转MhGlu基因烟草灰霉病抗性及光合特性研究(英文)

以湖北海棠盆栽及组培苗叶片为材料,经NaCl、PEG-6000及4℃下ABA处理后,通过RT-PCR技术克隆了湖北海棠β-1,3-葡聚糖酶基因MhGlu;构建MhGlu基因的植物表达载体,通过农杆菌介导法将MhGlu基因转入烟草中,并通过PCR和RT-PCR检测,成功获得了4个转基因株系T6、T8、T11和T18;以转基因烟草株系T6及T8和非转基因对照植株为材料,对MhGlu基因的功能进行了进一步分析。结果显示:(1)半定量qRT-PCR显示,NaCl、PEG-6000及4℃下ABA处理均可以诱导湖北海棠盆栽及组培苗叶片MhGlu基因的表达;NaCl和PEG-6000处理48h内MhGlu基因的表达随处理时间延长逐渐增强,4℃下ABA处理的MhGlu基因表达量在4h时开始上调,12h时略降低,48h时又达到最大。(2)半定量RT-PCR检测转基因烟草植株几个病程相关基因PRs的表达量,表明过表达的MhGlu基因诱导并增强了烟草病程相关基因NtPR1、NtPR3和NtPR5的表达。(3)用灰霉病侵染烟草叶片,转基因烟草株系T6、T8均表现出较强的抗灰霉病特性。(4)测定烟草植株光合特性参数,转MhGlu基因烟草株系的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)较对照组均显著提高,且T8的净光合速率和蒸腾速率均显著高于T6,而T8与T6的气孔导度差异不显著。MhGlu基因在烟草中的过量表达能诱导病程相关基因PRs的表达,激活了烟草的光合特性保护机制,提高了转MhGlu基因烟草植株的灰霉病抗性。

‘南通小方柿’DkADH1基因遗传转化及功能分析

[目的]研究‘南通小方柿’(Diospyros kaki Linn.‘Nantongxiaofangshi’)乙醇脱氢酶基因DkADH1的功能,阐明其在柿果脱涩过程中的作用。[方法]构建了DkADH1基因植物双元表达载体,通过农杆菌介导法将该基因转入番茄中。以转基因和非转基因番茄株系的不同组织为材料,钨酸钠-钼酸钠比色法测定可溶性单宁含量,并用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测原花青素(PA)合成途径相关基因的表达情况。[结果]经PCR和RT-PCR检测,获得了3个转DkADH1基因番茄株系。过量表达DkADH1基因的转基因番茄植株的叶片、花、果实中可溶性单宁含量均显著低于非转基因番茄植株。qRTPCR显示:转基因植株不同组织中PA合成途径相关基因F3'5'H、LAR、MYB4和PAL的表达量与非转基因植株相比均显著下调。[结论]DkADH1能降低植物可溶性单宁的含量并抑制其生物合成途径相关基因的表达,与柿果脱涩密切相关。

果树逆境胁迫相关miRNA的研究进展

miRNA是一类长度为18~24 nt的内源性非编码小RNA。在逆境胁迫下,miRNA通过与目标基因碱基互补配对,对目标基因mRNA进行剪切或翻译抑制,从而使果树响应各种逆境胁迫。本文介绍了植物miRNA的合成和作用机制,对果树miRNA在响应生物和非生物胁迫(干旱、冷害、盐胁迫、营养元素缺失)的研究进展进行了综述,并对miRNA在果树抗逆方面的研究前景进行了分析。

苹果赤霉素氧化酶基因MdGA2ox8的克隆及功能分析

【目的】从‘苏帅’苹果(Malus domestica)中分离克隆赤霉素氧化酶基因MdGA2ox8的开放阅读框(ORF),分析其序列特征及在苹果中的组织表达特异性,通过在烟草中过表达MdGA2ox8研究其对烟草生长发育的影响,为该基因功能分析及应用提供理论参考。【方法】采用RT-PCR方法从苹果中克隆出MdGA2ox8的ORF区。利用NCBI、DNAMAN和Pfam在线软件进行氨基酸序列比对和保守结构域分析;利用Expasy在线软件对MdGA2ox8氨基酸组成、分子量、等电点进行分析;利用SignalP和TMHMM Server V.2.0分别在线分析蛋白质的信号肽和预测蛋白质的跨膜结构域;利用MEGA 7.0软件构建系统进化树。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测MdGA2ox8在苹果不同组织中的表达量。构建MdGA2ox8过表达载体,采用农杆菌介导的遗传转化技术将MdGA2ox8导入烟草中,获得具有潮霉素抗性的转基因烟草植株,通过GUS染色、基因组PCR和RT-PCR鉴定转基因阳性植株;将野生型和转基因烟草移栽后,在第一朵花开放时测定转基因烟草的株高、节间长度和叶片长宽比以及烟草叶片叶绿素含量,激素GA1和GA4含量,并通过RT-qPCR方法分析烟草中相关基因的表达水平。【结果】成功克隆并获得了长为1 122 bp的MdGA2ox8 ORF区,编码373个氨基酸残基,蛋白相对分子质量为42.8 kD,理论等电点为5.44,不稳定系数为49.73,具有GA2ox的保守结构域DIOX_N和20G-Fell_Oxy,但无明显疏水区,无跨膜区,无信号肽,为非分泌蛋白。序列系统进化分析结果显示MdGA2ox8与白梨GA2ox8亲缘关系最近。RT-qPCR结果表明,MdGA2ox8在苹果各组织中差异表达,在花中的表达量最高,其次为老叶>幼叶>韧皮部,在木质部和幼果中几乎不表达。将MdGA2ox8转入模式植物烟草中,获得了5个转基因阳性株系。与野生型相比,过表达MdGA2ox8烟草植株GA4含量降低,GA1含量有所升高,其中野生型和转基因烟草GA1平均含量分别为1.26和1.75 ng·g-1,GA4平均含量分别为5.43和1.07 ng·g-1。与野生型相比,转基因烟草植株GA1和GA4总含量降低,使植株节间缩短、矮化以及花期推迟,其中野生型和转基因烟草植株平均高度分别为38.50和7.36 cm,节间长度分别为9.5和3.3 cm;转基因烟草叶片颜色深绿,叶片长宽比降低。烟草内源赤霉素合成途径相关基因NtGA3ox1和NtGA3ox2的表达水平受MdGA2ox8的正反馈调节。【结论】获得苹果赤霉素氧化酶基因MdGA2ox8的开放阅读框,MdGA2ox8具有组织表达差异性。MdGA2ox8过表达烟草植株中GA1和GA4总含量降低,导致植株节间长度缩短、植株矮化。

‘南通小方柿’赤霉素不敏感基因DkGAI2的克隆与功能分析

【目的】对DkGAI2的亚细胞定位及表达特性进行分析,并将DkGAI2转化烟草,分析转基因烟草的生理和形态指标,为GAI的深入研究提供理论基础。【方法】以‘南通小方柿’高通量转录组测序结果中标注的GAI2为原始序列(未发表),利用RT-PCR,3′RACE和5′RACE技术从‘南通小方柿’中克隆得到DkGAI2的序列全长。利用生物信息学分析其序列特征,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析DkGAI2在‘大方柿’及‘南通小方柿’5个不同物候期的表达特性以及DkGAI2在‘南通小方柿’不同组织中的表达特性,构建瞬时表达载体pCAMBIA-GFP-1302-DkGAI2,并瞬时侵染烟草分析DkGAI2的亚细胞定位,通过构建DkGAI2植物双元表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草,经过GUS染色、RT-PCR对转基因烟草株系进行鉴定;并将野生型和转基因烟草移栽,于第一朵花开放时测定转基因植株的株高、节间长度、叶片长宽比以及GA1和GA4含量。【结果】从‘南通小方柿’中克隆得到了1827 bp的DkGAI2,DkGAI2核苷酸序列与猕猴桃(KF588651.1)、光皮烨(MF149049.1)、砂梨(KX078214.1)、苹果(FJ535245.1)、葡萄(MG738718.1)的相似度达72%-80%,DkGAI2具有DELLA蛋白家族特有的DELLA结构域,属于DELLA蛋白基因家族。DkGAI2编码608个氨基酸,相对分子质量为66.5 kD,理论等电点为5.54,不稳定系数为50.41,无明显疏水区,无跨膜区,无信号肽。序列系统进化分析结果显示,DkGAI2与葡萄亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示,DkGAI2在‘南通小方柿’5个不同物候期的表达量都高于‘大方柿’;DkGAI2在‘南通小方柿’不同组织中表现出组织表达特异性,其中,在老叶中表达量最高,其次为茎尖和幼叶,而在幼果中几乎不表达。pCAMBIA-GFP-1302-DkGAI2融合蛋白的绿色荧光信号位于细胞核中,表明DkGAI2编码蛋白位于细胞核。经过GUS染色和RT-PCR检测,共获得5个转DkGAI2烟草株系,转基因烟草叶片GA1含量增加,GA4含量降低,GA1和GA4总含量降低,且转基因烟草植株出现植株矮化、节间缩短、叶片长宽比降低及花期延迟的表型。【结论】DkGAI2具有组织表达特异性,定位于细胞核,DkGAI2在‘南通小方柿’5个不同物候期的表达量均高于‘大方柿’。推测DkGAI2可能通过降低GA4的含量进而引起植株矮化。

铁肥及其复配剂对紫金黄脆(金陵黄脆)桃树叶片黄化的防治效果

为探究不同种类铁肥及其复配剂对桃树叶片缺铁性黄化病的防治效果,以紫金黄脆(金陵黄脆)为试验材料,分别于2020年秋季、2021年春季开展试验。整树叶面喷施铁肥及其复配剂(第1次喷施结束2周后喷施第2次),随后检测在第1次喷施处理21 d后桃树叶片的SPAD值和活性铁含量。结果表明,无论在春季还是秋季,叶面施用铁肥及其复配剂均可以显著提高桃树叶片的SPAD值和活性铁含量。在2020年秋季,0.5%FeSO_(4)、0.3%乙二胺四乙酸铁钠(EDTA-FeNa)、0.2%和0.3%螯合氨基酸亚铁、0.5%黄腐酸铁(FA)和0.5%柠檬酸铁分别为该类型铁肥的最适溶液类型及浓度,0.3%FeSO_(4)+0.2%K_(2)SO_(4)+0.3%H 3BO 3为防治效果最佳的铁肥复配剂。在2021年春季,0.3%FeSO_(4)、0.3%和0.5%EDTA-FeNa、0.3%螯合氨基酸亚铁、0.4%和0.5%的黄腐酸铁(FA)、0.5%柠檬酸铁分别为该类型铁肥的最适溶液类型及浓度,0.3%FeSO_(4)+0.2%K_(2)SO_(4)+0.3%赖氨酸为防治效果最佳的铁肥复配剂。综合2年铁肥及其复配剂处理的试验数据,0.3%FeSO_(4)+0.2%K_(2)SO_(4)+0.3%赖氨酸处理的桃树叶片的SPAD值和活性铁含量增幅最高,防治效果最佳。

数字叙事视角下档案微视频特点及传播优化策略研究

数字叙事作为一种利用数字媒介展开的新型互动性叙事方式,给予知识输出更多的可能性。基于此,文章将数字叙事方式引入档案微视频研究之中,探究数字叙事方式影响下,档案微视频所呈现的叙事客体数字化、叙事主体多元化、叙事媒介多模态化、叙事体验沉浸化等特点;并进一步提出档案微视频传播优化策略,以实现公众档案意识的提高和档案知识传播效应的提升。

基于Logistic模型的农户扩大柑橘种植规模意愿影响因素分析

衢州素有“中国椪柑之乡”、“中国胡柚之乡”等称号,柑橘是衢州种植面积最大、产量最多的水果。2018年,柑橘种植面积占全市水果总面积的76.13%,产量占水果总量的67.38%,柑橘产业对衢州水果和农业产业的发展有直接的影响。柑橘产业也是衢州农村经济的重要组成部分,衢州市所辖6个县市区均有柑橘分布,柑橘产业是全市农业的支柱产业之一,其发展状况直接关系到农村发展和农民增收。

元宇宙视域下档案馆虚拟服务探索

引言2021年,元宇宙(Metaverse)一词引爆全球,开始成为全社会热议的新兴概念,以元宇宙赋能产业创新成为各行各业积极探索的目标。其中,诸如Facebook、谷歌、苹果、腾讯、阿里巴巴、字节跳动等互联网巨头率先进军元宇宙及相关领域,不仅为元宇宙的发展注入巨额资本,引入大量应用场景和用户群体,更重要的是直接成为元宇宙底层技术革新的强大推动力。

新时代高校课程思政建设的原则、内容与方法探析

课程思政是新时代中国特色社会主义高等教育的理论创新和实践创新。当前,课程思政建设进入全面推进的新阶段,厘清课程思政建设的基本原则、内容和方法是至关重要的。基于课程教学论和思想政治教育学视角,课程思政建设要遵循求实创新、师生协同和反馈调节原则;构建“知情意”三个维度的内容体系;从高校、教师和课程三个层面上,坚持整体建构和系统推进相统一、有效激励和典型示范相统一、知识传授和价值引领相统一的方法。

浅谈高校思想政治理论课语言艺术的运用

语言作为人与人之间沟通的重要载体,是教育者传授知识的重要途径,贯穿思想政治教育的全过程,是思想政治理论课教师开展思想政治教育的有效方式。在思想政治理论课中运用好语言艺术是教育者的使命与责任,思想政治理论课教师应不断改进和创新语言艺术,通过丰富的内容、多样的形式、高超的技巧来提升思想政治教育话语的引导力、感染力和认同转化力。

徽派传统明清民居建筑设计美学——以安庆市赵朴初故居为例

文章以安庆市赵朴初故居为例,以修复后的故居的建筑布局和绿化设计研究为切入点,关注传统民居所在区域空间肌理,乃至对城市历史的延续与文化传承,在阅读大量地方志文献和实地调研的基础上,从区位、人文、布局、空间、材质等角度出发,得到该场地的美学设计结论,总结解读徽州传统明清民居设计美学,并以调研实例作为补充。

橡皮的自述

我是一块很普通的橡皮，安静地躺在文具商店的一个橡皮盒子里。我和我的姐妹们一样，身上有一种牛奶的香味，后来，连装我们的盒子都变得香香的了。

大数据背景下数字版权保护研究

大数据时代背景下,数字作品逐渐成为数字经济的重要产品。然而,随着数据开放共享模式的推进,数字作品被非法盗取的情况时有发生,数字版权安全难以得到保障,著作权人、版权所有者维权之路障碍重重。因此,在阐述数字版权保护相关概念的基础上,立足于我国数字版权保护现状,对版权保护现存的不足进行详细剖析,并从国家制度层面、技术应用层面以及公众意识层面提出切实可行的对策建议,以期构建和完善我国数字版权保护体系。

地方馆藏特色档案文化创意产品开发策略探析

一、引言地方馆藏特色档案是具有区域、历史、文化、经济、民族特色的地方元素信息资源,反映了本地域的自然景观、特色人物、文化风俗、名优特产、重大历史事件和民族特色[1]。这些独特且唯一的馆藏资源成为档案机构开发利用时的“富矿”,借以创意设计的手法,将地方特色档案价值形态、文化内涵与产品功能、结构、外观、界面等要素相关联,生产出兼具实用、美感、趣味的文化产品成为各级地方综合档案馆开发利用的方向。

消毒剂对环境菌株抑制作用的研究

目的 研究企业常用消毒剂对于洁净室环境监测分离的菌株样本的抑制作用。方法 通过VITEK2-COMPACT全自动细菌鉴定及药敏分析系统鉴定收集到的环境菌株。对3种消毒剂(碘伏、无水乙醇和苯扎溴铵)进行梯度稀释,利用打孔法研究3种消毒剂在不同含量下对环境菌株的抑制作用。结果 共检出革兰阳性菌8种、革兰阴性菌2种、酵母菌1种、芽孢杆菌2种;苯扎溴铵对革兰阳性菌的抑菌能力都较强,随着含量的降低,抑菌作用逐渐减弱;碘伏对革兰阴性菌及酵母菌的抑制作用都非常强,随着含量降低,抑菌作用逐渐降低。3种消毒剂对2种芽孢杆菌的抑制作用均有限。结论 用1.00%苯扎溴铵和0.50%的碘伏抑菌作用都非常强。另外,应配合使用杀孢子剂,避免芽孢杆菌孢子在空气中传播。

互联网背景下西安共享单车物品遗失问题和方案设计

互联网借助智能手机、GPS及条码、智能锁等技术融入人民经济社会生活的各个领域,向民众提供便利。共享单车迅猛发展改变了人民的出行方式但也存在物品丢失,无法找回,没有专门的监管机制等问题,通过创建“星球”小程序来解决西安市共享单车物品遗失问题,并提出风险规避策略,该研究为共享单车解决顾客物品遗失问题提供一定参考。

高校人文素养融入“三观”教育对高校生积极情感塑造的价值分析

本文就高校人文素养融入“三观”教育为着力点,就当前高校大学生精神心理健康现况展开简要阐述,之后再探讨了大学生对“三观”教育模式的认知深度,以及对大学生当前常见的精神心理问题展开溯源性剖析,之后就“三观”教育与大学生心理健康协同教育的开展形式展开深入浅出的分析,最终就当前大学生精神心理特征落实具体的“三观”教育策略。

甜柿叶片矿质元素含量的年周期变化规律

以甜柿品种次郎、大秋、甘秋、禅寺丸为材料,连续采集甜柿生育期内土壤样品和叶片样品,进行营养元素含量测定,并对土壤和叶片营养元素含量进行相关分析。结果表明：随着生育期的变化,叶片氮和磷含量呈现下降趋势,钾和铁含量呈先上升后下降的趋势,钙和锰含量呈现上升趋势,磷含量上升后保持相对稳定,锌和铜含量呈现先下降后上升;大秋、甘秋、禅寺丸吸收钾分别集中在5-7月份、5-8月份、5-9月份;甜柿吸收磷主要集中在果实采收后;甜柿在生育期内对钙肥需求量较大;次郎、大秋吸收镁和锰主要集中在5-8月份;甘秋、禅寺丸吸收镁和锰主要集中在5-9月份;在8月之前,次郎、甘秋和禅寺丸叶片可能尚未成熟,树体需要吸收大量铁肥。

古文字教学对中小学四育培养的渗透路径探究

黄德宽先生认为:“古文字是包括小篆在内的先秦文字,即隶书以前的文字。”甲骨文是中国最早的成体系的文字,具有图画性、象形性等特点,如果能将甲骨文等古文字引入小学的识字教学、中学的文言文教学中,对于帮助学生掌握生字词,理解课文,了解中国历史会起到非常大的帮助作用。