人血清中糖基磷脂酰肌醇－特异性磷脂酶D活性的测定

我们用含糖基磷酯酰肌醇疏水膜锚结构（ＧＰＩ－ａｎｃｈｏｒ）的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）作为底物，建立了稳定可靠的测定血清中ＧＰＩ专一的磷酯酶Ｄ（ＧＰＩ－ＰＬＤ）活性的条件，活性用ＡＬＰ由疏水性到亲水性的转化率（％）表示。经测定，健康人群的活性水平在转化率为２０～６０％之间者占９５％以上，低于２０％者仅占０．９％。在普查了多种疾病患者血清的酶活性的基础上，统计了几种疾病患者血清的酶活，其中肾衰、肠癌、肝癌、肝硬化以及甲型和乙型肝炎病人血清的酶活有所下降，活性低于２０％者较正常人高１５至４０倍，而急性肝炎恢复期的病人，酶活水平恢复正常。另外发现，高血脂患者的酶活性则明显高于对照值。造成血清中ＧＰＩ－ＰＬＤ活性水平改变的原因尚不清楚，但可能不是由单一器官功能不全所致。

糖基磷脂酰肌醇专一的磷脂酶D

糖基磷脂酰肌醇专一的磷脂酶Ｄ余明琨，龚隽（中国科学技术大学研究生院北京１０００３９）关键词糖基磷脂酰肌醇－磷脂酶Ｄ，糖基磷脂酰肌醇锚蛋白８０年代中期，Ｍ，Ｃ．Ｌｏｗ和Ｍ，Ａ．Ｄａｖｉｔｚ等阐明了蛋白质漂浮在双脂膜“海洋”上的一种独特形式。这种形式是蛋...

单链核糖体失活蛋白的核糖核酸酶活性

以芹菜４．５ＳＲＮＡ为底物，在ｐＨ５．０的条件下，５种纯核糖体失活蛋白：天花粉蛋白、苦瓜子蛋白、肥皂草蛋白、丝瓜素毒蛋白和多花白树毒蛋白均显示出核糖核酸酶活性，放射自显影图显示出它们对ＲＮＡ分子中的各种碱基具有不同的敏感性．

天花粉蛋白等五种核糖体失活蛋白的5′－AMP－磷酸酯酶活性

用ＨＰＬＣ和薄层层析等方法，分析了不同反应时间天花粉蛋白（ＴＣＳ）和５＇－ＡＭＰ的反应产物成分，结果显示在０．５ｈ内生成腺嘌呤核苷，随着反应时间的增加，同时有腺嘌呤核苷和腺嘌呤生成，４８ｈ后则反应产物主要是腺嘌呤，α－苦瓜子蛋白、肥皂草蛋白、丝瓜素毒蛋白和多花白树毒蛋白等单链核糖体失活蛋白也有类似结果，紫外差光谱研究结果也表明ＴＣＳ与５＇－ＡＭＰ相互作用显示出明显的时间过程，提示单链核糖体失活蛋白除了Ｎ－糖苷酶活性外，还具有５＇－ＡＭＰ磷酸酯酶活性．

影响血清中GPI-PLD活性检测的因素

采用在碱性条件下正丁醇抽提的人胎盘膜上的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）作底物， 检测血清中糖基磷脂酰肌醇－ 特异性的磷脂酶Ｄ （ＧＰＩ－ＰＬＤ） 的活性水平． 这种ＡＬＰ 含疏水的ＧＰＩ锚定膜结构（ａｎｃｈｏｒ）， 与血清保温后能被其中的ＧＰＩ－ＰＬＤ降解成亲水的不含ＧＰＩ－锚定的ＡＬＰ． 采用Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１１４ 二相分离法和梯度凝胶电泳法来分离含ＧＰＩ的ＡＬＰ和不含ＧＰＩ的ＡＬＰ， 计算出转化率（％ ）， 用来表示ＧＰＩ－ＰＬＤ酶活性． 对这两种方法进行比较后， 表明在一般实验室条件下， 二相分离法更为简便， 并对其影响因素进行了全面探讨．

小黑麦抗真菌蛋白组分的分离纯化和性质研究

以木霉为指示菌 ,小黑麦中饲 2 37种子中的蛋白提取物经过分离纯化后 ,得到了 3种主要的抗真菌蛋白组分 ,经酶活检测鉴定 ,分别是分子量为 30 .5kD的ClassⅡ型几丁质酶 ,两种分子量为 5 1kD和 2 3kD的 β 1,3 葡聚糖酶。其中几丁质酶的最适反应pH为 6 0 ,最适反应温度为 37℃ ,测定的N 末端氨基酸序列与大麦几丁质酶的有很高的同源性。在一定条件下 ,这 3种蛋白组分都有较强的抗木霉活性 ,并且有明显的协同作用 。

雷丸凝集素的纯化及理化性质的研究

雷丸（OmphalialapidescensSchroct．）经过Tris－HCl缓冲液浸提，硫酸铵分级沉淀，离子交换，卵粘蛋白－Sepharose4B亲和层析以及Sephacryl-S100分子筛等步骤，纯化得到纯度为95％以上的雷扎凝集素（简称OLL）。比活提高45.8倍，活力回收2.5％。雷丸凝集素是单一肽链的蛋白质，分子量为12kDa，等电点为7.5，可被半乳糖抑制。具有热稳定性及酸碱（pH1～12）稳定性。2mmol／L氯化锌可使其比活提高4倍。同兔血相比，与人血进行凝集反应，其比活可提高4倍。进行圆二光谱测定，α－螺旋和β-折叠含量较高。与半乳糖间的抑制反应瞬间内完成，且空间结构变得紧密。