高效液相色谱法测定臻源胶囊中金丝桃苷和五味子醇甲含量

目的 提升臻源胶囊质量标准,完善其质量控制水平。方法 利用高效液相色谱法(HPLC)测定臻源胶囊中金丝桃苷和五味子醇甲含量。结果 臻源胶囊中金丝桃苷和五味子醇甲平均含量分别为0.27 mg/g和0.34 mg/g,平均加样回收率标准偏差值(RSD)分别为1.63%和1.69%,方法学考察符合规定。结论 在臻源胶囊现有质量标准的基础上,增加了金丝桃苷和五味子醇甲作为含量测定指标,方法简便可行,结果准确,重现性好,为更好控制臻源胶囊产品质量以及探究功效物质基础提供科学依据。

臻源胶囊对免疫力低下脾虚证小鼠增强免疫力和健脾功效研究

目的 探究臻源胶囊增强免疫力作用及健脾中医功效,阐释健脾与免疫相关性。方法 小鼠随机分为正常组,模型组,无比山药丸组,臻源胶囊高、低剂量组,除正常组外其余各组第12~14天腹腔注射环磷酰胺进行造模,连续3 d。记录小鼠体质量,脾脏指数和胸腺指数,Elisa法检测IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-6、Ig G、Ig M、IL-10、TGF-β、IL-17、sIg A、VIP、MTL、GAS、SS及线粒体呼吸链复合物Ⅰ、IV含量,分光光度法测Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg2+-ATP酶活性,WB法检测T-bet、GATA-3蛋白表达水平。结果 与模型组比较,臻源胶囊各剂量组小鼠血清IL-2,IFN-γ含量升高,TNF-α含量降低,小肠IL-17、s Ig A、MTL和Gas含量升高,TGF-β及VIP、SS含量降低,肝脏线粒体呼吸链复合链I升高,脾脏T-bet和T-bet/GATA-3比值升高,GATA-3降低(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。臻源胶囊高剂量组小鼠体质量、脾脏指数和胸腺指数增加,血清中Ig M及肝脏线粒体呼吸链复合链IV含量及Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg2+-ATP酶活性增加,小肠IL-10含量降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001);臻源胶囊低剂量组血清IL-6水平升高(P<0.001)。结论 臻源胶囊可以通过调节细胞因子的分泌,调节T-bet/GATA-3和Th17/Treg的平衡增强机体的免疫功能,通过调节免疫,改善胃肠激素的分泌和能量代谢情况发挥健脾中医功效。

诺丽对氢化可的松致肾阳虚模型小鼠改善记忆的作用机制研究

目的:观察诺丽对氢化可的松致肾阳虚模型小鼠的影响,研究诺丽补肾改善记忆的功效,探讨其作用机制。方法:60只昆明小鼠随机分为对照组,模型组,人参组,诺丽高、中、低剂量组,每组10只,除对照组,其他组均灌胃氢化可的松建立肾阳虚模型,观察小鼠给药后记忆行为学变化,尼氏染色观察脑组织海马CA3区锥体细胞形态和尼氏体数量病理改变,ELISA检测小鼠脑组织神经递质、cAMP、cGMP及PKA含量变化。结果:与对照组相比,模型组跳台实验和避暗实验潜伏期明显缩短(P<0.01),错误次数明显增多(P<0.01),消退潜伏期明显缩短(P<0.01),消退错误次数明显增多(P<0.01),大脑海马CA3区尼氏体数量较少(P<0.01),脑组织神经递质5-HT、ACh、DA、NA表达降低(P<0.01),cAMP、PKA含量下降(P<0.01,P<0.05),cAMP/cGMP比值降低(P<0.05)。与模型组相比,人参和诺丽高、中剂量能明显延长小鼠跳台实验和避暗实验的潜伏期时间(P<0.01,P<0.05),降低错误次数(P<0.01,P<0.05),延长消退潜伏期时间(P<0.01,P<0.05),降低消退错误次数(P<0.01,P<0.05),增加大脑海马CA3区尼氏体数量(P<0.01),增加脑组织神经递质ACh、5-HT、DA、NA表达(P<0.01,P<0.05),升高cAMP、PKA含量(P<0.01),升高cAMP/cGMP比值(P<0.01)。结论:诺丽对氢化可的松致肾阳虚小鼠的记忆损伤有保护作用,其补肾改善记忆是通过调节cAMP/PKA信号通路蛋白,影响下游神经递质,促进神经元蛋白合成实现的。

利清通方对高尿酸血症大鼠的降血尿酸作用及对尿酸生成限速酶与尿酸转运体的影响

目的 建立高尿酸血症大鼠模型,研究利清通方的降血尿酸作用及其机制。方法将48只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、别嘌呤醇组、利清通低、中、高剂量组,采用氧嗪酸钾750 mg/(kg·d)灌胃建立高尿酸血症大鼠模型,以别嘌呤醇为阳性对照,观察利清通方对大鼠体质量的影响,利用比色法测定血尿酸(serum uric acid,SUA)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)、腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)含量,利用实时荧光PCR和蛋白免疫印迹法分别测定肾脏三磷酸腺苷结合转运蛋白2(ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2)、尿酸盐阴离子转运体1 (recombinant urate transporter 1,URAT1)和葡萄糖转运蛋白9(glucose transporter 9,GLUT9)的m RNA及蛋白表达。结果(1)与空白组比较,模型组体质量降低(P <0.05),SUA、XOD、ADA含量升高(P <0.05),URAT1、GLUT9的m RNA表达量升高(P <0.05),ABCG2蛋白表达量降低(P <0.05),URAT1蛋白表达量升高(P <0.05);(2)与模型组比较,利清通方中、高剂量组体质量升高(P <0.05),利清通方高剂量组SUA含量降低(P <0.05),利清通方低、中、高剂量组XOD含量降低(P <0.05),利清通方高剂量组ADA含量降低(P <0.05),利清通方低、中、高剂量组ABCG2 m RNA表达量升高(P <0.05),利清通方低、中、高剂量组URAT1、GLUT9的m RNA表达量降低(P <0.05),利清通方高剂量组ABCG2蛋白表达量升高(P <0.05),利清通方低、中、高剂量组URAT1蛋白表达量降低(P <0.05)。结论 连续30天灌胃750 mg/(kg·d)氧嗪酸钾可建立稳定的高尿酸血症大鼠模型。利清通方具有降血尿酸作用,其机制可能与抑制尿酸生成限速酶XOD、ADA活性抑制尿酸生成,上调肾尿酸转运体ABCG2蛋白表达,下调URAT1、GLUT9蛋白表达促进尿酸排泄有关。

新外来中药紫锥菊对虚寒、虚热证小鼠生物学效应的影响

目的 对新外来中药紫锥菊中药寒热药性进行实验验证。方法 将110只小鼠随机分成11组,即空白组、虚热模型组、虚热西洋参组、虚热紫锥菊低剂量组、虚热紫锥菊中剂量组、虚热紫锥菊高剂量组、虚寒模型组、虚寒人参组、虚寒紫锥菊低剂量组、虚寒紫锥菊中剂量组和虚寒紫锥菊高剂量组,每组10只。虚热组小鼠灌胃甲状腺片溶液160 mg/kg,虚寒组小鼠灌胃氢化可的松溶液25 mg/kg,每日1次,连续14天制备虚热及虚寒模型。检测各组小鼠血清中环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)、cAMP/cGMP、三碘甲状腺原氨酸(triiodothyronine,T3)、甲状腺素(thyroxine,T4)、总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)含量变化。结果 与虚热模型组相比,紫锥菊组小鼠整体状态有一定程度改善,体质量、胸腺及脾脏指数明显改善(P<0.05),cAMP、cAMP/cGMP及T3、T4含量显著降低(P<0.05),TP、ALB、TC、TG含量显著升高(P<0.05)。与虚寒模型组相比,紫锥菊组小鼠整体状态无明显改善,胸腺及脾脏指数、cAMP、cAMP/cGMP、TP、ALB、TG含量变化无统计学意义(P>0.05),且体质量、T3、T4含量显著降低(P<0.05)。结论 本研究证明紫锥菊寒凉的中药药性。

外来中药万寿菊花的中药药性再探索

万寿菊(Tagetes erecta L)为菊科万寿菊属植物,原产墨西哥和中美洲地区。目前,在我国有大规模种植,万寿菊花主要用于提取叶黄素,以其提取物与中药配伍开发的产品畅销全球。中药药性是指导中药合理应用的理论基础,其源于临床实践并在应用的过程中不断更新和完善。万寿菊属于外来中药,虽然已有药性和应用的记载,但当前在我国暂无药材标准,经分析发现对其中药药性的研究不完善,药性记载与目前应用不完全相符。本研究通过对外来中药万寿菊的国内外相关文献进行全面查阅,借鉴以“文献研究→理论探讨→药性验证→临床实践”为路径的新外来药物“中药化”的研究策略与范式,以临床应用为依据,实验研究为参考,通过对万寿菊相关文献进行分析,从传统中医药理论角度对外来中药万寿菊花的药性进行再探索,补充和更新完善万寿菊的中药药性,形成了较为完善的药性理论,以期为其合理推广应用和产品开发提供理论依据和指导。

除盐水站水资源循环利用改造项目

为进一步提高反渗透除盐水工艺装置水资源利用效率,对除盐水站排放水量及水质进行分析,结合生产实际情况,在不影响循环水水质的条件下,通过部分回收脱盐水站排放水用于循环水系统补水,显著降低了工业原水用量和外排污水量。改造后除盐水站排放水回收量基本稳定在30 t/h,工业水有效利用率达到了81.25%,外排污水量降低了50%,为节水减排作出巨大贡献。

国内外生物柴油发展现状和趋势

随着能源需求的增长以及环保形势的紧迫,包括生物柴油在内的新能源产业已受到国内外许多国家的关注。本文介绍了国内外生物柴油的发展、生产及市场消费现状,并对生物柴油生产工艺、原料、催化剂、副产品以及我国生物柴油的发展趋势进行了分析综述。

基于CREB/BDNF/TrkB信号通路研究玛咖醇提物改善肾虚衰老记忆减退作用机制

目的:基于CREB/BDNF/TrkB信号通路研究玛咖醇提物(MEE)改善肾虚衰老记忆减退的作用机制,阐释玛咖补肾益精中医功效内涵。方法:将60只雄性昆明种小鼠随机分为空白组,模型组(氢化可的松琥珀酸钠,25mg/kg),人参组(0.5g/kg),MEE低、高剂量组(0.3、0.6g/kg),造模与给药同时进行,共计14d。采用Morris水迷宫行为学方法观察小鼠记忆能力,ELISA法检测小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)水平以及神经递质5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)的含量,比色法检测氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量,免疫印迹法检测脑组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、酪氨酸激酶B受体(TrkB)的表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠到达平台所在象限潜伏期显著升高,且在测试时间内未到达平台所在象限,CRH、ACTH、CORT的含量显著降低,DA及SOD含量显著下降,MDA含量显著升高,CREB、BDNF蛋白表达显著减少(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各给药组到达平台所在象限潜伏期显著降低(P<0.01),ACTH、CORT含量显著升高,CREB、BDNF蛋白表达升高,MEE高剂量组5-HT、NE、DA及SOD含量显著升高,MEE低剂量组SOD含量显著升高,MDA含量降低(P<0.01,P<0.05)。结论:MEE具有“补肾益精”改善肾虚衰老记忆减退的作用,能够调节HPA轴激素紊乱,其改善记忆的作用机制与抗氧化应激、升高衰老脑内神经递质含量、调控CREB/BDNF/TrkB信号通路,进而提高神经元突触可塑性密切相关。

鹿鞭对肾阴虚及肾阳虚小鼠抗疲劳作用及PI3K-Akt通路机制研究

研究鹿鞭对肾阴虚及肾阳虚小鼠抗疲劳作用及机制。将健康雄性昆明小鼠88只适应性喂养1周后随机分为空白组、肾阴虚模型组、肾阴虚西洋参组、肾阴虚各给药组、肾阳虚模型组、肾阳虚人参组、肾阳虚各给药组,每组8只,合计11组。每日定时分别灌胃醋酸地塞米松、氢化可的松制备肾阴虚模型、肾阳虚模型,并给予相应药物,空白组给予空白溶剂,连续14 d。于第14天给药后30 min测定各组小鼠力竭游泳时间;于第15天摘眼球取血分离血清测定血清中乳酸(lactic acid,LD)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、环腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、环鸟苷酸(cyclic guanosine monophosphatec,cGMP)含量,剖取肝脏测定肝糖原含量、肝组织中磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)蛋白表达情况。与肾阳虚模型组相比,鹿鞭给药组体质量显著升高(P<0.05),阳虚症状有所改善,cGMP含量显著降低(P<0.01),cAMP/cGMP比值显著升高(P<0.01),力竭游泳时间显著增加(P<0.01),LD含量显著降低(P<0.01),BUN含量显著升高(P<0.01),肝糖原含量显著增加(P<0.01),肝脏PI3K、Akt蛋白表达明显增加(P<0.05)。与肾阴虚模型组相比,鹿鞭给药组体质量显著升高(P<0.01),阴虚症状有所改善,cGMP含量显著升高(P<0.01),cAMP/cGMP比值显著下降(P<0.01),力竭游泳时间显著增加(P<0.01),LD含量显著降低(P<0.01),BUN含量显著降低(P<0.01),肝糖原含量显著增加(P<0.01),肝脏PI3K蛋白表达显著增加(P<0.05),肝脏Akt蛋白表达显著增加(P<0.05)。综上,鹿鞭对阴虚及阳虚证均有一定调节作用,且可以通过影响PI3K-Akt通路增加糖原合成以起到抗疲劳作用。

湿热内蕴型高尿酸血症复合模型的建立及清利湿热方清利湿热降血尿酸的功效评价

目的:建立湿热内蕴型高尿酸血症复合模型,探讨清利湿热方降血尿酸作用及清利湿热功效。方法:采用灌胃氧嗪酸钾,并复合饮用蜂蜜水,隔天灌胃猪油脂或酒,建立湿热内蕴型高尿酸血症复合模型。采用全自动生化仪检测大鼠血清尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、血肌肝(Scr)水平,酶联免疫法检测血清中黄嘌呤氧化酶(XOD)、脱苷脱氨酶(ADA)、尿酸盐转运体(UAT)、有机阴离子转运体(OAT)含量及热休克蛋白70(HSP70)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)水平,以及血清胃泌素(GAS)、血浆胃动素(MTL)含量,免疫组化法检测结肠组织水通道蛋白3(AQP3)、水通道蛋白4(AQP4)表达量,Western Blot测定结肠组织中TLR4、NF-κBp65蛋白表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清UA、XOD、ADA、HSP70、TNF-α、IL-1β升高(P<0.01),OAT、GAS降低(P<0.05,P<0.01),结肠组织AQP4含量及TLR4、NF-κBp65蛋白表达量升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,清利湿热方低、中、高剂量组能降低UA水平(P<0.01,P<0.05)以及AQP4、HSP70含量(P<0.01,P<0.05),升高GAS水平(P<0.01);清利湿热方低剂量组降低ADA(P<0.05);清利湿热方中剂量组降低XOD、OAT、IL-1β(P<0.01,P<0.05);清利湿热方高剂量组降低Scr(第15天)、ADA、TNF-α、IL-1β(P<0.05,P<0.01)。结论:清利湿热方具有降血尿酸作用及清利湿热功效,为降血尿酸中药产品的中医功效评价研究提供了研究方法及策略,为中药产品的辨证应用、精准应用提供了实验依据。