巴伐奇宁调节Akt/MDM2/p53信号通路影响肝癌细胞增殖、凋亡和细胞周期

目的:探讨巴伐奇宁调节Akt/MDM2/p53信号通路影响肝癌细胞增殖、凋亡和细胞周期。方法:CCK-8检测巴伐奇宁对正常肝细胞和肝癌细胞的抑制作用;体外培养肝癌HepG2细胞,将HepG2细胞分为Control组,巴伐奇宁低剂量组(10μmol/L)、巴伐奇宁高剂量组(20μmol/L)、巴伐奇宁高剂量(20μmol/L)+SC79(8μg/mL)组;MTT和Edu实验检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;Western blot检测Bcl-2、Bax、p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2、p-p53/p53蛋白表达;建立肝癌肿瘤裸鼠模型,观察肿瘤生长情况,检测肿瘤组织中Bcl-2、Bax、p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2、p-p53/p53蛋白表达。结果:巴伐奇宁对几种肝癌细胞均具有抑制作用,不影响正常肝细胞增殖;体外实验表明,与control组相比,巴伐奇宁低、高剂量组HepG2细胞OD_(490)(24 h、48 h)值、细胞增殖率、S期和G_(2)/M期细胞比例、Bcl-2、p-Akt/Akt和p-MDM2/MDM2蛋白显著降低,凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞比例、p-p53/p53和Bax蛋白显著升高(P<0.05);与巴伐奇宁高剂量组相比,巴伐奇宁高剂量+SC79组HepG2细胞OD_(490)(24 h、48 h)值和细胞增殖率、S期和G_(2)/M期细胞比例、Bcl-2、p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2蛋白表达显著升高,凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞比例、p-p53/p53、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05);裸鼠移植瘤实验结果表明,与对照组相比,巴伐奇宁组和Hu7691组裸鼠肿瘤质量和肿瘤体积、Bcl-2、p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2蛋白表达显著降低,裸鼠肿瘤组织中p-p53/p53、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05);与巴伐奇宁组相比,Hu7691组裸鼠各检测指标均无统计学差异(P>0.05)。结论:巴伐奇宁可能通过调节Akt/MDM2/p53信号通路来抑制肝癌细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡。

HBx在乙肝相关型肝细胞癌中的作用机制

原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是世界范围内发病率及病死率最高的消化道恶性肿瘤之一[1],其病情进展迅速,治疗困难,预后很差,已成为公认的世界难题。在我国,1.2亿以上人口乙型肝炎表面抗原呈阳性,慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染成为原发性肝癌最主要的原因[2]。

HBx在乙肝相关性肝细胞癌中表达的意义及其对预后的影响

目的探讨HBx蛋白在乙肝相关性肝细胞癌及癌旁组织中的表达，与相关临床因素间的关系。方法通过Elivision二步法，检测40例根治性切除肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）和癌旁组织中HBx表达，分析其与眭别、年龄、TNM分期、HBV—DNA负荷、AFP、肝硬化、脉管侵犯、肿瘤淋巴细胞浸润（tumor lymphocyte infiltration, TIL）、Edmondson—Steiner病理分级及无瘤生存时间（tumor free survival time，DFS）的关系。结果（1）肝癌组织和癌旁组织HBx表达比较，差异有统计意义（χ^2=10．026，P=0．002）。（2）癌旁中HBx在HBV—DNA〈500IU／ml和≥500IU／ml比较，差异有统计学意义（χ^2=6．536，P=0．011）；与年龄、性别、肝硬化及血清AFP相关不显著。（3）癌组织脉管侵犯和无侵犯的HBx表达比较，差异有统计意义（χ^2=5．079，P=0．037）；与TNM分期、Edmondson．Steiner病理分级关系不显著。（4）癌旁组织中有TIL和少TIL的HBx表达比较，差异有统计意义（χ^2=8．711，P=0．003），与DFS无明显相关；在癌组织DFS〈24个月和≥24个月组差异有统计意义（χ^2=6．857，P=0．009），与TIL无明显相关。结论HBx在癌旁组织高表达，癌组织低表达，癌组织中高HBx表达可能预示预后较差，癌旁组织高表达可能预示预后较好。