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人脐带间充质干细胞缓解马兜铃酸诱导小鼠肾纤维化的作用及机制
1
作者
余熠杭
张德迎
+9 位作者
胡东
周宇
刘博
向涵
龙春兰
沈炼桔
刘星
林涛
何大维
魏光辉
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2019年第11期2101-2107,共7页
该实验探究了人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,hucMSC)缓解马兜铃酸(aristolochic acid,AA)诱导小鼠肾纤维化的作用及可能机制。我们将huc-MSC经尾静脉注射干预AA诱导的肾纤维化小鼠模型。HE、PAS和Mas...
该实验探究了人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,hucMSC)缓解马兜铃酸(aristolochic acid,AA)诱导小鼠肾纤维化的作用及可能机制。我们将huc-MSC经尾静脉注射干预AA诱导的肾纤维化小鼠模型。HE、PAS和Masson染色观察肾脏形态变化,Western blot和免疫组化检测上皮间质转化相关标志物E-cadherin、N-cadherin和TGF-β/Smad信号通路蛋白TGF-β1和p-Smad2/3表达水平。组织形态学染色结果显示,AA可诱导小鼠出现肾小管扩张、结构破坏,肾间质区胶原纤维沉积,呈纤维化改变;Western blot和免疫组化结果显示,其E-cadherin表达降低,N-cadherin、TGF-β1及p-Smad2/3表达增高。huc-MSC干预后,肾脏形态明显改善,胶原纤维沉积减少,E-cadherin表达增高,N-cadherin、TGF-β1及p-Smad2/3表达受到降低。研究结果表明,huc-MSC能够通过抑制TGF-β/Smad信号通路减轻肾脏上皮间质转化,从而缓解马兜铃酸诱导的小鼠肾纤维化。
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关键词
人脐带间充质干细胞
肾纤维化
马兜铃酸
上皮间质转化
TGF-Β/SMAD信号通路
原文传递
冻融联合灌注法优化大鼠肾脏脱细胞支架的制备
被引量:
3
2
作者
胡东
张德迎
+8 位作者
刘博
周宇
余熠杭
沈炼桔
龙春兰
刘星
林涛
何大维
魏光辉
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期307-318,共12页
本研究旨在探索优化肾脏脱细胞支架的制备方法,为肾脏组织工程及肾脏体外病理、毒理研究提供实验基础。取大鼠肾脏灌注PBS作为对照组(Control组),在不同流速下分别以十二烷基磺酸钠(Sodiumdodecyl sulfate,SDS)灌注(S组),Triton X-100联...
本研究旨在探索优化肾脏脱细胞支架的制备方法,为肾脏组织工程及肾脏体外病理、毒理研究提供实验基础。取大鼠肾脏灌注PBS作为对照组(Control组),在不同流速下分别以十二烷基磺酸钠(Sodiumdodecyl sulfate,SDS)灌注(S组),Triton X-100联合SDS灌注(TS组),反复冻融后Triton X-100联合SDS灌注(FTS组),制备肾脏脱细胞支架,并测定其流体分布及脉管阻力。HE染色、DAPI染色、DNA定量检测脱细胞支架脱细胞程度,Masson染色、PAS染色、免疫组织化学染色检测脱细胞支架主要成分的保留和结构的完整,扫描电镜检测支架的超微结构,MTT法检测支架的细胞毒性,ELISA检测支架中生长因子的含量。结果显示,FTS组脱细胞用时较S组、TS组少,10 mL/min组支架脉管阻力较低,S组、TS组、FTS组流体分布与Control组存在差异。HE染色和DAPI染色显示各组支架未见细胞成分残留,DNA含量<50 ng/mg。Masson染色和PAS染色可见细胞外网状胶原及多糖,免疫组织化学染色见Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅳ型胶原蛋白(Collagen Ⅳ)、纤维连接蛋白(Fibronectin)、层粘连蛋白(Laminin)表达。扫描电镜见支架呈蜂窝状结构。MTT法检测支架细胞毒性分级在0–1级之间。ELISA检测提示FTS组VEGF、EGF、IGF-1、PDGF含量明显高于S组和TS组。综上,联合冻融和灌注法能够制备更为理想且有效的大鼠肾脏整器官脱细胞支架,为肾脏组织工程及肾脏体外病理、毒理学研究奠定基础。
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关键词
组织工程
肾脏
脱细胞支架
冻融法
灌注法
原文传递
题名
人脐带间充质干细胞缓解马兜铃酸诱导小鼠肾纤维化的作用及机制
1
作者
余熠杭
张德迎
胡东
周宇
刘博
向涵
龙春兰
沈炼桔
刘星
林涛
何大维
魏光辉
机构
重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科
出处
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2019年第11期2101-2107,共7页
基金
国家自然科学基金(批准号:81800618)
重庆市留学人员回国创业创新支持计划(批准号:cx2017015)
重庆市中青年医学高端后备人才培养计划(批准号:渝卫办发〔2018〕230号)资助的课题.
文摘
该实验探究了人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,hucMSC)缓解马兜铃酸(aristolochic acid,AA)诱导小鼠肾纤维化的作用及可能机制。我们将huc-MSC经尾静脉注射干预AA诱导的肾纤维化小鼠模型。HE、PAS和Masson染色观察肾脏形态变化,Western blot和免疫组化检测上皮间质转化相关标志物E-cadherin、N-cadherin和TGF-β/Smad信号通路蛋白TGF-β1和p-Smad2/3表达水平。组织形态学染色结果显示,AA可诱导小鼠出现肾小管扩张、结构破坏,肾间质区胶原纤维沉积,呈纤维化改变;Western blot和免疫组化结果显示,其E-cadherin表达降低,N-cadherin、TGF-β1及p-Smad2/3表达增高。huc-MSC干预后,肾脏形态明显改善,胶原纤维沉积减少,E-cadherin表达增高,N-cadherin、TGF-β1及p-Smad2/3表达受到降低。研究结果表明,huc-MSC能够通过抑制TGF-β/Smad信号通路减轻肾脏上皮间质转化,从而缓解马兜铃酸诱导的小鼠肾纤维化。
关键词
人脐带间充质干细胞
肾纤维化
马兜铃酸
上皮间质转化
TGF-Β/SMAD信号通路
Keywords
human umbilical cord mesenchymal stem cell
renal fibrosis
aristolochic acid
epithelial to mesenchymal transition
TGF-β/Smad signaling pathways
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
原文传递
题名
冻融联合灌注法优化大鼠肾脏脱细胞支架的制备
被引量:
3
2
作者
胡东
张德迎
刘博
周宇
余熠杭
沈炼桔
龙春兰
刘星
林涛
何大维
魏光辉
机构
重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科儿童泌尿生殖发育与组织工程重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿科学重庆市重点实验室
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期307-318,共12页
基金
国家自然科学基金(Nos.81771566
81800618)
重庆市留学人员回国创业创新支持计划(No.cx2017015)资助~~
文摘
本研究旨在探索优化肾脏脱细胞支架的制备方法,为肾脏组织工程及肾脏体外病理、毒理研究提供实验基础。取大鼠肾脏灌注PBS作为对照组(Control组),在不同流速下分别以十二烷基磺酸钠(Sodiumdodecyl sulfate,SDS)灌注(S组),Triton X-100联合SDS灌注(TS组),反复冻融后Triton X-100联合SDS灌注(FTS组),制备肾脏脱细胞支架,并测定其流体分布及脉管阻力。HE染色、DAPI染色、DNA定量检测脱细胞支架脱细胞程度,Masson染色、PAS染色、免疫组织化学染色检测脱细胞支架主要成分的保留和结构的完整,扫描电镜检测支架的超微结构,MTT法检测支架的细胞毒性,ELISA检测支架中生长因子的含量。结果显示,FTS组脱细胞用时较S组、TS组少,10 mL/min组支架脉管阻力较低,S组、TS组、FTS组流体分布与Control组存在差异。HE染色和DAPI染色显示各组支架未见细胞成分残留,DNA含量<50 ng/mg。Masson染色和PAS染色可见细胞外网状胶原及多糖,免疫组织化学染色见Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅳ型胶原蛋白(Collagen Ⅳ)、纤维连接蛋白(Fibronectin)、层粘连蛋白(Laminin)表达。扫描电镜见支架呈蜂窝状结构。MTT法检测支架细胞毒性分级在0–1级之间。ELISA检测提示FTS组VEGF、EGF、IGF-1、PDGF含量明显高于S组和TS组。综上,联合冻融和灌注法能够制备更为理想且有效的大鼠肾脏整器官脱细胞支架,为肾脏组织工程及肾脏体外病理、毒理学研究奠定基础。
关键词
组织工程
肾脏
脱细胞支架
冻融法
灌注法
Keywords
tissue engineering
kidney
decellularized scaffolds
freeze-thawing
perfusion
分类号
R318.08 [医药卫生—生物医学工程]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人脐带间充质干细胞缓解马兜铃酸诱导小鼠肾纤维化的作用及机制
余熠杭
张德迎
胡东
周宇
刘博
向涵
龙春兰
沈炼桔
刘星
林涛
何大维
魏光辉
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2019
0
原文传递
2
冻融联合灌注法优化大鼠肾脏脱细胞支架的制备
胡东
张德迎
刘博
周宇
余熠杭
沈炼桔
龙春兰
刘星
林涛
何大维
魏光辉
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
3
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