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桔梗素D通过下调成纤维细胞TRPC6表达改善小鼠肺纤维化
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作者 梁梓琛 余常辉 +5 位作者 梁世秀 周梓聪 周子丽 孟晓静 邹飞 蔡绍曦 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期60-69,共10页
目的探究桔梗素D(PD)对肺纤维化的影响及其机制。方法博来霉素(BLM)气道内滴入构建C57BL/6J小鼠肺纤维化模型,再予PD(10 mg/kg)灌胃,28 d后处死小鼠。分组如下:对照组(control)、BLM(10 mg/kg)模型组、BLM(10 mg/kg)+PD(10 mg/kg)组。... 目的探究桔梗素D(PD)对肺纤维化的影响及其机制。方法博来霉素(BLM)气道内滴入构建C57BL/6J小鼠肺纤维化模型,再予PD(10 mg/kg)灌胃,28 d后处死小鼠。分组如下:对照组(control)、BLM(10 mg/kg)模型组、BLM(10 mg/kg)+PD(10 mg/kg)组。肺组织石蜡切片HE染色、免疫组化和天狼星红染色评估小鼠肺组织纤维化程度和瞬时受体电位离子通道亚族C成员6(TRPC6)的表达与分布。Westernblot检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。小鼠原代肺成纤维细胞体外培养,分别用PD、TRPC6抑制剂醋酸落叶松酯(LA)预处理后加入转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激细胞,根据加入的TGF-β1和PD浓度不同分组如下:control组、TGF-β1(10 ng/mL)组、PD(2.5μmol/L)+TGF-β1组、PD(5μmol/L)+TGF-β1组和PD(10μmol/L)+TGF-β1组,LA处理分组如下:control组、TGF-β1(10 ng/mL)组和LA(10μmol/L)+TGF-β1组,测定细胞存活率、collagenⅠ、α-SMA和TRPC6的表达水平、活性氧(ROS)生成水平、线粒体膜电位、细胞增殖能力等指标。利用网络药理学方法结合文献分析PD作用于肺纤维化可能通过的机制。结果PD可明显减轻BLM诱导小鼠模型的肺部纤维化程度、减少α-SMA表达(P<0.05)。CCK-8结果显示PD、TGF-β1和LA的最适宜刺激浓度分别是10μmol/L、10 ng/mL和10μmol/L;5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色结果显示PD能够有效抑制肺成纤维细胞增殖;2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色显示PD能有效减少TGF-β1诱导的细胞ROS生成(P<0.0001);线粒体膜电位检测(Jc-1染色)结果显示PD能有效缓解TGF-β1诱导的细胞线粒体膜电位下降(P<0.001);蛋白电泳结果显示PD能显著抑制TGF-β1诱导的α-SMA和collagenⅠ的表达(P<0.05)。网络药理学结合文献分析发现PD可能通过TRPC6作用于肺纤维化。免疫组织化学结果显示PD明显减轻了BLM诱导的肺组织TRPC6表达。蛋白电泳结果显示PD可明显抑制TGF-β1诱导的TRPC6表达(P<0.05);使用LA可明显抑制细胞TRPC6、α-SMA、collagenⅠ的表达(P<0.05)。结论PD可降低小鼠肺纤维化,其机制可能与下调TRPC6并减少ROS产生有关。 展开更多
关键词 肺纤维化 桔梗素D 瞬时受体电位离子通道亚族C成员6 活性氧
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烟熏联合脂多糖气管内滴注建立原发性高血压大鼠慢性肺阻塞模型 被引量:7
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作者 余常辉 陈燕 +3 位作者 李婷 李维 蔡绍曦 孟莹 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1341-1346,共6页
目的通过单纯烟熏法和烟熏联合气管内滴入脂多糖法建立符合慢性肺阻塞(COPD)病人病理生理特点的原发性高血压大鼠COPD模型,比较两种方法复制COPD模型的效果。方法将15只原发性高血压雄性大鼠随机分为3组,每组5只。其中一组为正常对照组... 目的通过单纯烟熏法和烟熏联合气管内滴入脂多糖法建立符合慢性肺阻塞(COPD)病人病理生理特点的原发性高血压大鼠COPD模型,比较两种方法复制COPD模型的效果。方法将15只原发性高血压雄性大鼠随机分为3组,每组5只。其中一组为正常对照组,其他两组分别为单纯烟熏(CS)组和脂多糖联合烟熏(LPS+CS)组建立COPD模型组。八周后观察动物一般情况,测量大鼠肺功能,肺组织病理学;Western blot检测各组肺组织中肺泡表面活性物质结合蛋白A(SP-A)、核蛋白NF-κB、Histone、胞浆蛋白p-Iκ-Kα/β、Iκ-Kα/β、IκB-α蛋白表达;qRT-PCR检测TNF-α和IL-6 mRNA表达的变化。结果两个模型组大鼠消瘦,伴有间歇咳嗽和气促。有创肺功能检测CS组气道阻力(RI)较对照组增高,但差异无统计学意义;气峰流速(PEF)较对照组明显降低。LPS+CS组PEF明显低于对照组和CS组,而RI较对照组和CS组明显增高(P<0.05)。肺组织HE染色显示两个模型组大鼠均具有慢性支气管炎和肺气肿的典型病变,CS组和CS+LPS组平均肺泡数(MAN)明显低于对照组,而肺组织平均内衬间隔(ML I)和肺泡破坏指数(DI)明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CS+LPS组ML I和DI值较CS组明显升高,MAN值较CS组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠肺组织中,SP-A和IκB-α表达水平在CS+LPS组和CS组中表达较对照组明显减少(P<0.05),CS+LPS组较CS组明显减少(P<0.05);而NF-κB表达水平及Iκ-Kα/β的磷酸化水平表达在CS+LPS组和CS组中表达较Control组明显增加(P<0.05),CS+LPS组较CS组明显增加(P<0.05)。CS和CS+LPS组大鼠肺组织中TNF-α组和IL-6 mRNA表达水平较正常组明显增加(P<0.05),且CS+LPS组TNF-α和IL-6 mRNA表达水平较CS组明显增加(P<0.05)。结论烟熏加气管注内毒素及单纯熏香烟,在原发性高血压大鼠上可复制较理想的COPD模型,但烟熏加气管注内毒素较单纯熏香烟建立的COPD大鼠模型更为理想。 展开更多
关键词 慢性肺阻塞 动物模型 高血压大鼠 吸烟
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腹腔持续注射血管紧张素-(1-7)对胆管结扎大鼠肝纤维化的抑制作用 被引量:6
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作者 李旭 宁佐伟 +3 位作者 罗薇 张文雍 余常辉 孟莹 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期944-947,共4页
目的探讨血管紧张素(1-7)[Ang-(1-7)]对胆管结扎(BDL)大鼠肝纤维化的抑制作用。方法 18只Wister雄性大鼠随机分为假手术(SHAME组)组,BDL组和Ang-(1-7)治疗组。假手术组:行开腹术再关腹,在腹腔埋注射泵,以25μg.kg-1.h-1的速度持续注射... 目的探讨血管紧张素(1-7)[Ang-(1-7)]对胆管结扎(BDL)大鼠肝纤维化的抑制作用。方法 18只Wister雄性大鼠随机分为假手术(SHAME组)组,BDL组和Ang-(1-7)治疗组。假手术组:行开腹术再关腹,在腹腔埋注射泵,以25μg.kg-1.h-1的速度持续注射生理盐水;BDL组:开腹结扎胆总管建立肝纤维化模型,在腹腔埋注射泵,以25μg.kg-1.h-1的速度持续注射生理盐水;Ang-(1-7)治疗组:BDL建立肝纤维化模型,同时在腹腔埋注射泵,以25μg.kg-1.h-1的速度持续注射Ang-(1-7)。4周后宰杀动物、取肝组织,行Masson胶原染色,肝纤维化评分,测定羟脯氨酸含量,免疫组织化学检测α-肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果与BDL组相比,Ang-(1-7)治疗组肝纤维化评分(2.33±0.52 vs 5.17±0.75)、胶原面积(23.71±3.43 vs 89.77±9.92)、羟脯氨酸含量(0.36±0.03 vs 0.52±0.04)、α-SMA的表达(54.11±17.55 vs 191.84±31.72)均减少,有统计学意义(P<0.01)。结论Ang-(1-7)对胆总管结扎所致的肝纤维化具有抑制作用。 展开更多
关键词 血管紧张素-(1—7) 肝纤维化 Α-肌动蛋白 胆管结扎
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胆管结扎诱导的肝纤维化大鼠肝脏上皮间质表型的变化 被引量:5
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作者 黄珊 张文雍 +4 位作者 潘春球 罗薇 余常辉 孟莹 李旭 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期173-176,共4页
目的观察胆管结扎诱导肝纤维化大鼠肝细胞是否发生上皮间质表型变化。方法 24只Wistar大鼠分为假手术组和胆管结扎组,运用HE及Massion染色检测肝纤维化变化;免疫印迹方法检测大鼠肝脏中上皮标志E-钙蛋白、白蛋白和I型胶原、波形蛋白的表... 目的观察胆管结扎诱导肝纤维化大鼠肝细胞是否发生上皮间质表型变化。方法 24只Wistar大鼠分为假手术组和胆管结扎组,运用HE及Massion染色检测肝纤维化变化;免疫印迹方法检测大鼠肝脏中上皮标志E-钙蛋白、白蛋白和I型胶原、波形蛋白的表达;采用免疫荧光双染的方法检测成纤维细胞特异性蛋白(FSP-1)+波形蛋白;FSP-1+I型胶原;FSP-1+白蛋白;白蛋白+I型胶原等蛋白在细胞中的定位。结果胆管结扎组大鼠的ISHAK纤维化评分(4.42±1.16 vs 0.00±0.00,P=-0.000),METAVIR纤维化评分(3.42±0.67 vs 0.00±0.00,P=-0.000)及Massion染色中胶原含量(0.30±0.06 vs 0.11±0.07,P=-0.000)较假手术组明显增高。与假手术组相比,胆管结扎组中上皮标志白蛋白(0.53±0.63 vs 1.12±0.01,P=0.000)、E-钙蛋白(0.21±0.01 vs 0.44±0.01,P=0.000)明显减少,而I型胶原(8.21±0.12 vs 0.24±0.01,P=-0.000)、波形蛋白(3.14±0.01 vs 0.37±0.01,P=0.000)显著增高。胆管结扎组中共表达FSP-1+波形蛋白、FSP-1+I型胶原、FSP-1+白蛋白、白蛋白+I型胶原的细胞较假手术组明显增多。结论在胆管结扎组诱导的肝纤维化大鼠肝脏中上皮标记减少,间质标志增加,提示有部分上皮细胞可能发生了上皮间质表型转化。 展开更多
关键词 上皮-间质表型转化 肝纤维化 Ⅰ型胶原 METAVIR纤维化评分
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晚期糖基化终末产物受体促进甲苯二异氰酸脂哮喘小鼠MUC5AC表达及气道黏液高分泌 被引量:3
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作者 熊婧 赵文驱 +5 位作者 黄国华 姚利红 董航明 余常辉 赵海金 蔡绍曦 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1301-1307,共7页
目的探讨晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号对甲苯二异氰酸脂(TDI)哮喘小鼠黏蛋白MUC5AC表达及气道黏液分泌的影响。方法在体内水平上建立TDI小鼠哮喘模型,实验分4组:对照组、TDI溶剂(AOO)致敏激发组、TDI致敏激发组、RAGE抑制剂处理组... 目的探讨晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号对甲苯二异氰酸脂(TDI)哮喘小鼠黏蛋白MUC5AC表达及气道黏液分泌的影响。方法在体内水平上建立TDI小鼠哮喘模型,实验分4组:对照组、TDI溶剂(AOO)致敏激发组、TDI致敏激发组、RAGE抑制剂处理组。采用糖原染色评估各组间气道黏液分泌情况,Western blotting及免疫组化法检测MUC5AC表达水平。同时通过Western blotting检测各组间细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路磷酸化水平。在体外水平配制TDI-人血清白蛋白(TDIHSA)复合物,刺激人支气管上皮细胞(16HBE)及经慢病毒转染空载体和sh RNA-RAGE载体的人支气管上皮细胞,检测各组MUC5AC及ERK通路分子表达情况,加入ERK抑制剂U0126后,进一步评估MUC5AC mRNA表达情况。结果与对照组相比,TDI哮喘组小鼠糖原染色阳性率及MUC5AC表达升高(P<0.05),p-ERK表达增多(P<0.05),RAGE抑制剂处理组糖原染色阳性率及MUC5AC表达较TDI组减少(P<0.05)。同时,p-ERK表达下降(P<0.05)。体外水平,与对照组相比,TDI-HSA处理组MUC5AC mRNA及p-ERK表达增多(P<0.05),sh RNA-RAGE组MUC5AC mRNA及p-ERK表达下调(P<0.05),ERK抑制剂预处理组,MUC5AC mRNA表达下调(P<0.05)。结论 TDI小鼠哮喘模型下RAGE可能通过激活ERK通路促进黏蛋白MUC5AC的表达及黏液高分泌的发生。 展开更多
关键词 甲苯二异氰酸酯哮喘 晚期糖基化终末产物受体 MUC5AC P-ERK
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琥珀酸盐受体介导Foxm1表达促进肺纤维化 被引量:2
6
作者 吕燕华 梁剑平 +4 位作者 张丹丹 王燕红 李军 余常辉 肖冠华 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期206-211,共6页
目的:探讨琥珀酸盐受体(succinate receptor,SUCNR1)在肺纤维化发生发展中的作用和机制。方法:用SUCNR1敲除(SUCNR1^(-/-))小鼠构建博来霉素诱导的肺纤维化模型,观察对肺纤维化的影响。组织生长因子β1(tissue growth factorβ1,TGF-β1... 目的:探讨琥珀酸盐受体(succinate receptor,SUCNR1)在肺纤维化发生发展中的作用和机制。方法:用SUCNR1敲除(SUCNR1^(-/-))小鼠构建博来霉素诱导的肺纤维化模型,观察对肺纤维化的影响。组织生长因子β1(tissue growth factorβ1,TGF-β1)刺激SUCNR1^(-/-)原代肺成纤维细胞,MTT检测细胞增殖、Western blot检测细胞外基质(CollagenⅠ和α-SMA)生成。检测各组肺纤维化小鼠肺组织中叉头框蛋白M1(forkhead box protein M1,Foxm1)表达,使用Foxm1抑制剂处理TGF-β1和琥珀酸盐刺激的原代肺成纤维细胞,观察对细胞增殖和细胞外基质生成的影响。结果:SUCNR1^(-/-)小鼠肺纤维化较SUCNR1^(wt)明显减轻。刺激SUCNR1^(-/-)原代肺成纤维细胞增殖能力、CollagenⅠ和α-SMA生成明显降低。Foxm1在博来霉素诱导的肺纤维化模型中明显升高,但在SUCNR1^(-/-)模型中明显减少;抑制Foxm1可减少TGF-β1和琥珀酸盐诱导的肺成纤维细胞增殖、CollagenⅠ和α-SMA生成。结论:SUCNR1参与了肺纤维化的发生发展,其可能机制是通过促进Foxm1表达而启动肺成纤维细胞。 展开更多
关键词 肺纤维化 肺成纤维细胞 琥珀酸盐受体 琥珀酸盐 叉头框蛋白M1
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1,25(OH)_2D_3通过抑制STAT3活化改善博来霉素诱导的小鼠肺纤维化 被引量:2
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作者 罗丽珊 董航明 +5 位作者 黄超文 胡亚惠 余常辉 万轩 赵海金 蔡绍曦 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期59-63,共5页
目的:观察1,25(OH)2D3(VD)对博来霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化的作用及其对STAT3活性的影响。方法:C57BL/6小鼠30只,随机分为3组。BLM组气管内注射BLM(3 U/kg);对照组(Con组)气管内注射等体积生理盐水;VD治疗组,同BLM组,但在造模后第1... 目的:观察1,25(OH)2D3(VD)对博来霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化的作用及其对STAT3活性的影响。方法:C57BL/6小鼠30只,随机分为3组。BLM组气管内注射BLM(3 U/kg);对照组(Con组)气管内注射等体积生理盐水;VD治疗组,同BLM组,但在造模后第1天开始腹腔注射VD 5μg/(kg·d)。第21天,H&E、Masson染色、Ashcroft病理评分评价肺纤维化程度,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)IL-6、IL-4、INF-γ,WB和免疫组化检测p-STAT3、α-SMA、CollagenⅠ。结果:BLM组小鼠肺纤维化程度、α-SMA及CollagenⅠ表达高于对照组,VD干预后明显减低。BLM组BALF中IL-6和IL-4增高、INF-γ降低,而VD治疗可改善上述炎症因子紊乱。WB和免疫组化结果示,BLM组p-STAT3表达增加并聚集于核内,VD干预有效抑制STAT3的磷酸化。结论:VD可能通过抑制STAT3激活而改善BLM诱导的肺纤维化和调节气道炎症因子平衡。 展开更多
关键词 肺纤维化 1 25(OH)2D3 STAT3 博来霉素
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高迁移率族蛋白1通过诱导线粒体分裂促进成纤维样滑膜细胞迁移 被引量:2
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作者 吴玉娟 曹镐禄 +5 位作者 何华宾 罗煜 温军 郭哲 余常辉 吴冰 《赣南医学院学报》 2017年第6期851-855,共5页
目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对成纤维样滑膜细胞(FLS)迁移的影响及线粒体分裂在其中的作用。方法:膝关节液分别取自RA患者(RA组)及正常人(normal组)。ELISA检测关节液中HMGB1水平。FLS分离自正常人膝关节滑膜组织,用膝关节液或者重... 目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对成纤维样滑膜细胞(FLS)迁移的影响及线粒体分裂在其中的作用。方法:膝关节液分别取自RA患者(RA组)及正常人(normal组)。ELISA检测关节液中HMGB1水平。FLS分离自正常人膝关节滑膜组织,用膝关节液或者重组HMGB1刺激FLS,观察其迁移和线粒体分裂的变化。结果:RA组膝关节液中HMGB1水平较normal组明显升高,并且RA组膝关节液刺激的FLS细胞迁移和线粒体分裂较normal组明显增多。重组HMGB1可促进FLS细胞迁移及线粒体分裂。而线粒体分裂蛋白DRP1的抑制剂(Mdivi)可以抑制HMGB1诱导的线粒体分裂和FLS细胞迁移。结论:RA患者膝关节液中高水平的HMGB1可以通过诱导线粒体分裂促进成纤维样滑膜细胞迁移。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 高迁移率族蛋白1 成纤维样滑膜细胞 线粒体分裂 细胞迁移
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TGF-β上调lncRNA-ATB促进骨肉瘤细胞MG-63细胞转移的实验研究 被引量:1
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作者 吴玉娟 曹镐禄 +5 位作者 何华宾 罗煜 温军 郭哲 余常辉 吴冰 《赣南医学院学报》 2018年第1期5-10,共6页
目的:探讨lncRNA-ATB在TGF-β促进骨肉瘤细胞转移中的作用和机制。方法:用脂质体法将pro-ATB和shRNA-ATB的质粒转染到人骨肉瘤细胞MG-63细胞,用嘌呤霉素筛选稳定细胞株;用脂质体法将过表达mimics-30a或inhibitor-30a转染到MG-63细胞;Q-... 目的:探讨lncRNA-ATB在TGF-β促进骨肉瘤细胞转移中的作用和机制。方法:用脂质体法将pro-ATB和shRNA-ATB的质粒转染到人骨肉瘤细胞MG-63细胞,用嘌呤霉素筛选稳定细胞株;用脂质体法将过表达mimics-30a或inhibitor-30a转染到MG-63细胞;Q-PCR法检测lncRNA-ATB和miR-30家族表达;Transwell法检测细胞转移能力;western blot检测ZEB1和E-cadherin蛋白表达。结果:TGF-β促进lncRNA-ATB和ZEB1蛋白表达,抑制miR-30a家族和E-cadherin蛋白表达,增加MG-63细胞转移能力;而敲低lncRNA-ATB表达后TGF-β的作用明显减弱。过表达lncRNA-ATB的MG-63细胞转移能力明显增强,ZEB1蛋白表达增加,miR-30a和E-cadherin蛋白表达下降;而mimics-30a可以抑制lncRNA-ATB的作用。相反,敲低lncRNA-ATB后,MG-63细胞转移能力和ZEB1蛋白表达明显减弱,miR-30a和E-cadherin蛋白表达增加,而inhibitor-30a可以逆转敲低lncRNA-ATB对MG-63细胞的影响。结论:TGF-β通过上调lncRNA-ATB抑制miR-30a表达,进而增加ZEB1表达及下调E-cadherin蛋白,从而促进骨肉瘤细胞转移。 展开更多
关键词 骨肉瘤细胞转移 lncRNA-ATB miR-30a TGF-Β
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肺成纤维细胞参与支气管哮喘气道重塑研究进展 被引量:4
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作者 余常辉 蔡绍曦 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期629-631,共3页
支气管哮喘(哮喘)气道重塑可引起不可逆性气道阻塞和顽固性气道高反应性。哮喘患者气道上皮下肺成纤维增殖、转化为肌成纤维细胞及大量细胞外基质(ECM)合成是导致上皮下纤维化的主要机制之一。近年来,上皮下肺成纤维细胞在哮喘气道重塑... 支气管哮喘(哮喘)气道重塑可引起不可逆性气道阻塞和顽固性气道高反应性。哮喘患者气道上皮下肺成纤维增殖、转化为肌成纤维细胞及大量细胞外基质(ECM)合成是导致上皮下纤维化的主要机制之一。近年来,上皮下肺成纤维细胞在哮喘气道重塑中的作用越来越受关注,研究也发现很多哮喘治疗药物也对肺成纤维细胞有一定的影响。明确药物对肺成纤维细胞的影响,对哮喘气道重塑的治疗有重要的意义。 展开更多
关键词 支气管哮喘 气道重塑 肺成纤维细胞
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Toll样受体4在烟熏和脂多糖联合烟熏所致肺损伤大鼠中的表达及意义 被引量:24
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作者 孟莹 余常辉 +3 位作者 李婷 李维 蔡绍曦 李旭 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第28期2230-2234,共5页
目的探讨Toll样受体(TLR)-4受体在单纯烟熏法和脂多糖(LPS)联合烟熏所致肺损伤大鼠模型中的表达及意义。方法8周龄SD雄性大鼠15只,按随机数字表法随机均分为3组:(1)对照组:常规饲养;(2)烟熏组:置于自制120L有机玻璃熏箱内... 目的探讨Toll样受体(TLR)-4受体在单纯烟熏法和脂多糖(LPS)联合烟熏所致肺损伤大鼠模型中的表达及意义。方法8周龄SD雄性大鼠15只,按随机数字表法随机均分为3组:(1)对照组:常规饲养;(2)烟熏组:置于自制120L有机玻璃熏箱内,2次/d,第1、14天气管内滴注注射用水;(3)联合组:烟熏同前法,第1、14天气管内滴注脂多糖(1mg/kg)。4周后观察动物的一般情况,测量大鼠肺功能,检测动脉血气和肺组织病理学;免疫组化检测和Western印迹法检测各组肺组织中TLR-4、核因子(NF)-KB蛋白表达及p—IK—KoL/p、IK—K∥B、IKB—OL蛋白表达。实时定量PCR检测NF—KB信号通路下游炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-d和白细胞介素(IL)-6mRNA表达。结果烟熏组和联合组大鼠消瘦,伴有间歇咳嗽和气促。对照组、烟熏组、联合组最大呼气流量分别为(13.5±2.0)、(12.3±0.9)、(10.6±1.4)ml/s,50%容量的呼气流速分别为(1.01±0.08)、(0.91±0.10)、(0.77±0.14)mL/s,联合组均显著低于其他2组(均P〈0.05);3组累积容积分别为(1735±798)、(4358±1501)、(10077±1866)ml,二氧化碳分压分别为(39.6±1.4)、(52.8±2.0)、(51.0±5.0)rainHg(1mmHg=0.133kPa),对照组均显著低于其他2组(均P〈0.05)。HE染色结果:烟熏组及联合组有明显的慢性气道炎症及肺气肿。联合组单位面积内平均肺泡数(1.56±0.26)低于对照组(3.07±0.78)(P〈0.05),烟熏组及联合组肺组织平均内衬间隔和肺泡破坏指数分别为(84±13)、(86±10)txm和0.228±0.047、0.294±0.060,均显著高于对照组的(65±6)txm和0.036±0.012(均P〈0.05);免疫组化结果:烟熏组、联合组细胞胞质及细胞膜上TLR-4蛋白表达及细胞核中NF—KB蛋白表达明显高于对照组。Western印迹法检测烟熏组、联合组TLR-4蛋白表达分别为1.12±0.11、1.36±0.07,核蛋白中NF—KB表达分别为0.590.06、1.04±0.08,均显著高于对照组的0.68±0.03和0.21±0.08(均P〈0.05);烟熏组和联合组胞质蛋白IK—K∥B蛋白磷酸化水平均显著高于对照组,IKB-a蛋白表达均显著低于对照组,而TNF、oL(3.95±0.29和5.334-0.26)、IL-6mRNA(5.04±0.28和7.23±0.39)表达均显著高于对照组(1.00±0.37、1.00±0.25)(均P〈0.05)。结论脂多糖联合炯熏与单纯烟熏均可通过NF—KB信号通路诱导大鼠肺部出现类似人类慢性阻塞性肺疾病的损伤,TLR-4参与其中。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 脂多糖类 吸烟 肺疾病 慢性阻塞性 NF—KB
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血管紧张素1-7对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的抑制作用 被引量:8
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作者 孟莹 余常辉 +1 位作者 蔡绍曦 李旭 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第20期1585-1589,共5页
目的探讨血管紧张素(Ang)1-7对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的抑制作用。方法18只Wister雄性大鼠按随机数字表法随机分为对照组、博来霉素组和博来霉素+Angl-7组。均以微量泵0.29μl/h皮下24h恒速持续泵注4周,具体为:博来霉素组以... 目的探讨血管紧张素(Ang)1-7对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的抑制作用。方法18只Wister雄性大鼠按随机数字表法随机分为对照组、博来霉素组和博来霉素+Angl-7组。均以微量泵0.29μl/h皮下24h恒速持续泵注4周,具体为:博来霉素组以博来霉素气管内滴入并泵内注入注射用水,博来霉素+Angl-7组以博来霉素气管内滴入并泵内注入Angl-7(25μg·kg-1·h-1),对照组以生理盐水气管内滴入并泵内注入注射用水。4周后HE、Masson染色评价纤维化程度,测定羟脯氨酸含量,Western印迹法分析检测I型胶原蛋白,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测转化生长因子(TGF)-β及a-I型胶原mRNA含量。培养人胚肺成纤维细胞(HFL-1),设置无刺激对照组、AnglI刺激组(10-7mol/L的Angll刺激)、Angl-7刺激组(10-7mol/L的Ang1-7刺激)、Ang11+Angl-7刺激组(上述浓度的Angl-7和AngⅡ刺激)、Ang11+Angl-7+A779刺激组(10-6mol/L的A779干预1h后予上述浓度Angl-7和AngⅡ刺激)。利用QuantiGene多基因定量检测下游因子TGF-β1、RT-PCR检测a-I型胶原mRNA表达情况。结果体内实验:与对照组比较,博来霉素组纤维化程度增高,组织中羟脯氨酸的含量明显增多[(3.69±0.18)比(0.50±0.15)mg/g,P〈0.05];博来霉素+Angl-7组纤维化程度减轻,羟脯氨酸含量[(2.14±0.29)mg/g]明显减少(P〈0.05);博来霉素组TGF-β1mRNA、a-I型胶原mRNA和d-I型胶原蛋白相对表达量分别为4.45±0.45、5.14±0.55和1.48±0.34,均高于对照组的1.00±0.20、1.00±0.08和0.23±0.11(均P〈0.05);而博来霉素+Angl-7组上述表达量(2.80±0.35、3.10±0.52和0.49±0.11)均低于博来霉素组(均P〈0.05)。体外实验:AngⅡ刺激组TGF-β1mRNA和a-I型胶原mRNA的相对表达量(1.67±0.26和4.86±1.36)均高于无刺激对照组(1.00±0.10和1.46±0.54)(均P〈0.05);而Angl-7刺激组上述表达量(1.30±0.22和2.07±1.05)与无刺激对照组差异均无统计学意义(均P〉0.05);AngⅡ+Angl-7刺激组上述表达量(0.91±0.30和1.57±0.27)均低于AngllⅡ激组(均P〈0.05);AngⅡ+Angl-7+A-779刺激组上述表达量(1.25±0.14和1.29±0.49)与AngⅡ+Angl-7刺激组差异均无统计学意义(均P〉0.05)。结论Ang1-7对博来霉素所致的肺纤维化具有抑制作用,该作用可能与Ang1-7抑制AngⅡ诱导TGF-β1的表达有关。 展开更多
关键词 血管紧张素类 转化生长因子Β 肺纤维化 博来霉素
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基质金属蛋白酶9在Wistar大鼠与自发性高血压大鼠烟熏肺损伤中的变化 被引量:3
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作者 陈燕 余常辉 +4 位作者 潘妙霞 李婷 李维 蔡绍曦 孟莹 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期1415-1420,共6页
目的 比较基质金属蛋白酶9(MMP9)在Wistar大鼠和自发性高血压大鼠烟熏肺损伤中的变化.方法 雄性Wistar大鼠及雄性自发性高血压(SH)大鼠各10只,分别按随机数字表法随机分为Wistar对照组、Wistar烟熏组及SH对照组、SH烟熏组各5只.对... 目的 比较基质金属蛋白酶9(MMP9)在Wistar大鼠和自发性高血压大鼠烟熏肺损伤中的变化.方法 雄性Wistar大鼠及雄性自发性高血压(SH)大鼠各10只,分别按随机数字表法随机分为Wistar对照组、Wistar烟熏组及SH对照组、SH烟熏组各5只.对照组常规饲养,烟熏组置于自制有机玻璃箱内,每天烟熏2次,每周烟熏6d.8周后观察大鼠一般情况,检测其肺功能及肺组织病理学;Western印迹法检测各组肺组织中核因子(NF)-κB、IκB-α、MMP9蛋白表达;实时定量PCR检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6 mRNA表达的变化,免疫组化检测各组肺组织中MMP9蛋白的表达.结果 两烟熏组大鼠出现消瘦,间歇咳嗽及气促.Wistar对照组、Wistar烟熏组及SH对照组、SH烟熏组气道阻力分别为(0.23±0.04)、(0.33 ±0.05)、(0.33±0.02)、(0.46±0.08)cmH2O ·s· ml-1,Wistar烟熏组显著高于Wistar对照组,SH烟熏组显著高于SH对照组和Wistar烟熏组(均P<0.05).肺组织HE染显示两烟熏组大鼠均有慢性支气管炎和肺气肿的改变,SH烟熏组病变更为明显.两烟熏组平均肺泡数均显著低于其对照组(均P<0.05),Wistar烟熏组平均内衬间隔、肺泡破坏指数、支气管平滑肌指数和胶原指数均显著高于Wistar对照组,SH烟熏组均显著高于SH对照组和Wistar烟熏组(均P<0.05).Western印迹法检测Wistar对照组、Wistar烟熏组及SH对照组、SH烟熏组NF-κB蛋白表达分别为(0.322 ±0.014)、(0.558 ±0.044)、(0.373±0.029)、(1.156±0.197),MMP9蛋白表达分别为(0.255±0.070)、(0.456±0.089)、(0.594±0.184)、(0.847 ±0.138),SH烟熏组均显著高于SH对照组和Wistar烟熏组(均P<0.05);SH烟熏组IκB-α蛋白表达均显著低于SH对照组和Wistar烟熏组(均P<0.05).两烟熏组TNF-α mRNA表达水平均显著高于其对照组(均P<0.05),SH烟熏组IL-6 mRNA表达水平均显著高于SH对照组和Wistar烟熏组(均P<0.05).肺组织MMP9免疫组化结果显示烟熏组表达水平均明显高于对照组,SH烟熏组表达明显高于Wistar烟熏组(均P<0.05).结论 Wistar大鼠与SH大鼠烟熏后肺部均出现类似人类慢性阻塞性肺疾病的损伤,SH大鼠比Wistar大鼠肺损伤表现更为严重,MMP9表达水平明显增加。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶9 大鼠 近交SHR 肺损伤 烟熏
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TSLP siRNA干预对哮喘模型大鼠气道重塑的作用及对ERK信号通路的影响 被引量:1
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作者 黄武锋 余常辉 +2 位作者 赵海金 刘爱华 蔡绍曦 《重庆医学》 CAS 2021年第14期2341-2345,2351,共6页
目的分析胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)小干扰RNA(siRNA)干预对哮喘模型大鼠气道重塑的作用及对细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的影响。方法选取清洁及健康的雄性大鼠56只,随机选取14只为正常组,剩余42只建立哮喘模型,分为模型组、空... 目的分析胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)小干扰RNA(siRNA)干预对哮喘模型大鼠气道重塑的作用及对细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的影响。方法选取清洁及健康的雄性大鼠56只,随机选取14只为正常组,剩余42只建立哮喘模型,分为模型组、空白对照组和TSLP siRNA干预组,各14只。Image-Pro Plus软件计算出大鼠的小气道支气管壁总管壁面积、小气道支气管壁内管壁面积和支气管壁平滑肌的面积,生理记录仪记录大鼠的肺顺应性和肺弹性阻力,显微镜下观察大鼠白细胞数量、嗜酸性粒细胞(EOS)数量,并计算出EOS/白细胞的值,Western blot法检测细胞外信号调节激酶-1(ERK1)、伤害性信息与即刻早期基因(C-FOS)、血小板衍生因子(PDGF)蛋白水平表达。结果与模型组、空白对照组相比,TSLP siRNA干预组小气道支气管壁总管壁面积、小气道支气管壁内壁面积、支气管壁平滑肌面积均减小,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组、空白对照组相比,TSLP siRNA干预组肺顺应性均升高,肺弹性阻力均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组、空白对照组相比,TSLP siRNA干预组白细胞、EOS/白细胞均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组、空白对照组相比,TSLP siRNA干预组ERK1、C-FOS、PDGF通路蛋白均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TSLP siRNA干预通过调控ERK信号通路相关蛋白,改善气道重塑指标,提高大鼠的肺顺应性,降低大鼠的肺弹性阻力,抑制炎性反应。 展开更多
关键词 胸腺基质 小干扰RNA 哮喘 气道重塑 ERK信号通路
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高迁移率族蛋白1协同屋尘螨对人气道上皮细胞通透性及连接蛋白损伤的影响 被引量:1
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作者 黄武锋 余常辉 +2 位作者 赵海金 邹飞 蔡绍曦 《热带医学杂志》 CAS 2021年第8期949-952,1005,944,共6页
目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)协同屋尘螨(HDM)对人气道上皮细胞系16HBE通透性及连接蛋白表达和分布的影响。方法将细胞分为正常对照组(加入无刺激物培养基)、HDM(100 U/mL)刺激组、HMGB1(400 ng/mL)刺激组和HDM(100 U/mL)+HMGB1(400 ... 目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)协同屋尘螨(HDM)对人气道上皮细胞系16HBE通透性及连接蛋白表达和分布的影响。方法将细胞分为正常对照组(加入无刺激物培养基)、HDM(100 U/mL)刺激组、HMGB1(400 ng/mL)刺激组和HDM(100 U/mL)+HMGB1(400 ng/mL)联合刺激组。处理细胞24 h,并通过MTT比色法测定16HBE细胞存活和生长。通过测定紧密连接相关的单层细胞的跨膜电阻值(TER)及FITC-右旋糖苷通透性,观察处理因素对16HBE细胞通透性的影响;蛋白质印迹法(Western bolt)测定E-cadherin,β-catenin,claudin-1和occludin4种连接蛋白水平的表达;共聚焦显微镜观察连接蛋白的分布。结果与正常对照组比较,HDM可引起TER一过性下降,降低occludin和claudin-1蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);与HDM刺激组比较,联合刺激组显著增加16HBE细胞通透性,减少16HBE细胞TER值,增加FITC-右旋糖苷通透性,差异有统计学意义(P<0.05)。与HDM和HMGB1刺激组比较,联合刺激组降低连接蛋白occludin和claudin-1蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05),促进粘附连接蛋白E-cadherin及β-catenin再分布。结论HMGB1协同HDM增加人气道上皮细胞16HBE通透性及连接蛋白表达异常,为HMGB1可能参与了哮喘上皮屏障功能异常提供新的证据。 展开更多
关键词 HMGB1 屋尘螨 16HBE细胞 通透性
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