竹节参提取物对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的:研究竹节参60%乙醇提取物对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:将40只昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、竹节参提取物高剂量组、竹节参提取物低剂量组、水飞蓟宾组;采用白酒灌胃的方式建立小鼠急性酒精性肝损伤模型。测定各组小鼠ALT、AST、TG含量水平,以及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)含量,光学显微镜观察小鼠肝脏病理变化,PCR技术检测SOD1和GPX1基因表达水平。结果:与正常组相比较,模型组小鼠肝脏出现明显脂肪变性,血清ALT、AST和TG的水平升高,肝脏SOD和GSH-Px活性明显降低,同时MDA含量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,竹节参提取物高、低剂量组和水飞蓟宾组均可降低ALT、AST和TG的含量;升高肝脏SOD和GSH-Px活性,同时降低MDA的含量;并且肝组织SOD1和GPX1基因的表达水平明显上调,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:竹节参提取物对小鼠急性酒精性肝损伤有明显的保护作用,其机制可能是通过上调SOD1和GPX1的基因表达,从而减轻酒精诱导的氧化应激对肝脏的损伤。

竹节参皂苷与多糖组合物对免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的研究竹节参皂苷与竹节参多糖组合物对免疫低下小鼠免疫功能的调节作用。方法取清洁级Balb/c小鼠,腹腔注射环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)制备免疫功能低下小鼠模型;摘取脾脏称重并计算脾指数,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群(CD4+T细胞、CD8+T细胞)比例、B细胞及NK细胞比例的变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-2和IFN-γ含量。结果竹节参皂苷与竹节参多糖组合物可提高免疫低下小鼠的脾脏指数,提升体内CD4+、B淋巴细胞及NK细胞比例,提高血清中IL-2、IFN-γ含量。结论竹节参皂苷与竹节参多糖组合物可增强免疫低下小鼠的免疫功能,且效果优于单独应用竹节参皂苷或竹节参多糖。

五子衍宗方对H22荷瘤小鼠环磷酰胺化疗的减毒作用

目的研究五子衍宗方对H22荷瘤小鼠环磷酰胺(环磷酰胺)化疗的减毒作用。方法建立H22荷瘤小鼠模型,实验小鼠接种H22后,随机分为4组,即荷瘤对照组、环磷酰胺组、环磷酰胺加五子衍宗方高剂量组(840mg/kg)、环磷酰胺加五子衍宗方低剂量组(420 mg/kg)。检测各组小鼠外周血红细胞、白细胞、血小板数量和骨髓有核细胞数量变化,观察各组荷瘤小鼠瘤质量的变化以及抑瘤率,流式细胞术分析小鼠脾脏中CD4+、CD8+、CD19+、CD69+CD4+绝对数量和CD4+/CD8+比例变化。结果环磷酰胺化疗小鼠出现红细胞、白细胞、血小板数量下降,脾脏淋巴细胞CD4+、CD8+、CD19+亚群绝对数量显著减少,并且CD69+CD4+绝对数量和CD4+/CD8+比例下降。与环磷酰胺单用组相比,五子衍宗方联合环磷酰胺组红细胞、白细胞、血小板数量明显恢复;小鼠瘤质量降低,抑瘤率升高;小鼠脾脏淋巴细胞CD4+、CD8+、CD19+亚群绝对数量显著增加,并且CD69+CD4+绝对数量和CD4+/CD8+比例明显上升。结论五子衍宗方可减轻环磷酰胺对H22荷瘤小鼠化疗的毒副作用,其机制可能与改善机体免疫功能有关。

宜昌地区结核分枝杆菌基因分型与成簇特征分析

目的描述宜昌地区结核分枝杆菌的基因分型及成簇特征,为宜昌地区的结核病防治提供依据。方法搜集宜昌地区2016年12月至2017年5月经基因芯片检测阳性的结核病患者痰标本,接种罗氏培养基进行培养后,得到的367株结核分枝杆菌临床分离株选择国际通用的24位点结核分枝杆菌散在分布重复单位及可变数目串联重复序列(MIRU-VNTR)进行分子分型,用Hunter-Gaston指数(HGI)和遗传差异值(h)对MIRU位点的分辨率和差异性进行评价;运用BioNumerics5.0软件对VNTR-MIRU结果进行成簇性分析,根据近期传播率公式计算其近期传播率;367株菌株分离来自367例患者,细分为初治患者321例、复治患者46例后分别进行成簇率统计,初复治患者的成簇率比较采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果367株结核分枝杆菌24位点VNTR-MIRU分型结果显示,其总的分辨率HGI值为0.999,其中遗传多样性最高的位点为QUB11b,其h值为0.79;遗传多样性最低的位点为MIRU24,其h值为0.03。分析时发现基因型呈明显的多态性,总共有324个基因型。成簇性分析发现,其中90株菌株形成39个簇,成簇率为24.52%(90/367),近期传播率为13.90%(51/367);复治患者菌株成簇率为21.74%(10/46),初治患者菌株成簇率为24.92%(80/321),两者成簇率比较,差异无统计学意义(χ2=0.220,P=0.639)。结论宜昌地区的结核分枝杆菌呈现出较高的遗传多样性,近期传播率较低,且成簇率与初复治无关,提示宜昌地区结核分枝杆菌以内燃复发为主,也存在小范围内的流行,在结核防控方面要加以重视。

宜昌市药物成瘾人群重点传染病血清学检测分析

目的调查宜昌市2001～2006年2331例药物成瘾人群的重点传染病感染情况,为制定有效防治策略提供依据。方法采集静脉血,检测相关病原体的抗原抗体。结果该市药物成瘾人群大多为20～39岁社会劳动力;近两年来发现HIV感染者比往年有所增多;抗-HCV阳性率为76.45%;HBsAg阳性率为12.31%;HCV+HBV混合感染的阳性率最高达8.41%;静脉方式吸毒者的抗-HIV阳性率高于口吸方式吸毒者。结论HIV感染已在该市药物成瘾人群中开始传播流行;HCV感染流行广泛并增长较快,已成为吸毒人群最易感的传染病,且易合并HBV感染;管理好药物成瘾者、控制其重点传染病的传播是需全社会高度关注的问题。

2006年宜昌市市售食品中食源性致病菌监测分析

目的:了解宜昌市市售食品中食源性致病菌污染状况。方法:对宜昌市几个主要的集贸市场和超市采集7大类10个食品品种进行6类食源性致病菌检测。结果:生禽肉和速冻面米食品(生制食品)中致病菌检出率分别60%和37.5%。6种食源性致病菌中只分离出了沙门菌、弯曲菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌。结论:生禽肉和速冻面米食品(生制食品)致病菌检出率较高,沙门菌、弯曲菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌仍然是食品中常见的污染菌。

HIV-1 gp160多表位嵌合基因的构建及表达蛋白的免疫原性分析

HIV感染引起的AIDS已经成为严重影响人类健康和社会发展的全球性疾病。酶联免疫吸附试验和免疫印迹检验组合则被认为是HIV检测的"金标准"。构建了gp160的抗原多表位融合基因及在原核系统的高表达,为HIV抗体测定提供特异、价廉的抗原。选定HIV-1gp160基因中3个片段包含较多抗原表位的区域,设计带有酶切位点的引物,用PCR的方法从HIV-1HXB2全基因扩增编码这3个片段的基因序列,通过质粒提取、酶切、测序方法鉴定基因片段的正确性,SDS-PAGE和Western blot测定融合蛋白的抗原特异性。构建的HIV-1gp160多表位嵌合基因的原核表达质粒,酶切和测序结果表明基因序列正确,基因全长969bp。在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达的重组蛋白分子量为37kDa,以包涵体的形式存在。应用Western blot测定10例正常人和12例HIV/AIDS病人血浆显示HIV-1gp160多表位融合蛋白具有良好的抗原特异性。成功构建了高表达HIV-1gp160多表位蛋白的原核表达系统,纯化的融合蛋白有较强的抗原特异性。

HIV-1 p15(Gag)基因的克隆、蛋白表达及抗体制备

目的为了研究HIV-1p15(Gag)的生物学活性,制备HIV-1p15(Gag)蛋白及其特异性抗体。方法用PCR的方法扩增编码p15(Gag)基因序列,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中表达HIV-1p15蛋白,分别用His抗体和HIV阳性血清做western blot鉴定目的蛋白。以纯化目的蛋白为抗原免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体。通过酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫细胞化学法检测抗体滴度及其特异性。结果原核表达载体pET28a(+)-p15(Gag)成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相对分子质量约20000的p15(Gag)蛋白经western blot鉴定正确。纯化蛋白免疫家兔,制备的多克隆抗体具有较强免疫特异性。结论得到纯化的HIV-1p15蛋白,制备的多克隆抗体能够检测自然状态下病毒蛋白p15(Gag),为进一步研究HIV-1奠定了实验基础。

2007-2010年湖北省宜昌市流感监测分析

目的探讨宜昌市流感活动状况及流行动态变化规律。方法建立流感监测点,定期采集流感样标本,用狗肾传代细胞(MDCK)细胞和鸡胚分离培养病毒,通过血凝抑制试验鉴定分离毒株。数据采用SPSS 13.0软件进行统计分析,率的比较采用χ2检验。结果 2007-2010年在554 137例门诊病例中监测到18 652例流感样病例,流感样病例就诊百分比平均为3.37%;从2 769份标本中分离到流感病毒163株,分离率5.89%。4年中流感优势株交替变化,2007年以乙型为主,2008年度以甲3型为主,2009年以甲3和甲型H1N1为主,而2010年则以甲3型为主。流感监测结果显示在夏季和冬季有2个流行峰。2007-2010年共报告流感暴发疫情23起,有82.61%发生在中小学校。结论2007-2010年宜昌市流感病毒活动强度与全国情况基本一致,2009年发生流感流行,4年不同型别毒株交替占优势的特征,尚未发现变异株及高致病株。

宜昌市2006年流感疫情动态监测

目的:调查宜昌市流感活动状况及流行动态变化规律和每年的流行株及其构成。方法:在哨点医院和流感爆发疫情事件中,采用流行病学监测和实验室检测方法进行调查。结果:宜昌市4月份与7月份为流感样病例人数高峰。两起流感爆发流行主要集中在中小学,全部由B型流感病毒引起。在调查和监测中分离的流感病毒以B型及H1型为主,宜昌市健康人群流感病毒的抗体阳性率为56%。结论:宜昌市流感高峰在4月份与7月份,流行的病毒株以B型及H1型为主,健康人群免疫水平不高。

HIV-1 Gag多表位嵌合基因的构建及表达蛋白的抗体制备

旨在通过构建Gag的抗原多表位融合基因及在原核系统的高表达,为HIV诊断及可能的疫苗制备提供试验基础。选定HIV-1 Gag基因中3个片段包含较多抗原表位的区域,设计带有酶切位点的引物,用PCR的方法从HIV-1HXB2全基因扩增编码这3个片段的基因序列,通过质粒提取、酶切、测序方法鉴定基因片段的正确性,SDS-PAGE和Western blotting测定融合蛋白的表达,并免疫动物制备相应抗体。结果显示,构建的HIV-1 Gag多表位嵌合基因的原核表达质粒,酶切和测序结果表明基因序列正确,基因全长576bp。在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达的重组蛋白分子量为27kD,以包涵体的形式存在。纯化目的蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体IgG。ELISA和免疫荧光方法检测显示制备的多克隆抗体能具有特异性反应。成功构建和高表达了HIV-1 Gag多表位融合蛋白,纯化蛋白制备的抗体与HIV-1Gag有特异性结合。为进一步研究HIV-1奠定了试验基础。

宜昌市旅店业客房卫生间脸盆、浴缸微生物污染情况调查

宜昌市旅店业客房卫生间脸盆、浴缸微生物污染情况调查曹玉鑫，魏顺和，徐英，刘中富，余枫华，司徒谊萍，郑凯为了解宜昌市旅店业客房卫生间脸盆、浴缸微生物污染情况，于１９９４年元月选择城区星级宾馆和非星级宾馆各２所，每所随机确定客房５间，于上午服务员做完清洁...