氟苯尼考在欧洲鳗鲡体内的药物代谢动力学的研究

应用反相高效液相色谱法对口灌和肌肉注射氟苯尼考在欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)体内的代谢规律进行了研究。按100mg.kg-1口灌给药后血浆、肌肉、肝脏、肾脏中氟苯尼考浓度的达峰时间分别为2h、6h、0.5h、1h,以后开始缓慢下降,给药2d后血浆、肌肉、肝脏、肾脏中的氟苯尼考浓度分别为4.209μg.mL-1、0.792μg.g-1、0.493μg.g-1、1.448μg.g-1,给药3d后血浆中的氟苯尼考浓度分别为0.0836μg.mL-1,肌肉、肝脏、肾脏中的氟苯尼考浓度均未检出;按100mg.kg-1肌肉注射给药后血浆中氟苯尼考浓度达峰时间为0.5h,以后开始缓慢下降,给药5d后血浆中的氟苯尼考浓度为0.1151μg.mL-1,给药10d后血浆中的氟苯尼考浓度未检出。口灌氟苯尼考在欧洲鳗鲡体内血浆、肌肉、肝脏、肾脏中分布可用开放性二室模型来描述,口灌给药的血浆、肌肉、肝脏、肾脏中的消除半衰期(T1/2β)分别为27.939h、18.844h、11.83h、36.87h;肌肉注射氟苯尼考在欧洲鳗鲡体内血浆、肌肉、肝脏、肾脏中分布可用开放性一室模型来描述,肌肉注射给药的血浆中的消除半衰期(T1/2β)为37.52h。

吡喹酮对鳗鲡及几种淡水鱼类的急性毒性试验

通过吡喹酮对鳗鲡及其它淡水鱼类的急性毒性试验 ,结果显示 :吡喹酮对欧洲鳗鲡 2 4hLC50 为5 3 7mg/L ,4 8hLC50 为 4 1 8mg/L ,72hLC50 为 4 0 8mg/L ,96hLC50 为 39 6mg/L ,SC为 7 6mg/L ;对日本鳗鲡 2 4hLC50 为 5 3 7mg/L ,4 8hLC50 为 4 1 8mg/L ,72hLC50 为 4 0 8mg/L ,96hLC50 为 39 6mg/L ,SC为 7 6mg/L ;对鲫鱼 2 4hLC50 为 5 9 2mg/L ,4 8hLC50 为 5 4 3mg/L ,72hLC50 为 5 2 7mg/L ,96hLC50 为 4 8 5mg/L ,SC为 1 3 71mg/L ;对团头鲂 2 4hLC50 为 2 9 1mg/L ,4 8hLC50 为 1 5 1mg/L ,72hLC50 为 1 2 2mg/L ,96hLC50为 7 6 2mg/L ,SC为 1 2 2mg/L ;对草鱼 2 4hLC50 为 5 2 1mg/L ;4 8hLC50 为 5 1 4mg/L ;72hLC50 为 4 5 4mg/L ;96hLC50 为 38 1mg/L ;SC为 1 5 0lmg/L ;对斑点叉尾 鱼回 2 4hLC50 为 4 3 8mg/L ;4 8hLC50 为 36 7mg/L ;72hLC50 为 34 3mg/L ;96hLC50 为 30 2mg/L ;SC为 7 75mg/L。

高效液相色谱法检测底泥中孔雀石绿及其代谢物

以乙腈、二氯甲烷、对甲苯磺酸和Meilvain缓冲液等提取底泥中孔雀石绿和隐色孔雀石绿，以乙腈-甲醇-乙酸钠缓冲液为流动相，用DAD检测器在618n／n处进行检测，建立了底泥中孔雀石绿及其代谢物的HPLC检测方法。孔雀石绿的回收率为75．2％～79．1％，隐色孔雀石绿的回收率为81．1％～84．2％，检测限均为5μg／kg。

降解水体中孔雀石绿的药物的初步研究

用高效液相色谱法检测孔雀石绿和隐色孔雀石绿,研究了按0.4mg/L孔雀石绿浓度下药后,在自然条件下和药物作用下水体与底泥中孔雀石绿的降解情况。在自然条件下,水中孔雀石绿经5d的降解后未检出,而底泥中要经120d的降解后未检出,说明阳光照射有助于水中孔雀石绿的降解。药物I(腐植酸、VitC晶体和654-2的混合物)在下药后0.5～2h内有加快水中孔雀石绿降解的显著效果,药物II(腐植酸)有助于延长药物I作用的有效时间。在泥中孔雀石绿降解不受试验药物的影响,经过60d的降解后,孔雀石绿的浓度为(0.009±0.005)mg/L,经过120d的降解后才未检出;泥中到20d后才检测到隐色孔雀石绿,在20～120d其质量分数基本稳定在1.0×10-9。

药浴给药恩诺沙星及其代谢产物在欧洲鳗鲡体内的药代动力学研究

应用反相高效液相色谱法,研究药浴给药条件下,恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星在欧洲鳗鲡体内的药代动力学。按10mg.L-1药浴给药后,恩诺沙星在欧洲鳗体内各组织器官中分布可用开放性二室模型来描述。血浆、肌肉、肝脏和肾脏中恩诺沙星达峰时间分别为44.27h、42.74h、50.69h、95.80h,以后开始缓慢下降,血浆、肌肉、肝脏和肾脏中代谢产物环丙沙星达峰时间分别为48.89h、55.34h、54.64h、100.0h。给药3个月后血浆、肌肉、肝脏和肾脏中的恩诺沙星浓度分别为0.0844μg.mL-1、0.09959μg.g-1、0.01242μg.g-1、3.7164u.g-1;恩诺沙星在血浆、肌肉、肝脏和肾脏中的消除半衰期(T1/2β)分别为908.07h、901.24h、59.32h、767.81h。鉴于恩诺沙星和其代谢产物环丙沙星在欧洲鳗鲡体内消除较慢,建议养成阶段不使用此药。

8种常用渔药对半刺厚唇鱼幼鱼的急性毒性

在19.5~21.8℃的水温条件下,采用静水试验法研究8种常用渔药对半刺厚唇鱼幼鱼的急性毒性。试验结果表明:8种渔药对半刺厚唇鱼幼鱼的安全剂量按从高到低的顺序依次为:霉菌净(4.437 1mg·L^(-1))、高锰酸钾(2.191 9mg·L^(-1))、虫菌特杀(0.945 5mg·L^(-1))、溴氯海因(0.657 3mg·L^(-1))、漂白粉(0.452 6mg·L^(-1))、敌百虫(0.303 2mg·L^(-1))、鱼虫敌(0.116 2mg·L^(-1))和硫酸铜(0.039 1mg·L^(-1))。溴氯海因、霉菌净、鱼虫敌和虫菌特杀等4种常用渔药的生产实际常用剂量均低于安全剂量,在养殖生产过程中可安全使用;高锰酸钾、敌百虫和漂白粉的生产实际常用剂量接近或高于安全剂量,在生产中应注意使用剂量和方法;而硫酸铜的安全剂量显著低于生产常用剂量,应慎用或避免使用。

养殖鳗鲡肠道益生菌的筛选

从正常养殖的鳗鲡肠道中分离得到477株细菌,通过对常见病原菌的拮抗试验和产酶能力测试筛选出47株细菌。通过对鳗鲡饲料培养基的利用能力从中筛选出19株细菌,鉴定分类后选择7株可能的益生菌进行鱼粉分解试验,筛选得到2株细菌,即A40209CDC4和A31009NA。最后测定这2株细菌对欧洲鳗鲡的毒力和对鳗鲡饲料的表观消化率。结果显示,在急性毒性试验中,试验剂量的细菌对欧洲鳗鲡无毒力,且能有效地提高对饲料的利用率,表明筛选出的2株肠道益生菌A40209CDC4和A31009NA具有良好的开发和应用前景。

养殖的日本鳗鲡肠道中细菌的数量和组成

用稀释滴种的定量方法,分别于甘露醇卵黄多黏菌素、马铃薯葡萄糖、伊红美 蓝、链球菌琼脂、CDC厌氧琼脂和营养琼脂中分离计数不同饵料投喂阶段在饱食和 空腹状态下养殖的日本鳗鲡肠道中细菌的数量和组成．结果表明:在空腹状态下,其 细菌数量约为103-107个／g;在饱食状态下约为104-108个／g．在空腹状态下其肠 道菌群组成以厌氧菌为主,其次为大肠菌群,再者为芽孢杆菌,未分离到肠球菌．在饱 食状态下其肠道菌群以厌氧菌为主,红虫投喂期其次为大肠菌群,而肠球菌占第三 位;白仔料投喂期大肠杆菌、肠球菌和芽孢杆菌的数量相当;黑仔、幼鳗、成鳗期芽孢 杆菌数量占第二,大肠杆菌数量占第三．在饱食和空腹状态下,其肠道菌群数量以红 虫投喂期的为最高,随着养殖时间的延长,肠道菌群数量下降．

吡喹酮和克螨特对寄生欧洲鳗鲡的拟指环虫的效果

试验结果表明,吡喹酮和克螨特是寄生在欧洲鳗鲡上的拟指环虫的有效驱除药物。新洁尔灭作为吡喹酮和克螨特复配的助溶剂,对配方的除虫效果无显著影响。驱除拟指环虫的最佳配方为吡喹酮∶克螨特∶新洁尔灭=2∶1∶1,以酒精溶解的溶液制剂能有效驱除欧洲鳗鲡寄生的拟指环虫。

噁喹酸在欧洲鳗鲡体内的药代动力学及残留研究

在(25±1)℃水温条件下,分别采用口灌和浸浴的给药方式,以20 mg/kg的单剂量混饲口灌及5 mg/L的剂量浸浴18 h给予噁喹酸后,用高效液相色谱法测定血浆和肌肉中的药物浓度,研究了不同给药方式下噁喹酸在欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)体内的药代动力学特征。结果表明:欧洲鳗鲡口灌给药后,其血浆和肌肉中噁喹酸经时过程均符合一级吸收一室开放模型,其理论方程分别为:C血浆=8.0560(e-0.00181t-e-0.00250t),C肌肉=2.9347(e-0.00176t-e-0.00217t);浸浴给药方式下,其血浆和肌肉中噁喹酸经时过程均符合一级吸收二室开放模型,其理论方程分别为:C血浆=1.8100e-0.0042t+0.5548 e-0.00143t-2.70e-0.3007t,C肌肉=1.2779e-0.0082t+0.0394 e-0.000721t-6.35 e-0.1202t,以50μg/kg为最高残留限量计算,在本实验条件下,以口灌给药方式,建议噁喹酸在欧洲鳗鲡体内的休药期不低于114 d;以浸浴给药方式,建议其休药期不低于71 d。

复方甲苯咪唑对拟指环虫的杀灭效果和对欧洲鳗的毒性

26℃ ,2 8℃ ,30℃水温下复方甲苯咪唑对欧洲鳗的毒性试验表明 ,随水温升高、药浴时间延长、药物浓度提高 ,甲苯咪唑对欧洲鳗的毒性加强 ;复方甲苯咪唑、甲苯咪唑、左旋咪唑对拟指环虫的杀灭率表明 ,甲苯咪唑对拟指环虫具强杀灭能力 ,左旋咪唑对拟指环虫无杀灭能力 。

硫酸新霉素在奥尼罗非鱼体内的药代动力学及残留研究

在试验水温为(25±2)℃时,以150 mg.kg-1的剂量给奥尼罗非鱼单次口灌硫酸新霉素,采用高效液相色谱法测定血浆和肌肉组织中的药物浓度,研究了硫酸新霉素在奥尼罗非鱼体内代谢及消除的规律.结果表明:血药时间数据符合一级吸收二室开放模型,半衰期(T1/2Ka、T1/2α、T1/2β)分别为1.05、2.05、11.94 h,最大血药浓度为7.013μg.mL-1,达峰时间为2.856 h,药时曲线下面积(AUC)为101.22μg.h.mL-1.选取肌肉组织作为残留检测的靶组织,以欧盟残留限量500μg.kg-1为最高残留限量,在本试验条件下,建议休药期不低于7 d.

欧洲鳗病原菌控菌药物的研究

应用药敏纸片法测定 2 4种抗菌药物对欧洲鳗致病菌 :非 0 1群霍乱弧菌、温和气单胞菌、鲁氏不动杆菌、迟钝爱德华氏菌和嗜水气单胞菌的敏感性。其中 ,诺氟沙星、四环素、头孢三嗪、庆大霉素、头孢噻肟抑菌能力较强。最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度 (MBC)测定结果表明 ,头孢三嗪对病原菌杀灭能力强 ,复方新诺明、硫酸庆大霉素对病原菌抑制及杀灭能力差 ,联合药敏试验结果表明敏感药物联合后对病原菌的杀灭能力加强。

欧洲鳗鲡血浆和肌肉中甲苯咪唑及其代谢物的高效液相色谱测定法的建立

应用高效液相色谱法建立欧洲鳗鲡血浆和肌肉中甲苯咪唑(MBZ)及其代谢物5-羟甲基苯基苯并咪唑(MBZ-OH)和二氨基-5-苯基苯并咪唑(MBZ-NH2)浓度的检测方法.结果表明:选用C18色谱柱,检测波长为248 nm,样品经Na2CO3溶液和乙酸乙酯提取,以乙腈和醋酸—醋酸钠缓冲液(pH 4.5)为流动相,在0.01-1.00μg.mL-1内,MBZ及其代谢物的线性关系良好,标准品添加平均回收率均大于90%,日内、日间变异系数均低于6.70%,最低检测限为3 ng.mL-1.

养殖欧洲鳗鲡肠道菌群组成的研究

用稀释滴种定量方法,分别于甘露醇卵黄多黏菌素、马铃薯葡萄糖、伊红美蓝、链球菌琼脂、CDC厌氧琼脂和营养琼脂,分离并计数不同饵料投喂阶段饱食和空腹状态下养殖欧洲鳗鲡肠道细菌的数量与组成。结果表明:在空腹状态下肠道菌群组成以大肠菌群为主,未开口期和水蚯蚓(Tubificidae)投喂期厌氧菌第二,其次为芽孢杆菌;投喂人工配合饲料后芽孢杆菌第二;投喂人工配合饲料后出现肠球菌。饱食状态下以厌氧菌为主,其次为大肠菌群,水蚯蚓投喂期间肠球菌占第三位,其余时间芽孢杆菌占第三位。饱食和空腹状态下,肠道菌群数量以水蚯蚓(Tubificidae)投喂期最高,随养殖时间的延长,肠道菌群数量下降。

加快鳗鲡体内残留孔雀石绿降解速度药物的初步研究

本试验选择已具孔雀石绿残留的鳗鱼进行研究。降解药物按试验设定的剂量拌饵投喂,用高效液相色谱法测定样品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量。结果表明:复配药物能起到加快鳗鲡体内孔雀石绿降解速度的作用;降解药物I和降解药物II均能加快鳗鲡体内隐色孔雀石绿的消除速率,而且效果相近;起主要降解作用的药物是腐植酸,维生素C和654-2只起辅助作用或不起作用。

吡喹酮和克螨特对欧洲鳗鲡血液指标的影响

以复配试剂及组成成分吡喹酮和克螨特浸浴欧洲鳗鲡(Anguillaanguilla),分别测定浸浴12、36、45h及换水后12、36、67h鳗鲡血液中红细胞数、白细胞数、血小板数等血常规指标及丙氨酸氨基转移酶、肌酐、胆碱脂酶、天门冬氨酸氨基转移酶、血清血尿素氮生化指标。测试结果表明:同一取样时间,不同药物处理组及对照组相互间绝大部分指标差异不显著。在有效驱虫浓度范围内,复配试剂对欧洲鳗鲡内脏器官及生理机能未产生严重损害,对鳗鲡是安全的。

水蚯蚓的消毒试验

采用食盐水刺激吐脏、消毒剂杀菌、抗菌抑菌药物抑菌效果的研究 ,探讨水蚯蚓的处理方法 .盐度 4.2～ 7.5的食盐水处理 40～ 6 0min刺激吐脏效果较佳 ;消毒剂杀菌效果显著 ,二氧化氯最佳 ,其次为高锰酸钾 ,再者为含氯消毒剂 ;抗菌抑菌药物均具良好的抑菌效果 ,但不同药品的抑菌效果存在着较大差异 .

蛙类脑膜脓毒性伊丽莎白菌多克隆抗体的制备及应用

【目的】制备蛙类脑膜脓毒性伊丽莎白菌多克隆抗体,建立间接ELISA检测方法,进行病原菌在宿主体内的示踪研究,为病原菌的致病机理研究奠定基础。【方法】将分离自患歪头病的棘胸蛙的脑膜脓毒性伊丽莎白菌(Elizabethkingia meningosepticum)RsB1151018NA甲醛灭活后,免疫新西兰大白兔制备兔抗血清。通过优化反应条件,建立脑膜脓毒性伊丽莎白菌间接ELISA的检测方法;兔抗血清多克隆抗体采用Protein A亲和层析柱分离纯化,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记,标记后的抗体与感染RsB1151018NA的棘胸蛙不同脏器组织的冷冻切片反应,荧光显微镜观察,跟踪RsB1151018NA在棘胸蛙体内的迁移。【结果】试验结果表明,制备的兔抗棘胸蛙脑膜脓毒性伊丽莎白菌多克隆抗体血清效价为1∶5.12×10^(5),纯化后的抗体效价为1∶1.6×10^(4),且建立的间接ELISA方法检测脑膜脓毒性伊丽莎白菌具有高度特异性,与其他水产常见病原菌没有交叉反应,检测灵敏度为1.0×10^(4) CFU·mL^(-1)。脑膜脓毒性伊丽莎白菌在棘胸蛙体内随血液循环而分布至全身,可侵袭肌肉、肝脏、肾脏、脾脏、肠道、心脏、眼和脑等组织器官,肾脏、眼和脑感染程度最严重,推测这三个组织器官是其靶器官;创伤感染是可能的感染途径之一。【结论】建立的检测方法能够快速、灵敏、特异地检测脑膜脓毒性伊丽莎白菌,对蛙类歪头病的防控和早期诊断可提供理论参考依据;另外利用免疫荧光检测病原菌在宿主体内的迁移,研究病原的致病机理及发病过程等,能为防治药物的研发和防治方法的确定提供理论依据。