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β-伴大豆球蛋白α′-亚基的基因克隆及原核表达
被引量:
3
1
作者
许妍妍
董宇
+5 位作者
王新
彭飞
孙晓静
余少璟
辰巳英三
栾广忠
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期304-310,共7页
为制备N-连接糖基缺失的重组β-伴大豆球蛋白α′-亚基,以‘鲁96150’大豆种子为原料提取总RNA,经RT-PCR一步法获得‘鲁96150’大豆的全长cDNA,采用自行设计的引物F1/F2扩增得到目的基因α′,与pGEM-T easy载体相连构建重组克隆载体pGEM...
为制备N-连接糖基缺失的重组β-伴大豆球蛋白α′-亚基,以‘鲁96150’大豆种子为原料提取总RNA,经RT-PCR一步法获得‘鲁96150’大豆的全长cDNA,采用自行设计的引物F1/F2扩增得到目的基因α′,与pGEM-T easy载体相连构建重组克隆载体pGEM-α′,经XhoⅠ/EcoRⅠ双酶切得到目的基因与载体pET-28a连接构建重组原核表达载体pET-28a-α′,将经菌落PCR、双酶切及测序鉴定正确的表达载体转入感受态细胞E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白α′-亚基。对重组α′-亚基的诱导表达条件进行筛选,发现在菌液OD600值为0.8、诱导温度30℃、IPTG浓度为0.2mmol/L的诱导条件下诱导9h后α′-亚基的表达量较高,重组α′-亚基的分子质量大小约为70ku;工程菌pET-28a-α′-BL21经超声破碎、离心后发现重组α′-亚基部分存在于上清液中,部分形成包涵体蛋白。重组α′-亚基的克隆及表达为β-伴大豆球蛋白结构及功能特性的研究奠定基础。
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关键词
Β-伴大豆球蛋白
亚基
重组蛋白
克隆
基因表达
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职称材料
重组大豆7S球蛋白α′-亚基的分离纯化
被引量:
4
2
作者
余少璟
许妍妍
+3 位作者
袁艳秋
周星杰
吉梦莹
栾广忠
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期1853-1859,共7页
为分离及纯化重组大豆7S球蛋白(β-conglycinin)α′-亚基,将大肠杆菌工程菌pET-28a-α′-BL21经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导培养,得到含有重组7S球蛋白α′-亚基目的蛋白的菌液,再经超声破碎、离心得到粗提的重组蛋白。采用AKTA蛋白...
为分离及纯化重组大豆7S球蛋白(β-conglycinin)α′-亚基,将大肠杆菌工程菌pET-28a-α′-BL21经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导培养,得到含有重组7S球蛋白α′-亚基目的蛋白的菌液,再经超声破碎、离心得到粗提的重组蛋白。采用AKTA蛋白纯化系统利用Ni 2+亲和层析柱进一步纯化重组蛋白,当采用流速为5mL/min的平衡液平衡Ni 2+柱可以得到较高纯度的目的蛋白,纯度可达89.1%。
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关键词
7S球蛋白
α′-亚基
重组蛋白
分离
纯化
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职称材料
挤压糊化处理对苦荞粉理化性质的影响
被引量:
7
3
作者
周星杰
余少璟
+3 位作者
陈凯
吉梦莹
辰巳英三
栾广忠
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期101-106,共6页
为研究挤压糊化处理对苦荞粉理化性质的影响,利用单螺杆挤压机对苦荞粉进行挤压糊化处理,得到糊化度分别为37.7%、56.3%、74.3%及94.2%的苦荞粉,并对其基本成分、水合特性、糊化特性、热力学特性及微观结构进行测定。结果表明:随着糊化...
为研究挤压糊化处理对苦荞粉理化性质的影响,利用单螺杆挤压机对苦荞粉进行挤压糊化处理,得到糊化度分别为37.7%、56.3%、74.3%及94.2%的苦荞粉,并对其基本成分、水合特性、糊化特性、热力学特性及微观结构进行测定。结果表明:随着糊化度增加,淀粉、蛋白质及灰分质量分数总体无显著变化(P>0.05),总黄酮和脂肪质量分数显著减少(P<0.05),颜色变深;破损淀粉质量分数、吸水性指数及保水性显著增加(P<0.05);快速黏度分析结果表明挤压处理苦荞粉峰值黏度、谷值黏度、最终黏度、回生值下降,峰值时间缩短;扫描电子显微镜结果表明,苦荞粉颗粒为圆形或不规则多边形,而挤压糊化处理后苦荞粉颗粒没有固定形态,表面粗糙且有裂纹和小孔。上述理化性质的研究可为进一步的机理及应用研究提供参考。
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关键词
苦荞
挤压处理
糊化度
理化性质
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职称材料
题名
β-伴大豆球蛋白α′-亚基的基因克隆及原核表达
被引量:
3
1
作者
许妍妍
董宇
王新
彭飞
孙晓静
余少璟
辰巳英三
栾广忠
机构
西北农林科技大学食品科学与工程学院
开封市食品药品检验所
日本国际农林水产业研究中心
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期304-310,共7页
基金
中日合作项目(K332021107)~~
文摘
为制备N-连接糖基缺失的重组β-伴大豆球蛋白α′-亚基,以‘鲁96150’大豆种子为原料提取总RNA,经RT-PCR一步法获得‘鲁96150’大豆的全长cDNA,采用自行设计的引物F1/F2扩增得到目的基因α′,与pGEM-T easy载体相连构建重组克隆载体pGEM-α′,经XhoⅠ/EcoRⅠ双酶切得到目的基因与载体pET-28a连接构建重组原核表达载体pET-28a-α′,将经菌落PCR、双酶切及测序鉴定正确的表达载体转入感受态细胞E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白α′-亚基。对重组α′-亚基的诱导表达条件进行筛选,发现在菌液OD600值为0.8、诱导温度30℃、IPTG浓度为0.2mmol/L的诱导条件下诱导9h后α′-亚基的表达量较高,重组α′-亚基的分子质量大小约为70ku;工程菌pET-28a-α′-BL21经超声破碎、离心后发现重组α′-亚基部分存在于上清液中,部分形成包涵体蛋白。重组α′-亚基的克隆及表达为β-伴大豆球蛋白结构及功能特性的研究奠定基础。
关键词
Β-伴大豆球蛋白
亚基
重组蛋白
克隆
基因表达
Keywords
β-conglycinin
Subunit
Recombinant protein
Cloning
Gene expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
TS201.21 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
重组大豆7S球蛋白α′-亚基的分离纯化
被引量:
4
2
作者
余少璟
许妍妍
袁艳秋
周星杰
吉梦莹
栾广忠
机构
西北农林科技大学食品科学与工程学院
开封市食品药品检测中心
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期1853-1859,共7页
基金
中日合作项目(K332021107)
西北农林科技大学国际合作基金项目(X2015030)~~
文摘
为分离及纯化重组大豆7S球蛋白(β-conglycinin)α′-亚基,将大肠杆菌工程菌pET-28a-α′-BL21经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导培养,得到含有重组7S球蛋白α′-亚基目的蛋白的菌液,再经超声破碎、离心得到粗提的重组蛋白。采用AKTA蛋白纯化系统利用Ni 2+亲和层析柱进一步纯化重组蛋白,当采用流速为5mL/min的平衡液平衡Ni 2+柱可以得到较高纯度的目的蛋白,纯度可达89.1%。
关键词
7S球蛋白
α′-亚基
重组蛋白
分离
纯化
Keywords
β-conglycinin
α′-Subunit [ Recombinant protein
Isolation
Purification
分类号
S565.1 [农业科学—作物学]
下载PDF
职称材料
题名
挤压糊化处理对苦荞粉理化性质的影响
被引量:
7
3
作者
周星杰
余少璟
陈凯
吉梦莹
辰巳英三
栾广忠
机构
西北农林科技大学食品科学与工程学院
日本国际农林水产业研究中心
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期101-106,共6页
基金
陕西省重点研发计划项目(2017NY-169)
中日合作项目Value promotion of products from minor crops in the undeveloped areas of China(中国不发达区杂粮制品增值技术研究)(C1-I-2a/C1-II-1b)
西北农林科技大学国际合作基金项目(X2015030)
文摘
为研究挤压糊化处理对苦荞粉理化性质的影响,利用单螺杆挤压机对苦荞粉进行挤压糊化处理,得到糊化度分别为37.7%、56.3%、74.3%及94.2%的苦荞粉,并对其基本成分、水合特性、糊化特性、热力学特性及微观结构进行测定。结果表明:随着糊化度增加,淀粉、蛋白质及灰分质量分数总体无显著变化(P>0.05),总黄酮和脂肪质量分数显著减少(P<0.05),颜色变深;破损淀粉质量分数、吸水性指数及保水性显著增加(P<0.05);快速黏度分析结果表明挤压处理苦荞粉峰值黏度、谷值黏度、最终黏度、回生值下降,峰值时间缩短;扫描电子显微镜结果表明,苦荞粉颗粒为圆形或不规则多边形,而挤压糊化处理后苦荞粉颗粒没有固定形态,表面粗糙且有裂纹和小孔。上述理化性质的研究可为进一步的机理及应用研究提供参考。
关键词
苦荞
挤压处理
糊化度
理化性质
Keywords
tartary buckwheat
extrusion
gelatinization degree
physicochemical properties
分类号
TS210.1 [轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
β-伴大豆球蛋白α′-亚基的基因克隆及原核表达
许妍妍
董宇
王新
彭飞
孙晓静
余少璟
辰巳英三
栾广忠
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
下载PDF
职称材料
2
重组大豆7S球蛋白α′-亚基的分离纯化
余少璟
许妍妍
袁艳秋
周星杰
吉梦莹
栾广忠
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
4
下载PDF
职称材料
3
挤压糊化处理对苦荞粉理化性质的影响
周星杰
余少璟
陈凯
吉梦莹
辰巳英三
栾广忠
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018
7
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职称材料
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