low/-、CD64指数均明显回落,而死亡组两者却持续升高;而CD14+HLA-DR+刚好相反,生存组CD14+HLA-DR+逐渐升高,死亡组CD14+HLA-DR+明显低于存活组,且持续处于低水平状态;相关性分析显示,CD4+CD25+/highCD127low/-与CD64指数、CRP正相关;CD14+HLA-DR+与CD64指数、CRP明显负相关;CD64指数与WBC、CRP正相关。结论 CD4+CD25+/highCD127low/-、CD14+HLA-DR+与疾病感染和炎症严重程度密切相关,可作为疾病严重程度及预后的指标。

CD19^＋CD24^ hi CD27^ hi调节性 B 细胞预测急性胰腺炎严重程度的作用研究

目的：探讨调节性B细胞（ regulatory B cells ， Bregs ）在急性胰腺炎发病机制中的作用。方法流式细胞仪检测急性胰腺炎患者（其中轻型胰腺炎36例，重症胰腺炎15例）外周血CD19^＋IL-10^＋、CD19^＋CD24^hiCD27^hi Bregs 比例及CD19^＋CD24^hi CD27^hi Bregs 表面共刺激分子CD80和CD86，并与淋巴细胞数、C反应蛋白（CRP）作相关性分析。结果重症胰腺炎、轻型胰腺炎患者外周血中淋巴细胞数、CD19^＋淋巴细胞数、CD19^＋IL-10^＋、CD19^＋CD24^hi CD27^hi Bregs及CD19^＋CD24^hi CD27^hi Bregs细胞表面CD80、CD86平均荧光强度均明显低于正常对照组，重症胰腺炎组淋巴细胞数、CD19^＋淋巴细胞数、CD19^＋IL-10^＋绝对数、CD19^＋CD24^hiCD27^hi Bregs绝对数及CD19^＋CD24^hiCD27^hi Bregs细胞表面CD80和CD86平均荧光强度低于轻型胰腺炎组。动态观察结果显示，随着疾病的进展，轻型胰腺炎组CD19^＋IL-10^＋、CD19^＋CD24^hiCD27^hi Bregs均先降低后明显升高；而重症胰腺炎组CD19^＋IL-10^＋、CD19^＋CD24^hiCD27^hi Bregs却持续降低。相关性分析显示，CD19^＋IL-10^＋与CD19^＋CD24^hiCD27^hi Bregs， CD19^＋淋巴细胞数成明显正相关，而与CRP 成明显负相关。结论 CD19^＋IL-10^＋与 CD19^＋CD24 hi CD27^hi Bregs细胞数量及功能异常可能是导致急性胰腺炎患者免疫功能紊乱的重要原因之一。

脓毒症患者CD4＋CD25＋/highCD127low、CD14＋HLA-DR＋与CD64指数的相关性研究

近年研究证实,脓毒症不仅存在促炎症反应导致的免疫功能亢进,同时也存在抗炎症反应所致的免疫功能抑制,丽过度的免疫功能抑制所导致的免疫麻痹同样使脓毒症恶化发展至多脏器功能障碍综合征（multiorgan dysfunction syndrome,MODS）,对免疫功能状态的正确评价是针对脓毒症进行干预和成功治疗的关键.