转录辅助激活因子p300通过调控TGF-β/Smad3信号通路参与高静水压诱导的心房纤维化

目的探讨转录辅助激活因子p300在高静水压诱导心房纤维化中的作用及可能机制。方法收集窦性心律、房颤、高血压合并房颤3组人左心耳组织,Western blot检测p300及TGF-β/Smad3信号通路蛋白及纤维化因子Ⅰ型/Ⅲ型胶原蛋白α1链(Col-1A1/Col-3A1)、基质金属蛋白酶2/9(MMP-2/9)的表达。以0、20和40 mmHg的静水压培养小鼠心耳成纤维细胞;对40 mmHg压力培养的细胞分别予姜黄素及敲低p300处理,Western blot检测p300及上述纤维化指标表达的变化;CCK-8法检测细胞增殖能力变化。结果房颤组、高血压合并房颤组患者组织和40 mmHg高静水压培养的细胞p300和TGF-β/Smad3信号通路蛋白及纤维化指标表达明显增加(P<0.05),细胞增殖能力增强(P<0.05);而给予姜黄素或敲低p300处理后,可逆转压力诱导的纤维化指标表达增加(P<0.05)同时降低细胞的增殖(P<0.05)。结论转录辅助激活因子p300通过调控TGF-β/Smad3信号通路参与高静水压诱导的心房纤维化。

转录辅激活因子p300参与血管紧张素Ⅱ诱导的心房肌细胞I_(kur)离子通道重构的调控

目的探讨转录辅激活因子p300是否参与调控心房肌细胞Kv1.5蛋白的表达。方法以Western Blot检测细胞和C57BL/6小鼠心房组织p300蛋白、钾离子通道蛋白Kv1.5的表达。HL-1细胞在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激的基础上使用p300抑制剂姜黄素或p300 siRNA干预,观察p300对Kv1.5蛋白表达以及超速延迟整流钾电流(I_(kur))的作用。全细胞膜片钳技术检测各组细胞的I_(kur)和动作电位时程(APD)。快速起搏心房观察小鼠心房颤动(房颤)的可诱发性。结果动物实验显示,与对照组相比,AngⅡ处理组小鼠有着明显更高的房颤诱发率(P<0.01),心耳组织p300以及Kv1.5蛋白表达明显升高(均P<0.05),而姜黄素干预后可以明显减少小鼠的房颤诱发率(P<0.01),并使p300和Kv1.5蛋白表达减少(P<0.05)。细胞实验显示,和对照组相比,AngⅡ处理组HL-1细胞p300以及Kv1.5蛋白表达明显升高(P<0.05),I_(kur)电流密度上升,APD缩短。在分别用p300抑制剂姜黄素和p300 siRNA干预后表现为p300和Kv1.5蛋白表达减少(P<0.05),I_(kur)电流密度下降,APD延长。结论AngⅡ可通过p300引起心房肌细胞Kv1.5蛋白表达上升,I_(kur)电流密度上升,引起心房肌细胞电重构。