EGCG通过外泌体AnnexinA5/6改善血管钙化

目的血管钙化是钙磷离子在血管壁的异常沉积,导致血管壁的顺应性降低,是心脑血管疾病发病率和死亡率的重要因素之一。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是茶多酚生物活性的主要成份。目前,EGCG是否能改善血管钙化的研究还很少。外泌体是参与细胞间信息传递的重要物质,作为外泌体上主要的钙离子依赖的磷脂结合蛋白。

流体剪切力调控平滑肌细胞释放EVs介导内膜钙化的力学生物学机制

目的内膜钙化常见于动脉粥样硬化AS晚期,是钙、磷等在内膜的异常沉积,AS时内皮损伤,平滑肌细胞SMCs受到的流体剪切力FSS显著提升,而FSS调控胞外囊泡EVs的释放,钙化EVs的聚集被认为是钙化启动环节。探究FSS调控SMCs自分泌EVs变化并介导内膜钙化的力学生物学机制。方法对SMCs分别加载生理条件组(8 h,0.05 Pa)、病理组(8 h,0.3 Pa)FSS,通过WB、qPCR等观察SMCs表型转化,即收缩型向合成型转化。

骨质疏松对成骨细胞释放基质囊泡的影响及其调控机制

目的骨质疏松是一种以骨量减少、骨密度降低为主要特征的疾病,常伴随着骨组织中力学微环境的改变。基质囊泡(matrix vesicles,MVs)是矿物质成核的关键场所,在骨形成过程中至关重要。探究骨质疏松对成骨细胞释放MVs的影响及膜联蛋白(annexinA5,AnxA5)在其中的作用。方法通过双侧去卵巢构建骨质疏松小鼠模型,提取原代成骨细胞;采用免疫组化检测骨组织中AnxA5的表达。

自噬参与调控流体剪切力诱导肝癌细胞发生上皮-间充质转化

目的流体剪切力(fluid shear stress,FSS)是肿瘤细胞所处的一种重要力学微环境,在肿瘤转移过程中至关重要。自噬与上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是调控肿瘤细胞迁移的重要机制,探索自噬在FSS诱导EMT中的作用及其对肝癌细胞迁移的影响。方法利用平行平板流动腔对HepG2和IQGY-7703两种肝癌细胞施加1。

内膜钙化中基质囊泡来源及其贡献程度研究

目的基质囊泡(matrix vesicles,MVs)在斑块处的大量聚集是血管钙化的启动环节。血管钙化中MVs主要来源于骨重构过程中成骨细胞释放的MVs(MC3T3-Vs)和成骨转化的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)释放的MVs(VSMCs-MVs)。探究内膜钙化中MVs来源及其贡献程度。

CTSK响应性纳米粒靶向治疗动脉粥样硬化

目的动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是心血管疾病死亡的主要原因。目前,AS的药物递送治疗面临巨大挑战,如特异性靶标递送,药物控释等。本文根据AS部位的特异性微环境设计能靶向AS并控制释放药物的纳米载体。方法通过共价结合合成CTSK酶响应性聚合物PLGA-peptide-PEG和AS靶向聚合物PLGA-PEG-c(RGDfC)。

血管内皮细胞代谢行为变化介导炎症发生的力学生物学机制

目的扰动流(disturbed flow)促进血管炎症并加速局部动脉粥样硬化斑块的形成;血管内皮细胞代谢行为的变化与血管炎症的发生发展息息相关。然而,扰动流调控血管内皮细胞代谢行为的力学生物机制尚不明确。探明扰动流调控血管内皮细胞代谢行为的力学生物学分子机制;并明确何种代谢产物可促进血管炎症及其作用机制;进一步,寻找治疗血管炎症的潜在药物。方法通过APOE^(-/-)小鼠左颈动脉部分结扎,构建体内扰动流模型。

YAP参与调控细胞上皮-间充质转化的研究进展

上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是上皮来源细胞在各种理化因素作用下经历表型转化获得间充质样细胞表型的过程.研究表明,有多种信号分子参与EMT的发生,并在胚胎发育、器官损伤修复和肿瘤的发生发展过程中起着关键作用.Yes相关蛋白(yes-associated protein,YAP)作为Hippo信号通路的下游效应分子,被广泛报道参与EMT的进程,调控多种基因的表达,起到调节细胞增殖、凋亡、器官发育和修复等作用.最新研究表明,YAP活性的变化直接介导肿瘤细胞的迁移和侵袭等能力的变化,而这些变化都伴随着EMT的发生.因此,YAP蛋白跟EMT的发生密切相关.本文就近年来关于YAP调控组织发育、器官纤维化及在肿瘤发生发展中的作用,以及相关分子机制的研究进行综述,并将阐明其与EMT之间的相互关系,以期为EMT的研究提供新的视角,进而为相关疾病的治疗提供新的分子靶点和诊断治疗策略.

胸主动脉夹层发病机制研究进展

胸主动脉夹层是一种高致死率(65%~85%)的心血管疾病。外科手术辅助植/介入支架是治疗胸主动脉夹层的主要方式,但手术治疗会引起严重的术后并发症,患者术后具有较高的死亡风险。由于其发病机制尚不清楚,故缺乏有效的药物治疗策略。近年来,随着单细胞测序等新技术的发展,初步证实血管平滑肌细胞的功能紊乱在胸主动脉夹层发生发展过程中起着特殊作用。目前,调控血管平滑肌细胞功能紊乱的分子机制已得到初步研究,相关成果可望为寻找潜在的药物治疗靶点提供新思路,有助于开发防治胸主动脉夹层的新策略。本文总结了血管平滑肌细胞功能失衡在胸主动脉夹层发生发展过程中的重要作用,详细介绍了调控血管平滑肌细胞功能紊乱的生物因素及相关分子机制,为明确血管平滑肌细胞功能紊乱在胸主动脉夹层发生发展过程中的核心地位以及寻找有效的药物分子靶标提供参考依据。

整合素介导低剪切力诱导的肝癌细胞迁移

低剪切力是肿瘤体内微环境的组成部分,是调控肿瘤细胞迁移、侵袭的重要因素。作为细胞膜表面受体,整合素(integrin)不仅介导细胞与细胞外基质之间的黏附,而且作为细胞的重要力学感受器起到整合细胞内的力学、化学信号的作用。本研究的目的是探讨低剪切力引起肝癌细胞整合素的变化及其对肝癌细胞迁移的影响。采用低剪切力(1.4dyn/cm2)作用于肝癌HepG2细胞,划痕法测定在0、1、2、4h细胞的迁移情况,F-actin染色观察低剪切力作用2h和4h后细胞骨架的变化,Western blot测定integrinα亚基在瞬时(15s和30s)、短时(5、15和30min)和长时(1、2和4h)的表达规律。结果表明:与对照组比较,低剪切力刺激HepG2细胞后,细胞迁移距离显著增加,应力纤维丝排列规则,integrinα亚基在不同的时间点的表达呈现出时序性的差异,提示integrin的不同亚基在剪切力诱导肝癌细胞迁移中具有不同的调控作用。

黏着斑激酶在Hep G2肝癌细胞黏附和迁移中的作用

黏着斑激酶(FAK)在细胞的黏附和迁移中起着关键的作用,它通过调节下游小G蛋白实现对细胞黏附和迁移的调控。本研究采用FAK抑制剂阻断FAK在Y397位点的磷酸化;细胞损伤模型测定不同浓度(0～250nmol/mL)FAK抑制剂在0、2、4、8、24h各时间点对Hep G2细胞迁移的影响;免疫荧光结合Western blot测定50nmol/mL的FAK抑制剂处理Hep G2细胞120min后,细胞骨架的变化及小G蛋白Rac1、RhoA和Cdc42表达的影响。结果表明,FAK抑制剂对肝癌细胞迁移的抑制作用呈浓度和时间依赖性,抑制Hep G2细胞FAK磷酸化120min后,细胞骨架发生明显改变,而对小G蛋白的表达在不同时间段的抑制作用呈现出不同的时间效应,抑制FAK磷酸化可以下调下游小G蛋白的表达,从而抑制肝癌细胞的黏附和迁移行为。以上结果揭示FAK抑制剂通过阻止FAK的磷酸化抑制肿瘤细胞的迁移。该研究结果提示FAK抑制剂可能会抑制肿瘤细胞从原发灶向转移灶的迁移,从而在恶性肿瘤的预防和治疗中具有潜在的应用价值。

三氧化二砷对肝癌细胞HepG2迁移、侵袭和凋亡的影响

本文旨在探究三氧化二砷(As2O3)对肝癌细胞HepG2作用的最佳浓度,以及此浓度As2O3对HepG2细胞迁移、侵袭和凋亡的影响。本研究采用CCK-8法检验0、1、2、4、8、16、32μmol/L As2O3处理后HepG2细胞活力,计算半抑制浓度(IC50),并且观察IC50浓度As2O3作用12、24、48 h后HepG2细胞形态变化。通过伤口愈合实验和Transwell侵袭实验验证As2O3对细胞迁移侵袭能力的影响。Western blot和qRT-PCR实验检测As2O3对细胞迁移、侵袭及凋亡相关蛋白和基因表达水平的影响。结果显示,与对照组相比,HepG2细胞活力随As2O3处理浓度的升高而降低,呈现剂量依懒性,其IC50为7.3μmol/L;8μmol/L As2O3处理24 h后,HepG2细胞发生明显凋亡,且其迁移和侵袭能力显著降低;此外,细胞中RhoA、Cdc42、Rac1、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平下调,抑凋亡基因Bcl-2的蛋白和mRNA表达水平显著下调,而促凋亡基因Bax、Caspase-3的蛋白和mRNA表达水平显著上调。以上结果说明一定浓度的As2O3能够抑制肝癌细胞迁移和侵袭,促进肝癌细胞凋亡。