瑞芬太尼对胶质瘤U87细胞恶性侵袭、上皮-间质转化和血管新生的影响机制

目的探讨瑞芬太尼(RFTN)对胶质瘤U87细胞恶性侵袭、上皮-间质转化(EMT)和血管新生的影响机制。方法采用CCK8实验筛选RFTN对U87细胞的无毒性剂量,显微镜下观察其对U87细胞EMT的影响,分别采用Transwell小室实验、微管形成实验、蛋白免疫印迹法(Western blot)观察其对U87细胞侵袭、血管新生及相关蛋白[E钙黏素(E-cadherin)、N钙黏素(N-cadherin)及波形蛋白(vimentin)]的影响。将U87细胞分为对照组(Control组)、RFTN处理组、血管内皮生长因子(VEGF)组和VEGF+RFTN组,构建VEGF过表达U87细胞,观察各组细胞侵袭能力及相关蛋白的表达。结果与对照组比较,8~100 mg/mL RTFN处理组的细胞存活率明显降低(P<0.05),而0.01~4.00 mg/mL RTFN对细胞存活率无明显影响(P>0.05),确定实验剂量为1.00、2.00、4.00 mg/mL;与对照组比较,RTFN处理组细胞形态开始转变为椭圆状,细胞间隙缩小,细胞侵袭数、微管样结构数、N-cadherin、Vimentin及VEGF的表达下调,E-cadherin的表达上调(P<0.05);过表达VEGF后,细胞侵袭数、N-cadherin表达上调,E-cadherin表达下调,添加4.00 mg/mL RTFN可逆转VEGF的作用。结论RFTN可抑制胶质瘤U87细胞侵袭,阻碍EMT,减少血管新生,这可能与降低VEGF的表达有关。