燃煤型氟中毒对雌鼠血细胞的影响

目的探讨不同染氟剂量在不同时间对雌鼠血细胞的影响。方法选用SD雌性大鼠按体质量分为对照组(饲以非病区玉米饲料,含氟量为5.2mg/kg)、中氟组、高氟组(饲以掺入燃煤型氟中毒病区玉米饲料,含氟量分别为47.8、96mg/kg),中氟组、高氟组合称染氟组。于染氟60、120、180d进行血常规检测。结果染氟60、120d高氟组白细胞(WBC)较中氟组明显减少(P<0.05)。第60、120天和180天时染氟组红细胞(RBC)较对照组显著减少(P<0.05),染氟组第120天时RBC较第60、180天减少(P<0.05)。染氟60、120d时染氟组血红蛋白(Hb)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)较对照组减低(P<0.05),第180天时染氟组MCV反而有增高趋势(P<0.05);染氟组内Hb、HCT染氟120d均比60、180d低(P<0.05);中氟组MCV随时间推移逐渐降低,180d时显著低于60d(P<0.05),高氟组染氟120dMCV均比60、180d低(P<0.05)。中氟组内染氟120d平均血红蛋白含量(MCH)比60、180d高(P<0.05),高氟组内染氟180d时MCH比60d高(P<0.05)。结论氟中毒对SD雌鼠的血细胞有不同程度的影响,尤其对红细胞系统的影响最大。染氟早期、中期RBC表现为小RBC高色素性。染氟晚期表现为大细胞高色素性。

2型糖尿病患者血小板参数及血小板表面相关膜糖蛋白和线粒体膜电位表达的临床意义

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)患者血小板参数、血小板聚集功能(PAgT)、血小板表面相关膜糖蛋白(CD41b、CD61和CD62P)及线粒体膜电位(△ψm)表达的临床意义。方法:选取75例T2DM患者和50例健康对照者,取清晨空腹静脉血,检测血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)、血小板压积(PCT)、血小板分布宽度(PDW)、PAgT、CD41b、 CD61、CD62P及△ψm的变化。结果:与对照组比较,T2DM患者MPV、PDW及PAgT水平均升高( P< 0.05);△ψm表达降低( P< 0.05);CD41b、CD62P表达升高( P< 0.05)。结论: T2DM患者部分血小板相关参数发生变化,这些参数的变化可能是糖尿病患者微血管病变的早期指标。

燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢TGF-α的影响

目的:动态观察燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢转化生长因子(TGF-α)的影响。方法:SD雌鼠90只,随机均分为对照组、中氟组和高氟组,于不同时间段(60 d、120 d、180 d)观察氟斑牙,用离子选择电极法测定雌鼠尿氟、骨氟含量;电镜下观察卵巢凋亡情况,用TUNEL技术检测卵巢凋亡细胞数,用免疫组化法检测卵巢TGF-α的表达。结果:随着染氟剂量增加和染氟时间的延长,雌鼠氟斑牙症状逐渐加重,尿氟、骨氟含量增加,染氟组卵巢凋亡细胞数明显增加;与对照组相比,相同染氟时间各染氟组卵巢颗粒细胞TGF-α蛋白表达量均降低(P<0.05),高氟组低于中氟组,差异有统计学意义(P<0.05);相同染氟剂量,随着染氟时间延长,各染氟组TGF-α含量逐渐减少,中氟组60 d高于120 d和180 d,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:氟中毒可能导致卵巢组织细胞超微结构损伤,严重破坏颗粒细胞中线粒体,影响卵巢细胞的能量供应,促使卵巢颗粒细胞凋亡;氟中毒可导致TGF-α分泌减少使其参与阻碍卵泡凋亡和闭锁的作用减弱,促使卵巢颗粒细胞的凋亡增加。

燃煤型氟中毒雌鼠卵巢IL-1β细胞因子的表达

目的动态观察燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢IL-1β细胞因子的影响。方法采用自由食用织金病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米复制燃煤型氟中毒动物模型(对照组、中氟组、高氟组),动态观察雌鼠染氟期间牙齿变化情况。采用离子选择电极法、高温灰化-氟离子选择电极法测定雌鼠尿氟、骨氟含量。于不同时段(60d、120d、180d)动情期处死雌鼠,分离卵巢。免疫组化法检测卵巢颗粒细胞内分泌细胞因子IL-1β的表达。结果 (1)成功复制实验动物模型。(2)随着染氟剂量增加及染氟时间的延长,雌鼠氟斑牙症状逐渐加重。(3)雌鼠尿氟、骨氟含量随着染氟剂量的增加及染氟时间的延长而增加。(4)在染氟时间相同的组别(60d、120d、180d),各染氟组(中氟组、高氟组)与对照组相比卵巢颗粒细胞IL-1β蛋白表达率均降低(P<0.05),高氟组低于中氟组(P<0.05);染氟剂量相同,随着染氟时间延长,各染氟组(中氟组、高氟组)IL-1β含量逐渐减少,与对照组相比有统计学意义(P<0.05)。(5)与对照组相比,染氟60d时,中氟组、高氟组雌鼠E2含量随染氟剂量的增加而逐渐增高(P<0.05)。染氟120d、180d中氟组、高氟组雌鼠E2含量随染氟剂量的增加而逐渐降低,但差异均无统计学意义(P>0.05);随着染氟时间点的变化(60d、120d、180d),对照组雌鼠E2含量呈从低到高再降低的波动性变化,120d雌鼠高于60d和180d,且120d与60d比较差异有统计学意义(P<0.05)。中氟组、高氟组E2含量逐渐减低,但仅有高氟组60d、120d分别与180d比较有统计学意义(P<0.05)。结论过量的氟可抑制IL-1β在卵巢颗粒细胞的表达,致使IL-1β影响颗粒细胞、P分泌和参与生殖调节的作用也减弱,E2含量减少。这可能是氟中毒致使血清E2降低的机制之一。

燃煤型氟中毒对雌性大鼠卵巢颗粒细胞的影响

目的动态观察燃煤型氟中毒对雌性大鼠卵巢颗粒细胞的影响。方法将清洁级SD雌性大鼠90只随机分为对照组、中氟组、高氟组,每组30只,对照组大鼠食用非病区玉米饲料(含氟量5.2 mg/kg),中氟组和高氟组分别在饲料中添加45%和75%的某病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料(含氟量分别为47.8、96.0 mg/kg)。每组分别于60、120、180 d动态观察雌鼠氟斑牙变化情况,测定尿氟、骨氟水平,采用透射电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构变化,末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测卵巢颗粒细胞凋亡情况。结果成功建立燃煤型氟中毒雌鼠模型。透射电镜下发现,对照组卵巢颗粒细胞形态结构正常;染氟组可见颗粒细胞核膜皱缩,内质网、核糖体逐渐减少,线粒体肿胀,胞浆内出现较多的脂滴,随染氟剂量的增加逐渐出现颗粒细胞凋亡特征。除中氟组染氟60 d时卵巢颗粒细胞凋亡率与对照组差异无统计学意义外(P>0.05),各染氟组雌鼠颗粒细胞凋亡率均高于同期对照组(P<0.05),且随染氟时间的延长和剂量的增加,颗粒细胞凋亡率逐渐增加。结论氟中毒可能通过影响大鼠卵巢颗粒细胞结构,诱导和促进卵巢颗粒细胞凋亡,且颗粒细胞超微结构的损伤程度和凋亡率与染氟时间及剂量有关。

低蛋白条件对燃煤型氟中毒雌鼠卵巢颗粒细胞的影响

为了解低蛋白条件对燃煤型氟中毒雌鼠卵巢颗粒细胞的影响,选取120只断乳2周的60~80 g清洁级SD雌性大鼠,随机分为对照组、低蛋白组、染氟组、低蛋白染氟组,每组30只。对照组和低蛋白组进食75%非病区玉米饲料(含氟量为5.2 mg/kg),染氟组和低蛋白染氟组进食75%燃煤型氟中毒病区玉米饲料(含氟量为96 mg/kg);对照组及染氟组饲料中大豆蛋白质含量为18 g/kg,低蛋白组和低蛋白染氟组为9 g/kg。每组分别于60、120、180 d动态观察雌鼠氟斑牙变化情况,测定尿氟、骨氟水平,采用透射电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构变化,以末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测卵巢颗粒细胞凋亡情况。结果显示,成功建立燃煤型氟中毒雌鼠模型,低蛋白染氟组较染氟组电镜下病理损伤更明显。与对照组比较,低蛋白组120、180 d卵巢颗粒细胞凋亡率升高,染氟组和低蛋白染氟组60、120、180 d卵巢颗粒细胞凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05);低蛋白染氟组60、120、180 d卵巢颗粒细胞凋亡率高于低蛋白组,60、120 d卵巢颗粒细胞凋亡率高于染氟组,差异均有统计学意义(P<0.05)。染氟组180 d时卵巢颗粒细胞凋亡率高于60 d,差异有统计学意义(P<0.05)。析因分析结果显示,饲养60、120、180 d时氟对雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡率有影响(F值分别为1 180.051,1 187.294,999.577,P<0.05);饲养60、120 d时低蛋白对雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡率有影响(F值分别为17.613,12.706,P<0.05),而饲养180 d时无影响(F=4.017,P>0.05),氟与低蛋白对雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡率的影响无交互效应(F值分别为3.479,0.088,0.941,P>0.05)。提示低蛋白条件下燃煤型氟中毒雌鼠卵巢颗粒细胞病理损伤有所加重,但低蛋白与氟染毒对凋亡率的影响无明显相关性。

煤氟污染的粮食对雌鼠动情周期的影响

目的了解食用煤氟污染的粮食对雌鼠阴道开张日龄、动情周期及生殖内分泌功能的影响。方法选用90只断乳2周、体质量60～80g的SD雌性大鼠，将大鼠按体质量采用随机数字表法分为对照组、中氟组、高氟组，每组30只。各染氟组通过喂饲含不同比例的燃煤型氟中毒病区煤烘烤玉米（含氟量分别为47．8、96．0mg／kg）复制燃煤型氟中毒模型，对照组的玉米饲料来自于非病区（含氟量为5．2mg／kg）。分别于染氟60、120、180d后，分3批动情期处死大鼠，每组每批10只。喂养初期，每天早上8：00观察并记录雌鼠阴道开张情况。处死前连续10d，雌鼠行阴道脱落细胞涂片，HE染色后判别动情周期。于动情期股动脉取血检测雌激素（E2）水平。结果高氟组雌鼠阴道开张日龄[（49．0±4．5）d]长于对照组、中氟组[（45．4±2．3）、（46．7±1．9）d，P均〈0．05]。染氟120d，高氟组的雌鼠动情周期[（5．8±0．8）d]长于对照组、中氟组[（4．4±0．9）、（4．9±0．7）d，P均〈0．05]。染氟180d，对照组、中氟组、高氟组的雌鼠动情周期[（4．3±0．7）、（5．4±1．1）、（6．7±0．9）d]依次延长（P均〈0．05）。在高氟组，染氟180d雌鼠的动情周期[（6．7±0．9）d]高于染氟60、120d[（5．2±1．1）、（5．8±0．8）d，P均〈0．05]。染氟60d时，中、高氟组雌鼠E2含量[（438．75±71．80）、（456．25±57．80）ng／L]均高于对照组[（301．25±94．17）ng／L，P均〈0．05]，随染氟剂量增加而逐渐升高；仅高氟组在180dE2水平[（275．00±127．83）ng／L]低于60、120d[（456．25±57．80）、（392．50±102．50）ng／L，P均〈0．05]。结论燃煤型氟中毒可导致雌鼠开张日龄和动情周期延长及生殖内分泌水平改变，且染氟剂量越多、染毒时间越长，影响越重。

低蛋白摄入对雌鼠氟中毒的影响

目的观察低蛋白摄入对氟中毒雌鼠体质量、骨氟、尿氟、氟斑牙的影响。方法选用120只断乳2周SD雌鼠为研究对象，自由食用贵州省织金县地方性氟中毒病区原煤烘烤的玉米饲料，以复制燃煤型氟中毒动物模型，将雌鼠按体质量（60～80g）采用随机数字表法分为4组：对照组、低蛋白组、氟中毒组、低蛋白氟中毒组，每组30只。对照组给予正常饲料，低蛋白组给予50％蛋白含量饲料，氟中毒组给予含氟100mg／kg饲料，低蛋白氟中毒组给予50％蛋白含量及含氟100mg／kg饲料。分别于60、120、180d时称雌鼠体质量。观察各组雌鼠牙齿的变化情况；采用离子选择电极法、高温灰化-氟离子选择电极法测定雌鼠尿氟、骨氟含量。结果对照、低蛋白组雌鼠未出现氟斑牙，氟中毒、低蛋白氟中毒组随着染氟时间延长氟斑牙症状逐渐加重。随着染氟时间的延长（60、120、180d），雌鼠尿氟、骨氟在氟中毒组[（10．823±1．950）、（13．918±1．871）、（20．862±2．346）mg／L，（114．731±12．036）、（142．847±11．341）、（233．331±12．940）mg／kg]、低蛋白氟中毒组雌鼠[（10．644±1．924）、（11．019±1．304）、（22．870±3．427）mg／L，（123．477±10．746）、（162．847±12．740）、（293．856±22．662）mg／kg]含量均逐渐增加，组内不同时间比较差异有统计学意义（F=61．915、216．329，83．821、301．655，P均〈0．05）。染氟60、120、180d各组雌鼠尿氟、骨氟含量比较，差异均有统计学意义（F=178．756、515．645．351．830、822．107，340．678、1187．511，P均〈0．05）。氟中毒组、低蛋白氟中毒组尿氟、骨氟含量均高于对照组[（0．681±0．145）、（0．730±0．133）、（0．766±0．151）mg／L，（15．037±4．202）、（17．095±3．129）、（18．357±3．730）mg／kg]、低蛋白组[（0．688±0．083）、（1．096±0．076）、（0．820±0．148）mg／L，（15．855±0．928）、（16．674±1．621）、（18．320±1．011）mg／kg]。低蛋白、氟的交互作用对120、180d雌鼠尿氟、骨氟有影响（F=19．297、13．047，15．393、52．704，P均〈0．05）；对60、120、180d雌鼠体质量无影响（F=0．164、0．329、0．209，P均〉0．05）。结论低蛋白与氟中毒的程度密切相关，增加骨氟的沉积，加重氟斑牙的严重程度及发生率，但与体质量无明显关系。

煤氟污染的粮食对动情期雌鼠全血铜、锌、铁、钙、镁元素的影响

目的 了解食用煤氟污染的粮食对动情期雌鼠全血铜（Cu）、锌（Zn）、铁（Fe）、钙（Ca）、镁（Mg）元素的影响。方法 选取贵阳医学院动物实验中心提供的90只断乳2周、体重60-80 g的SD雌性大鼠为研究对象,随机分为对照组、中氟组、高氟组,每组各30只。各染氟组喂饲含不同比例的燃煤型氟中毒病区煤烘烤玉米（含氟量分别为47.8 mg/kg、96 mg/kg）复制燃煤型氟中毒模型,对照组玉米饲料来自非病区（含氟量为5.2 mg/kg）。分别于染氟60、120、180天时于股动脉取血,检测Cu、Zn、Fe、Ca、Mg元素水平。结果 60天时染氟组Cu、Zn、Fe明显降低,高氟组Ca明显增高,差异有统计学意义（P均〈0.05）;3组Mg随染氟剂量增加而降低,差异无统计学意义（P〉0.05）。120天时染氟组Cu均升高;高氟组Zn高于对照组、中氟组Zn随染氟剂量增加而升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;120天时高氟组Fe降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。180天时染氟组Cu、Zn、Fe、Ca、Mg接近对照组水平,差异无统计学意义（P〉0.05）。染氟组Cu在120、180天高于60天,差异有统计学意义（P〈0.05）,且随染氟时间的延长逐渐升高。染氟组Zn在120、180天高于60天,差异有统计学意义（P〈0.05）,高氟组Zn在180天低于120天,差异有统计学意义（P〈0.05）。染氟组Fe在120、180天高于60天,随着中毒时间延长逐渐升高,除中氟组120、180天之间差异无统计学意义外（P〉0.05）,其余各组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。中氟组Ca在120、180天高于60天,随染毒时间延长,全血Ca含量逐渐增加,仅在60、180之间差异有统计学意义（P〈0.05）;高氟组60、120、180天全血Ca含量基本维持同一水平,差异无统计学意义（P〉0.05）。3组Mg均随时间延长而逐渐增加,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 燃煤型氟中毒可导致动情期雌鼠全血Cu、Zn、Fe、Ca、Mg水平紊乱,不同染氟剂量在不同染氟时间对这些元素影响错综复杂。

钙尔奇牌添佳片对燃煤型氟中毒雌鼠贫血的干预

目的观察钙尔奇牌添佳片对燃煤型氟中毒雌鼠贫血的干预。方法选用SD雌性大鼠按体重随机分为对照组、高氟组、高氟+钙尔奇牌添佳片组(干预组),染氟组喂饲含燃煤型氟中毒病区煤烘烤玉米,对照组的玉米饲料来自于非病区。分别于染氟60 d、120 d、180 d断尾取血,进行RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC测定。结果除60 d的RBC外,高氟组RBC、HGB、HCT均低于同期对照组(P<0.05),120 d、180 d干预组RBC、HGB、HCT均高于同期高氟组(P<0.05);60 d干预组MCV低于对照、高氟组(P<0.05);120 d干预组MCH、MCHC高于对照、高氟组(P<0.05)。结论氟中毒对SD雌鼠的红细胞系统有明显影响;钙尔奇牌添佳片能拮抗雌鼠燃煤型氟中毒所致的贫血现象。

多种营养素干预燃煤型氟中毒对雌鼠氟斑牙及骨氟和尿氟的影响

目的探讨钙、镁、铜、锌、维生素D和大豆联合干预对燃煤型氟中毒雌鼠氟斑牙、骨氟和尿氟的影响。方法将120只SD雌鼠分为对照组、染氟组、高氟+钙尔奇牌添佳片组(即多种元素干预组)、高氟+钙尔奇牌添佳片+大豆组(即多种元素+大豆干预组),每组30只,动物自由食用不同配方的织金病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料,构建燃煤型氟中毒动物模型。每组分别于染氟60、120、180 d选择10只大鼠,动态观察雌鼠染氟期间氟斑牙情况,分别采用离子选择电极法、高温灰化-氟离子选择电极法测定雌鼠尿氟、骨氟含量。结果随着染氟时间的延长,氟斑牙症状加重,干预组大鼠氟斑牙程度比染氟组轻。染氟组雌鼠尿氟、骨氟含量均高于同一时间点(60、120、180 d)的对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。同一时间点时,染氟组、多种元素干预组、多种元素+大豆干预组雌鼠的尿氟含量依次增加,差异均有统计学意义(P<0.05);染氟组雌鼠骨氟含量高于对照组,但多种元素干预组、多种元素+大豆干预组骨氟含量均低于染氟组,差异有统计学意义(P<0.05)。随着染毒时间的延长,染氟组、多种元素干预组、多种元素+大豆干预组的尿氟含量均逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);染氟组骨氟含量逐渐增加,多种元素干预组、多种元素+大豆干预组骨氟含量逐渐降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高剂量氟对雌鼠有明显毒性作用,多种营养素干预可拮抗其毒性作用,若在此基础上添加大豆联合干预则拮抗作用更明显。

燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能影响

目的动态观察燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能影响。方法 SD雌鼠自由食用织金病区原煤烘烤的玉米饲料复制燃煤型氟中毒动物模型;动态观察雌鼠染氟期间牙齿的变化情况;测定大鼠尿氟、骨氟含量;分离卵巢计算卵巢系数,光镜下观察卵巢组织形态、各级卵泡及黄体的数量变化;于不同时间段(60、120、180 d)动情期处死雌鼠,分离血清,放射免疫法检测血清中雌二醇含量。结果与对照组比较,随染氟时间增加,染氟组雌鼠尿氟与骨氟含量明显升高,呈时间效应关系;各染氟组雌鼠卵巢卵泡颗粒细胞呈现渐进性水肿变化,闭锁卵泡和黄体退化逐渐增多,成熟卵泡偶见;与对照组比较,中氟组雌鼠染氟180 d闭锁卵泡数量[(24.700±4.138)个]与高氟组雌鼠染氟120、180 d时闭锁卵泡数量[分别为(24.200±3.706)、(25.000±4.714)个]明显升高(P<0.05);与对照组比较,染氟60 d时,中、高氟组雌鼠血清中雌二醇含量[分别为(43.875±7.180)、(45.625±5.780)pmol/L]升高(P<0.05)。结论燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢具有毒性作用,其机制可能与加速各级卵泡退化、闭锁、导致卵泡颗粒细胞水肿、卵泡细胞受损,进而影响雌二醇合成和分泌有关。

复合营养素和蛋白质协同拮抗氟中毒对雌性大鼠卵巢损伤的动态观察

目的动态观察多种营养素和蛋白质协同拮抗氟中毒对大鼠卵巢损伤的效果。方法将120只断乳2周清洁级SD雌性大鼠按体重随机分为4组,分别为对照组、氟中毒组、营养素干预组、营养素+强化蛋白干预组,每组30只。对照组大鼠食用非病区玉米加工饲料(含氟5.2 mg/kg,蛋白含量为18%);氟中毒组大鼠食用病区高氟泥煤烘烤玉米加工饲料(含氟96 mg/kg,蛋白含量为18%);营养素干预组大鼠饲料是在氟中毒组饲料基础上加入多维营养素添加片(含氟96 mg/kg,添加片剂量为2.08 g/kg,蛋白含量为18%);营养素+强化蛋白干预组大鼠饲料在营养素干预组饲料的基础上加入大豆蛋白粉(含氟96 mg/kg,添加片剂量为2.08 g/kg,蛋白含量为30%)。采用自由摄食的方法进行染毒。分别于第60、120、180天,检测处于动情期大鼠血清中睾酮(T)、雌二醇、孕酮(P)、抑制素(Inh)的含量。结果氟中毒组大鼠血清P、雌二醇、Inh水平降低,而T水平升高。两干预组血清P、雌二醇、Inh、T的紊乱程度明显减轻,且随着时间的延长逐渐恢复正常水平。第180天时两干预组血清P、雌二醇水平已经恢复到正常水平;而血清T、Inh水平介于染氟和对照组之间,且更接近对照组。结论多种营养素对氟中毒所致大鼠血清卵巢相关激素的分泌紊乱具有拮抗作用,加入蛋白质后对损伤的拮抗作用有所增强。

燃煤污染型氟中毒对雌鼠下丘脑-垂体-卵巢轴系统内分泌的影响

目的观察燃煤污染型氟中毒对雌鼠下丘脑-垂体-卵巢性腺轴系统内分泌的影响，并探索其可能机制。方法选用60只SD雌鼠，采用随机数字表法，按体质量分为2组：对照组、染氟组，每组30只。对照组食用非病区玉米饲料，染氟组自由食用贵州省织金县燃煤污染型氟中毒病区原煤烘烤的玉米饲料，以复制氟中毒动物模型。观察各组雌鼠染氟期间牙齿变化情况。喂养180d后，于动情期收集24h尿液，采用氟离子选择电极法测定尿氟含量；动情期处死雌鼠，取右侧长骨采用高温灰化．氟离子选择电极法测定骨氟含量。采用股动脉取血法收集雌鼠血液，分离血清，电化学发光放射免疫法检测血清中卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）、雌二醇（E2）、孕酮（P），酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清中促性腺释放激素（GnRH）、抑制素（INH）含量。分离下丘脑、垂体、卵巢并称重，计算下丘脑、垂体、卵巢的脏器系数；制备组织切片，光镜下观察下丘脑、垂体、卵巢组织形态；电镜观察卵巢组织亚微结构。结果成功复制实验动物模型。染氟组雌鼠下丘脑、垂体、卵巢脏器系数（0．032±0．004、0．014±0．008、0．037±0．009）与对照组（0．035±0．005、0．012±0．006、0．035±0．004）比较，差异均无统计学意义（f=0．46、0．87、0．64，P均〉0．05）。染氟组雌鼠血清GnRH、FSH、LH、T含量[（21．654±4．765）、（29．580±5．221）、（53．988±6．506）、（23．962±2．255）μg／L均高于对照组[（10．384±2．250）、（19．217±4．743）、（30．314±4．443）、（7．883±1．973）μg／L，t=6．762、4．646、9．503、16．971，P均〈0．05]；而P、INH含量[（12．635±3．841）、（18．926±3．465）μg／L]均低于对照组[（21．045±4．768）、（48．076±3．525）μg／L，t=4．344、18．649，P均〈0．05]；对照组和染氟组的血清E2含量分别为（35．375±10．662）、（27．500±12．783）μg/L，组间比较差异无统计学意义（t=1．821，P〉0．05）。2组雌鼠下丘脑、垂体组织光镜、电镜观察结果均无病理改变。光镜下，对照组雌鼠卵巢组织结构形态正常，均可见多个黄体及不同发育阶段的卵泡，颗粒细胞呈单层或多层整齐排列；染氟组雌鼠卵巢间质细胞、颗粒细胞呈高度水肿，卵泡退化增多，成熟卵泡偶见，细胞结构和细胞轮廓变得模糊不清。电镜下，对照组卵巢颗粒细胞超微结构正常，细胞核呈圆形，核内染色质均匀分布，胞质内含有丰富的线粒体及内质网，且形态正常；染氟组卵巢颗粒细胞及间质细胞出现凋亡特征，如核仁消失、线粒体肿胀、染色质在核膜聚集。结论氟可促使卵巢组织凋亡，破坏微环境，致使卵巢分泌的P、INH减少，下丘脑GnRH和垂体FSH、LH增高，使性腺轴系统分泌异常；氟影响雌鼠性腺轴的部位可能不是下丘脑、垂体，而是卵巢。

多种营养元素和强化大豆对氟中毒雌鼠性腺轴内分泌功能的作用

目的了解钙、镁、铜、锌、维生素D、蛋白质等多种营养元素对氟中毒雌鼠性腺轴内分泌功能的作用。方法2012年10月采集贵州省织金病区原煤烘烤的玉米喂养SD雌鼠，复制燃煤型氟中毒动物模型。采用随机数字表法将雌鼠分为4组：对照组（食用含氟5．2mg／kg，蛋白含量18％的饲料）、染氟组（食用含氟96mg／kg，蛋白含量18％的饲料）、多维元素干预组（食用含氟96mg／kg，多维元素添加片2．08g／kg．蛋白含量18％的饲料）、多维元素加强化大豆干预组（食用含氟96mg／kg，多维元素添加片2．08异／k，蛋白含量30％的饲料）。于180d动情期麻醉后处死雌鼠，股动脉取血分离血清，检测促性腺释放激素（GnRH）、促卵泡凝集（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）、雌二醇（E2）、黄体酮（P）、抑制素（INH）含量；光镜下观察下丘脑、垂体、卵巢组织形态，透射电镜下观察卵巢颗粒细胞超微结构。结果光镜观察显示，各组雌鼠下丘脑、垂体均未出现明显组织损伤；染氟组雌鼠卵巢组织颗粒细胞出现中、重度水肿，细胞结构和细胞轮廓变得模糊，闭锁的卵泡和黄体退化增多，成熟卵泡偶见；两干预组组织结构基本正常，仅见轻度水肿。电镜观察发现，雌鼠染氟组卵巢组织超微结构出现颗粒细胞凋亡；两干预组雌鼠卵泡颗粒细胞超微结构均基本正常，可见胞质内多少不等的脂滴，未见凋亡样改变，其中多维元素加强化大豆干预组脂滴明显少于多维元素干预组。雌鼠血清GnRH、FSH、LH、T、E，、P、INH含量组间比较差异均有统计学意义（F=18．87、13．84、55．29、215．87、7．35、12．55、117．15，P均〈0．05）。其中染氟组血清GnRH、FSH、LH、T水平[（21．65±3．94）、（29．88±7．71）、（53．89±6．97）、（25．06±2．39）mg／L。曲高于对照组[（10．58±2．65）、（19．92±6．12）、（30．21±4．45）、（4．88±1．77）mg／L，P均〈0．05]；染氟组血清E2、P、INH水平[（40．72±7．65）、（22．15±4．32）、（48．08±3．53）mg／L]均低于对照组[（28．26±8．02）、（14．14±2．27）、（18．93±3．47）mg／L，P均〈0．05]。多维元素干预组[（15．69±3．02）、（31．70±2．35）、（35．65±9．73）、（23．32±4．13）mg／L]、多维元素加强化大豆干预组[（17．79±2．86）、（26．23±5．88）、（38．25±9．60）、（22．18士4．41）mg／L]血清FSH、LH、E2、P水平与染氟组[（29．88±7．71）、（53．89±6．97）、（28．26±8．02）、（14．14±2．27）mg／L]比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论钙、镁、铜、锌、维生素D等多种营养元素对氟中毒所致雌鼠性腺轴内分泌损伤有明显的保护作用。且加入强化大豆后对这种保护作用有一定的增强。

多种营养素干预对燃煤型氟中毒雌性大鼠卵巢颗粒细胞的影响

为动态观察多种营养素对燃煤型氟中毒雌性大鼠卵巢颗粒细胞的干预作用,将清洁级雌性SD大鼠120只随机分为对照组、染氟组、多种营养素干预组、多种营养素加蛋白质干预组,每组30只,对照组用非病区玉米饲料喂养(含氟量为5.2 mg/kg),各实验组均用织金病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料喂养(含氟量为96 mg/kg),多种营养素干预组添加多维营养素,多种营养素加蛋白质干预组同时添加大豆蛋白。每组分别于实验60、120、180 d处死10只大鼠,检测尿氟、骨氟水平,采用电子显微镜观察卵巢颗粒细胞超微结构,以末端转移酶标记技术测定卵巢颗粒细胞凋亡率。结果显示,两个干预组尿氟含量高于同期对照组及染氟组,染氟组骨氟含量高于同期对照组及干预组,差异均有统计学意义(P<0.05);电镜观察发现,染氟组卵巢颗粒细胞超微结构损伤严重,且随着时间的延长逐渐呈细胞凋亡特征,干预组卵巢颗粒细胞超微结构随着时间的延长而逐渐趋于正常。染氟组卵巢颗粒细胞凋亡率高于同期对照组和干预组,且多种营养素干预组高于多种营养素加蛋白干预组,差异均有统计学意义(P<0.05)。提示对大鼠添加适量维生素可减轻氟中毒引起的卵巢颗粒细胞超微结构损伤,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,且与蛋白质联合干预效果更佳。