胚胎肝脏原始细胞表型及生物学特性

背景:目前肝干细胞尚无特异性标志物,从胚胎中建立具有干细胞样特性的肝脏原始细胞群是鉴定及研究肝干细胞的一个可行方法。目的:观察胚胎肝原始细胞表型及生物学特性,寻找肝原始/干细胞候选细胞群。方法:酶消化法分离、培养孕13.5d的BALB/C小鼠胚胎肝原始细胞,免疫细胞化学染色及免疫荧光染色、Western blot、RT-PCR法测定AFP/Albumin/CK19/c-Met/E-cadherin等肝干细胞表面标记,以及CD45、CD14、SMA等非肝干细胞标记的表达;相差显微镜及透射电镜观察细胞形态结构;流式细胞仪测定细胞周期分布时相;表皮生长因子加二甲基亚砜诱导分化成熟后行PAS糖原染色。结果与结论:实验成功分离得到纯度较高的干细胞,原代细胞多呈集落样生长,小圆形。细胞周期测定提示细胞多数处于静止期,符合干细胞特点。透射电镜观察细胞核浆比例大,细胞器不成熟,呈现原始细胞特点。流式细胞周期测定结果S期占10.8%,G2/M期占10.6%,无异常DNA含量。PAS染色后阳性对照组肝癌细胞的糖原主要表达在靠近一侧的核周边胞质内,呈强阳性;而胚胎肝前体细胞诱导组,核浆比例大,部分细胞胞质内可见较弱的糖原表达,充满胞质。提示实验初步建立表达AFP+Albumin+CK19+c-Met+E-cadherin+标志的集落样生长的肝原始细胞群,其表达多种干细胞表型,具有未成熟肝干细胞特点,可能作为肝干细胞候选细胞。

经皮肾镜钬激光碎石术治疗全胰管结石临床效果研究（附10例报告）

【目的】探讨经皮肾镜钬激光碎石术治疗全胰管结石的临床效果。【方法】选择2012年1月至2014年12月本科室收治的10例全胰结石患者，行经皮肾镜钬激光碎石术治疗，观察患者术后恢复情况。以及并发症发生情况。【结果】10例患者术后均康复良好．无胰漏、腹腔大出血、腹腔脓肿等并发症，均痊愈出院。随访1个月至3年．其中7例患者术前反复上腹部疼痛得到完全缓解，术前7例糖尿病患者中5例患者血糖较前控制改善。【结论】经皮肾镜钬激光碎石术治疗全胰管结石，具有创伤小，术后恢复快，无明显并发症的优点。

保留迷走神经干门奇静脉断流加分流术治疗门静脉高压症28例分析

目的探讨保留迷走神经干门奇断流加分流术(VTPPDS)治疗门静脉高压症的疗效。方法对比分析我院2005年至2011年28例VTPPDS(n=28)和30例门奇断流加幽门成形术(PD+PP;n=30)治疗门静脉高压症的临床资料,对两组资料术后胃肠功能恢复(术后72 h内)、术后腹胀、再出血、腹水变化、住院时间(14 d内出院)采用卡方检验进行统计分析。结果 VTPPDS治疗组,27例治愈,1例死于肝衰竭。与PD+PP对照组对比,VTPPDS治疗组术后胃肠功能恢复明显更快(60.0 vs 85.7%,P<0.05),食后腹胀率(43.3%vs 7.1%,P<0.01),及再出血率(26.7%vs 7.1%,P<0.05)均更低,腹水减少或消失率(62.5%vs95.5%,P<0.01)更高,住院时间更短(53.3%vs 78.6%,P<0.05)。结论 VTPPDS术式是治疗门静脉高压症的有效手术方法,并且术后效果比PD+PP术式更具优越性。

腹腔镜联合胆道镜下辅助小切口治疗胆管结石20例分析

【目的】探讨腹腔镜辅助小切口联合胆道镜在胆总管探查取石术中的疗效和体会。【方法】回顾分析本院2010～2011年20例双镜辅助下小切口胆总管探查取石术患者的I临床资料。【结果】胆管结石20例，年龄40（16~75）岁，合并胆管炎5例，合并肝内胆管结石3例。20例均手术成功。T管术后14d拔除，平均手术时间150min，平均住院时间18d，胆总管均无结石残留或明显胆瘘。【结论】腹腔镜辅助小切口联合胆道镜在胆总管探查取石术中的应用，其操作简便，创伤小，临床效果好，适于基层医院推广应用。

急重症合并十二指肠损伤23例诊治分析

外伤性急重症患者多发伤常见，该类病例病情复杂、凶险，术前明确诊断困难，处理较棘手。我院1980年1月至2010年1月收治急重症合并十二指肠水平部损伤患者23例，现就诊治情况报道如下。

Glisson鞘外分离法行腹腔镜肝左外叶切除的疗效观察

目的观察腹腔镜无肝门阻断、肝内Glisson鞘外分离法肝左外叶切除术的疗效。方法回顾性分析2016年1月—2017年2月行腹腔镜下无肝门阻断、肝内Glisson鞘外分离法肝左外叶切除术和开腹左肝外叶切除术两组患者手术时间、输血率、出血量、术后丙氨酸氨基转移酶(ALT)峰值、术后并发症发生率、经口进食时间、腹腔引流管拔除时间、术后住院天数。结果无肝门阻断、Glisson鞘外分离法行腹腔镜肝左外叶切除术比开腹手术经口进食时间短、腹腔引流管拔除时间早、术后ALT峰值小、术后住院天数短(P<0.05);而两组出血量和输血量、手术时间、术后并发症发生率差异无统计学意义,均手术成功,患者顺利出院。结论腹腔镜下无肝门阻断、Glisson鞘外分离法肝左外叶切除术疗效较佳。

NF-kB在肝癌中表达及其与上皮间质转化的关系

目的探讨核转录因子NF-k B在肝癌中的表达情况及其与肝癌上皮间质转化(EMT)的关系。方法 (1)方便收集福建省龙岩市第二医院2014年12月—2015年10月肝癌患者12例外周血样本,采用Can Patrol CTC二代富集技术分离循环肿瘤细胞(CTCs);(2)采用RNA原位杂交(RNA-ISH)技术,鉴定CTCs类型和检测NF-k B的表达。结果91.7%(11/12)肝癌患者外周血样本中检测出CTCs,根据EMT标志物,CTCs可被分为3个亚群,包括上皮型CTCs,上皮/间质混合型CTCs和间质型CTCs。间质型CTCs、NF-k B在肝癌外周血中表达率分别为66.7%(8/12)、83.3%(10/12);NF-k B表达与CTCs检出率、间质型CTCs表达显著相关(P<0.05)。结论 NF-k B可能和肝癌的EMT发生有关,并促进肿瘤转移。

腹腔镜肝中叶切除术的研究进展

位于肝脏中叶的肿瘤,传统手术治疗方法为开腹切除术。随着腹腔镜技术在肝胆外科的普及,腹腔镜肝中叶切除术有望取代开腹手术,避免了切除左、右三叶或扩大半肝切除术。但因腹腔镜肝中叶切除术操作复杂,技术要求较高,作为常规技术应用难度较大。本文现就近年腹腔镜肝中叶切除术的进展作一综述。

提升少先队辅导员专业化素养的“八字诀”

少先队辅导员是少先队工作中最为重要的力量,他们的能力水平决定着少先队工作的真正成效。文章从"导"、"引"、"研"、"建"、"练"、"结"、"展"、"评"八个方面就辅导员的职业发展和成长路径作了探讨。

干细胞、肿瘤干细胞与肿瘤

干细胞是一种具有自我更新、无限增殖和多向分化能力的细胞。而多数肿瘤是由不同增殖潜能的不均一性细胞构成。随着对干细胞的研究不断深入,使人们对肿瘤的发生机制重新进行了审视,并在造血系统、脑、肺、乳腺等部位肿瘤中发现极少量的具有与干细胞非常类似生物学特性的细胞,称之为肿瘤干细胞,它们很可能是肿瘤细胞的起源.肿瘤干细胞的提出,使得靶向性杀伤肿瘤干细胞从而使根治肿瘤和防止肿瘤复发和转移成为可能。所以研究肿瘤干细胞的起源及其与肿瘤的发生关系,成为当前研究和治疗肿瘤领域的新热点。本文就肿瘤干细胞的存在证据、干细胞与肿瘤干细胞的异同点及它们与肿瘤发生之间的关系作简要的综述。

胚胎肝干细胞分离与移植治疗裸鼠急性肝损伤

目的探讨胚胎肝脏原始／干细胞移植治疗急性肝功能损伤裸鼠的可能性与有效性。方法酶消化法分离孕13．5d的BALB／C小鼠的胚胎肝脏原始／干细胞，免疫荧光染色法及RT—PCR法鉴定AFP、Albumin、CK19、c—Met等肝系和胆系标志物，给四氯化碳（CCl4）诱发的肝毒性损伤的裸鼠尾静脉注射4×10^5个干细胞，于注射前和注射后第1、2、4、7天取裸鼠血清，测定肝功能指标，观察肝脏组织学的改善情况。结果经分离可得到具有干细胞特点的胚肝原始细胞，治疗组裸鼠在干细胞移植后肝功能指标逐渐降低，第1、2、4天均低于对照组，治疗组裸鼠肝脏组织学的病理损伤的恢复比对照组快。结论酶消化法能够分离得到较多胚胎肝脏原始／干细胞，并且具有一定的改善急性肝损伤裸鼠的肝功能及肝脏病理指标的作用。

肝干细胞来源的研究进展

从广义上讲，肝干细胞并非特指某一类细胞，而是与肝脏胚胎发育及再生有关的各类具有干细胞特性细胞类型的总称，是一种具有分化为成熟肝细胞和胆管细胞能力和自我更新能力的多潜能干细胞。根据其起源的不同，通常可分为肝源性肝干细胞和非肝源性肝干细胞。