痛风患者外周血淋巴细胞亚群分布异常的临床研究

目的研究痛风患者与健康人外周血中B淋巴细胞、T淋巴细胞及自然杀伤(NK)细胞有无差异及临床意义。方法收集浙江省人民医院2017年5月-2018年5月的57例痛风患者和57例体检对照组的流式抗凝血,采用外周血和荧光标记抗体共同孵育的方法,使用BD FACSCantoⅡ流式细胞仪检测CD4^+、CD3^+、CD19^+B淋巴细胞、NK细胞及CD8^+T淋巴细胞亚群的分布频率。结果痛风组中NK细胞频率明显低于对照组(P <0. 05),CD3^+T、CD4^+T淋巴细胞频率显著高于对照组(P <0. 05)。结论 CD3^+T、CD4^+T淋巴细胞及NK细胞在评估痛风患者免疫功能中差异有统计学意义。

尿路感染患者中铜绿假单胞菌对常见抗生素耐药率分析

目的回顾性调查尿路感染患者尿液标本中铜绿假单胞菌对常见抗菌素的耐药状况,以促进抗生素的临床合理选择。方法回顾性分析2012年-2016年临床微生物室7342份阳性尿液培养标本,运用WHONET5.6软件对历年尿液标本的药敏结果进行统计学分析,并对尿液标本中铜绿假单胞菌对临床常用抗菌药物阿米卡星、头孢他啶、环丙沙星、头孢哌酮舒巴坦、头孢吡肟、庆大霉素、亚胺培南、左氧氟沙星、美罗培南、妥布霉素以及哌拉西林的耐药率进行统计。结果2012年-2016年共7342株细菌,铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素的耐药率逐年下降(P<0.05),对环丙沙星的耐药率逐年上升(P<0.05)。结论尿路感染患者尿液中的铜绿假单胞菌对阿米卡星和庆大霉素耐药率下降,对环丙沙星耐药率上升。

人源Tim-1基因过表达载体的构建与鉴定

目的构建可在真核细胞中高效表达人Tim-1的真核表达质粒,并在人胚胎肾细胞293(HEK293)细胞株中鉴定其过表达效率,以便后续用于Tim-1免疫治疗的研究。方法获取健康人外周血,设计并合成人Tim-1基因引物,用Taq聚合酶扩增Tim-1基因,用Eco RI和Bam HI限制性内切酶切下人Tim-1基因,连接到Eco RI和Bam HI酶切的p LVX-IRES-Zs Green1载体中,构建Tim-1-p LVX-IRES-Zs Green1真核质粒。脂质体方法转染至HEK293细胞,q-PCR、免疫印迹法以及流式细胞仪法检测人Tim-1过表达效率。结果 Tim-1-p LVX-IRES-Zs Green1质粒通过脂质体转染至HEK293细胞后,q-PCR、免疫印迹及流式细胞仪法显示人Tim-1在HEK293细胞株中m RNA和蛋白以及绿色荧光蛋白都过度表达。结论成功构建了可在真核细胞中高效表达Tim-1基因的Tim-1-p LVXIRES-Zs Green1真核表达质粒,为进一步研究Tim-1的免疫功能治疗奠定了实验基础。