利卡汀治疗原发性肝癌72例近期疗效观察

目的探讨利卡汀和利卡汀联合碘油及化疗药物治疗原发性肝癌(PHC)的近期临床疗效。方法已确诊的PHC患者72例,采用肝动脉灌注介入术(TACE),其中单纯利卡汀介入治疗50例,利卡汀+碘油+吡柔比星+丝裂霉素介入治疗22例,检测治疗前和治疗后1个月AFP值、肿瘤大小、肝肾功能、外周血白细胞、红细胞、血小板的变化。结果单纯利卡汀组治疗1个月后,肿瘤瘤体明显缩小、AFP有所下降但无统计学意义;外周血白细胞、红细胞、血小板、肝肾功无明显变化。利卡汀+碘油+化疗药治疗1个月后肿瘤瘤体和AFP明显下降,外周血白细胞、红细胞、血小板、肝肾功无明显变化。结论两组介入治疗PHC,均能使瘤体缩小、AFP下降,以利卡汀+碘油+化疗药效果更好,治疗前后外周血白细胞、红细胞、血小板、肝肾功无明显变化,表明利卡汀和(或)利卡汀联合碘油及化疗药介入治疗中晚期原发性肝癌近期疗效显著、安全。

病毒性肝炎患者检测血清肝脏特异性膜脂蛋白(LSP)的意义

本文检测94例各型病毒性肝炎患者血清肝脏特异性膜脂蛋白(LSP)的阳性率及水平,二者的高低顺序均为 AH>CAH>CPH。急性肝炎中 LSP 阳性组的 SGPT 水平显著高于LSP 阴性组。随访3例急性肝炎的血清 LSP 均在发病3周内转阴。检测抗-LSP 和 LSP 同时阳性频率为:CAH(72.72%)>AH(58.33%)>CPH(11.76%)提示二者均可作为肝损害指标、病情预测及判断预后的指标。

新西兰兔血细胞、肾功能和超声检测参数

在研究流行性出血热病肾脏病理变化时，采用彩色多普勒超声诊断仪等先进仪器测试了３６只新西兰兔的血细胞、肾功能和部分脏器的５７项指标的参考值。为肾病的实验研究提供了一批数据。

人源性抗HBsAg噬菌体抗体的筛选及纯化

目的:获得人源性抗HBsAg抗体Fab片段。方法:用预包被HBsAg的ELISA板,从构建的人全套抗体库中筛选出针对HBsAg的噬菌体抗体。并转入大肠杆菌中表达。破裂细胞后,获得可溶性Fab片段。以羊抗人Fab抗体偶联HiTrap柱。

晚期原发性肝癌患者血清PCR-HBV DNA的意义

HBV感染作为我国原发性肝癌(PHC)最常见的主要病因已被肯定。随着研究方法的不断发展,对HBV本质及其与PHC关系的认识日益深入。我们应用聚合酶链反应检测37例晚期PHC患者血清HBV DNA,结果报告如下。 对象与方法 一、病例选自西京医院传染病科、空军广州医院肿瘤科及中山医科大学肿瘤医院的住院患者,经AFP、B超、CT和肝脏核素扫描检查并结合临床诊断为肝细胞癌的病例计37例(8例经手术病理确诊)。诊断符合上海会议标准(全国肝癌防治协作会议,上海,1977),全部均系Ⅲ期患者。男34例,

大剂量胸腺肽对乙型病毒性肝炎的治疗作用

本研究选择慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）１１０例，分大剂量胸腺肽、干扰素和一般护肝治疗三组。结果表明，大剂量胸腺肽可以促使ＡＬＴ复常，降低血中ＨＢＶＤＮＡ水平，促使ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ阴转，其疗效与干扰素相似，优于一般护肝组，且使用安全，大剂量胸腺肽疗法可作为阻断或抑制ＨＢＶ复制一种新方法。

肝移植术后呼吸系统并发症的诊断及处理

目的探讨原位肝移植围手术期呼吸系统并发症的处理。方法分析8例原位肝移植术后患者围手术期发生的呼吸系统并发症。结果8例原位肝移植围手术期常见的呼吸系统并发症有呼吸衰竭、胸腔积液、肺不张、肺水肿、肺炎和酸碱失衡。结论呼吸机的应用和呼吸功能的监测是肝移植患者术后ICU期间的重要处理措施,了解肝移植术后呼吸系统并发症的处理对肝移植患者安全渡过ICU期非常重要。

人源性抗HBsAg抗体Fab段在酵母中的表达

通过分步整合的方式 ,将人源性抗乙肝表面抗原 (HBsAg)抗体Fab的轻、重链基因分步整合到巴斯德毕赤(Pichiapastoris)酵母GS115菌株的染色体上 ,经甲醇诱导 ,成功地分泌表达出抗HBsAg抗体的Fab片段 ,表达量达5 0～ 80mg L。ELISA结果显示重组酵母分泌表达出的Fab具有较强的结合HBsAg的能力。通过抗Fab的抗体柱亲和层析 。

一株人源性抗HBsAg抗体Fab片段的筛选及序列分析

一株人源性抗ＨＢｓＡｇ抗体Ｆａｂ片段的筛选及序列分析高辉高磊纪宗玲路凡陈南春陈苏民余宙耀张宜俊尤玉琴粟宽源（第四军医大学生物化学教研室，西安７１００３１空军广州医院全军肝病中心）乙型肝炎是我国常见的传染性疾病，目前尚无特效的治疗手段。研究发...

慢性乙肝患者树突状细胞表型和抗原提呈能力的测定

目的 :探讨慢性HBV感染者DC的表现和功能及其与免疫耐受的关系。方法 :选择正常人和慢性HBV感染者 ,从外周血中分离单个核细胞 ,用细胞贴壁法富集DC ,流式细胞术测定DCHLAⅡ和共刺激分子的表达 ,同位素掺入法测定DC的抗原提呈能力 ,ELISA方法测定抗原提呈过程中Th1和Th2类细胞因子的水平。结果 :慢性HBV感染者HLAⅡ和共刺激分子表达水平、抗原提呈能力和Th1类细胞因子的水平均低于正常 (P <0 .0 5 ) ,而Th2类细胞因子的水平与正常相似 (P >0 .0 5 )。结论 :慢性HBV感染免疫耐受与DC的缺陷有关。

背驮式原位肝移植术后的呼吸支持

目的探讨肝移植患者机械通气的方式.方法7例原位肝移植患者麻醉前留置Swan-Ganz导管和左桡动脉导管,同时获取心输出量(CO)、中心静脉压(CVP)、动脉和静脉血气分析.观察PEEP为0,4,8及12cmH2O时对肝移植患者心输出量、中心静脉压和混合静脉血氧饱和度(SvO2)的影响.比较控制通气(CMV)和PS0V+SIMV对肝移植患者氧耗量的影响.结果3个水平(4,8,12 cmH2O)的PEEP对心输出量无明显改变.8及12cmH2O的PEEP明显增加中心静脉压(P＜0.05～0.01),4 cmH2O的PEEP对中心静脉压无明显影响.12cmH2O的PEE可明显降低混合静脉血氧饱和度(P＜0.05).PSV+SIMV时氧耗量明显高于CMV(P＜0.05).结论低水平的PEEP不影响肝移植患者的CO、CVP和SvO2,肝移植术后患者机械通气时宜用低水平的PEEP.

慢性乙型肝炎患者树突状细胞形态、表型和功能的变化

目的观察慢性乙型肝炎病毒hepatitisBvirusHBV感染者树突状细胞dendriticcellsDC形态、表型和功能的改变。方法从13例慢性乙肝患者和11例健康人外周血中分离和培养DC观察DC的形态。用流式细胞仪检测DC的表面标志HLA-DR、CD1a、CD80和CD86的表达。用3H-TdR掺入法,检测DC诱导混合性淋巴细胞反应mixedleukocytesreactionMLR的能力。结果正常人的DC较慢乙肝患者的DC在形态上更为典型。前者的DC不规则,细胞可表达较多的HLA-DR、CD80和CD86分子P<0.05诱导MLR的能力也较强P<0.05。结论慢乙肝患者外周血DC处于不完全成熟状态,其免疫刺激能力较低。

重组人源抗HBsAg单链抗体的纯化及亲和常数测定

目的 :对融合 6×His标签的人源抗乙型肝炎表面抗原单链抗体的包涵体进行纯化和复性 ,并对复性产物的抗原结合性质进行鉴定。方法 :工程菌表达的包涵体裂解后 ,金属螯合亲合层析纯化 ,然后以尿素透析、盐酸胍透析和金属螯合亲和层析柱原位复性 3种方法进行复性 ;复性产物以免疫亲和层析精制 ,非竞争酶免疫法测定亲和常数结果 :盐酸胍透析复性产物的比活性最高 ,蛋白回收率为 (6 1 0 8± 1 4 5 ) % ;精制后的重组单链抗体的亲和常数为 (2 30± 0 32 )× 10 7L/mol。结论 :本株单链抗体可以应用优化的透析复性技术 ,在体外高效复性 ,其抗原结合性质不受N末端纯化标签的影响。

人源性抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌中的表达及活性测定

目的 :制备有活性的人源性抗HBsAg单链抗体。方法 :应用噬菌体表面呈现技术获得人抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗体的Fab片段 ,并将VH 和VL 基因以 (Gly4Ser) 3linker连接成单链 ,插入表达载体pQE40 ,筛选大肠杆菌高表达菌株。结果 :工程菌表达优化试验表明 ,在OD6 0 0 为 0 6时开始诱导 ,持续 6h ,目的蛋白表达量最高可达菌体总蛋白的 31%。包涵体变性后上样镍离子螯合层析柱一步纯化 ,收集目的峰 ,透析复性 ,得纯度为 97%的重组单链抗体 ,其亲和常数为 0 2 3× 10 8mol L。结论 :抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌内获得高效表达 ,经变性和复性 ,得到有活性的单链抗体 ,氨基酸组成正确。为进行临床前研究打下基础。

HBsAg脉冲的树突状细胞对CIK细胞功能的影响

目的:探讨HBsAg脉冲的树突状细胞(DC),对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的增殖和杀伤作用的影响。方法:选择慢性乙肝患者23例,用常规方法分离外周血单个核细胞(PBMC),经HBsAg脉冲后培养为特异性的DC,用3H-TdR掺入法检测该细胞对CIK细胞增殖的刺激作用,用乳酸脱氢酶释放法检测特异性CIK细胞对HepG2215细胞的特异性杀伤作用。结果:HBsAg脉冲的DC对CIK细胞的增殖具有刺激作用。由HBsAg脉冲的DC所诱导的特异性CIK细胞对HepG2215细胞的特异性杀伤作用增强。结论:HBsAg脉冲的DC可增强CIK细胞的杀伤活性。

重组人抗HBsAg单链抗体工程菌的中试发酵工艺研究

目的研究表达重组人抗HBsAg单链抗体工程菌的中试发酵工艺。方法首先采用摇瓶培养,对培养基配方、pH值、诱导表达时机和诱导剂量进行优化,确定基本发酵参数,然后在30L发酵罐上进行中试规模发酵培养。结果在摇瓶培养时,发现含有甘油和微量元素等成分的改良培养基效果明显优于LB培养基和2×YT培养基,另外,工程茵的最佳pH值为7.0,最佳诱导时机为对数中期,最佳诱导剂浓度为0.4mmoL/L异丙基-1-硫代-β-呋喃半乳糖,最佳诱导时间为4h,将摇瓶培养确定的关键参数应用到30L发酵罐中,控制溶氧大于30%,进行3批发酵试验,发现发酵产物的湿菌产量可达58-61.9g/L,目的蛋白质表达量可达28.9%-31.2%以上。结论建立了工程菌M15[pQE-scFv]的中试发酵工艺,为进一步开发打下良好基础。

人源性抗HBs可变区单链抗体基因的构建及核酸序列测定

将通过噬菌体显示技术获得的一株人源性抗HBsFab抗体基因重链和k轻链的可变区用编码柔性肽段的Linker使其连接成单链 ,克隆入中间载体 ,并进行核酸序列测定 ,为其后的表达及双功能抗体的构建打下基础。

HBsAg冲击致敏的自体DCs诱导的CIK细胞对慢性乙型肝炎的治疗作用

目的:探讨HBsAg冲击致敏的自体DCs及其诱导的HBsAg特异性CIK细胞对慢性乙型肝炎(CHB)的治疗作用.方法:研究对象分为HBsAg特异性CIK细胞治疗组(特异性CIK组,23例),拉米夫定组(LAM组,17例)和干扰素组(IFNα2b组,13例),所有病例均按标准诊断为慢性乙型肝炎(CHB),轻度.常规分离外周血单个核细胞,进一步培养诱导成为HBsAg冲击致敏的DCs及HBsAg特异性CIK细胞,分别经皮下和静脉回输.另选LAM和IFNα2b常规治疗作为对照.观察HBV标记物、肝功能的变化和毒副作用,治疗结束后随访.结果:自体HBsAg冲击致敏的DCs及其诱导的HBsAg特异性CIK(细胞可促进CHB患者HBeAg和HBVDNA阴转,HBeAg/HBeAb的血清转换,肝功能的恢复,疗效高于拉米夫定治疗组(P<0.05),与干扰素治疗组比,无显著差异(P>0.05).结论:HBsAg冲击致敏的DCs及其诱导的HBsAg特异性CIK细胞对CHB有治疗作用,有临床应用前景.

β地中海贫血合并G6PD缺乏症患儿珠蛋白基因突变类型分析

目的 了解 β地中海贫血合并G6PD缺乏症患儿的异常β珠蛋白基因突变情况。方法 采用血液学及反向点杂交技术对患儿进行 β珠蛋白基因突变类型分析。 结果 2 9例患儿共查出 10种不同的基因突变 ,突变频率为 3 4 %～ 37 9% ,其中以CD4 1- 4 2 ( CTTT)、IVS 2nt6 5 4 (C→T)、TATAbox 2 8nt(A→G)出现的频率最高 ,1例患者未能分型。结论 婚前与产前检查对减少β地贫

肝细胞提取物对肝癌细胞(BEL-7402)凋亡相关基因表达的影响

肝细胞提取物经HPLC、FPLC进一步分离纯化，得到单一色谱峰。激光飞行时间质谱仪测分子量为4．020KD。该单一组分（S4）对BEL－74O2肝癌细胞有增殖回落作用，半数抑制浓度（IC50）为7．58mg/L。对BEL-7402细胞的基因表达影响研究，S4对P53、Fas表达有增强作用，而抑制Bcl－2、c－myc的表达。Southemblot技术表明，S4可抑制Bcl－2的mENA转录。提示，S4诱导BEL－7402肝癌细胞凋亡是通过影响基因表达而发挥作用。