槲皮素自氧化作用影响其超氧阴离子自由基清除能力的研究

通过比较槲皮素在不同介质中紫外吸收光谱变化,探讨槲皮素自氧化作用影响因素及可能机理,采用邻苯三酚自氧化法研究了槲皮素自氧化作用对其清除超氧阴离子自由基能力的影响。结果表明,在pH>8时,槲皮素醇溶液发生自氧化作用,且作用强度随着槲皮素浓度、pH和实验温度的增大而增强;金属离子Ca2+、Fe2+、Fe3+、Cu2+、Mg2+等对槲皮素自氧化作用有增强效应,使槲皮素清除超氧阴离子自由基能力减弱,甚至出现负抑制;Mn2+、Al3+、Zn2+等离子对槲皮素自氧化作用有抑制,其中,Mn2+、Zn2+可增强槲皮素清除超氧阴离子自由基能力,而Al3+则减弱其清除能力。

萝卜硫烷对乳腺癌细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响及作用机制研究

目的:研究萝卜硫烷(sulforaphane,SUL)对不同类型乳腺癌细胞增殖和细胞周期细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法、流式细胞术和Western印迹法,研究不同浓度受试物对F3Ⅱ、MCF-7、MDA-MB-231和ZR-75-1细胞增殖抑制、细胞周期阻滞、F3Ⅱ细胞凋亡和p34cdc2及Cdc25C表达的影响。结果:(1)SUL对所选的四个细胞系均有很强的增殖抑制作用,其中雌激素正响应型(ERP)细胞对SUL的敏感性明显强于雌激素负响应型(ERN)细胞和扩散性较强的F3Ⅱ细胞;(2)SUL对F3Ⅱ细胞和两种ERP细胞均呈现G2/M期阻滞作用,而对ERN细胞周期则无影响;(3)SUL阻滞F3Ⅱ细胞从G2期向M期转化的作用机制是提高Cdc2的磷酸化水平,降低Cdc25C磷酸化酶的表达,从而抑制细胞周期素B1-Cdc2复合物激酶的去磷酸化作用;(4)在实验条件下,SUL不引起F3Ⅱ细胞凋亡。结论:SUL对四个乳腺癌细胞系细胞增殖抑制活性和细胞周期影响存在明显的差异,不引起F3Ⅱ细胞凋亡。对F3Ⅱ细胞周期G2/M阻滞作用的机制是提高Cdc2的磷酸化水平,降低Cdc25C磷酸化酶的表达。

水飞蓟宾乳糖修饰对急性酒精性肝损伤保护作用的影响

目的通过比较水飞蓟宾经乳糖修饰前后的护肝效果,评价水飞蓟宾乳糖修饰对小鼠急性酒精肝损伤保护作用的影响。方法采用预防给药方式,灌胃给予50%乙醇建立急性酒精肝损伤模型,分别测定水飞蓟宾(Sil)、水飞蓟宾乙酰乳糖苷(Sil-LacAcO8)和水飞蓟宾乳糖苷(Sil-Lac)组小鼠血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性和甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)含量以及小鼠肝匀浆超氧化歧化酶(SOD)活性和甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)水平,油红O染色观察肝脏病理形态学变化。结果与模型组比较,水飞蓟宾、水飞蓟宾乙酰乳糖苷和水飞蓟宾乳糖苷组的肝脏病理损伤减轻,SOD活性显著升高(P<0.01),GSH水平明显升高(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。水飞蓟宾乙酰乳糖苷和水飞蓟宾乳糖苷组血清AST和ALT活性明显降低(P<0.01、p<0.05),肝匀浆MDA水平降低(P<0.01)。与水飞蓟宾组比较,水飞蓟宾乳糖苷组血清AST和ALT活性明显降低(P<0.01),血清TC明显降低(P<0.05);水飞蓟宾乙酰乳糖苷组血清AST活性明显降低(P<0.05),SOD活性明显升高(P<0.05)。结论水飞蓟宾经乳糖修饰后对小鼠急性乙醇所致肝损伤具有更好的保护作用。

川山紫薯色素提取分离及主要组成成分分析

本文研究了川山紫薯色素(purple-fleshed sweet potato anthocyanin, 简称PSA)乙醇提取最佳工艺条件,分析了紫薯色素主要组成成分。实验结果表明:乙醇提取PSA的最佳条件为:提取酸浓度2.0 %、提取时间为60min、提取固液比1:30。反相高效液相色谱法(RPHPLC)分析表明,PSA主要含矢车菊色素-3-葡萄糖,酰化酸为绿原酸和芥子酸。

离子液体萃取阿魏酸和咖啡酸的性能研究

以1-甲基-3-丁基咪唑六氟磷酸盐([C4mim][PF6])和1-甲基-3-己基咪唑六氟磷酸盐([C6mim][PF6])离子液体为萃取剂,采用紫外分光光度法研究了溶液pH值、温度、相比率及盐的种类和浓度对其萃取阿魏酸和咖啡酸效率的影响,考察了被萃取物的回收及离子液体的循环使用,探讨了两种离子液体替代传统有机溶剂阿魏酸和咖啡酸的可能性。实验结果表明:萃取温度和无机盐的种类及浓度对FA和CA萃取效率的影响较小;水相pH值对萃取效率有较大的影响,萃取FA适宜pH应小于3.67,萃取CA适宜pH应小于3.71;被萃取物浓度增大,萃取效率降低,而相体积比增大其萃取效率升高;两种离子液体对FA和CA的萃取效率[C4mim][PF6]大于[C6mim][PF6],同种离子液体对FA的萃取效率大于CA;在萃取相中的FA和CA可定量回收,且被萃取物中离子液体的残留[C6mim][PF6]小于[C4mim][PF6],离子液体可循环使用。

H点标准加入光度法同时测定膳食纤维中己糖和戊糖

基于苯酚—硫酸与糖的显色反应 ,提出了应用 H点标准加入法对己糖和戊糖进行同时测定的新方法。在最佳实验条件下 ,己糖和戊糖的测定线性范围分别为 0～ 12 .5 0 mg/ L和 0～ 10 .0 mg/ L。运用本法对合成样品和实际样品进行分析 。

染料木素铬(Ⅲ)配合物与DNA相互作用的研究

在pH7.2 Tris缓冲溶液中,采用紫外、DNA熔点、荧光、粘度等手段研究了染料木素铬(Ⅲ)配合物与小牛胸腺DNA(ctDNA)的作用机制,探讨了其作用模式。当加入一定量的ctDNA时,染料木素铬(Ⅲ)配合物的紫外吸收光谱的最大吸收峰产生明显的减色效应;而配合物体系的荧光强度、共振光散射信号随ctDNA的加入逐渐增强。配合物的存在能有效猝灭EB-DNA体系的荧光,且猝灭方式为静态猝灭。同时ctDNA的熔点和ctDNA溶液的粘度随配合物的加入而增大。据此推断,染料木素铬(Ⅲ)配合物与ctDNA之间具有较强的作用,配合物主要以插入方式与DNA结合,二者的键合常数为1.9×105L·mol-1。该研究结果提示染料木素铬(Ⅲ)配合物有望作为抗癌活性候选药物,值得进一步深入研究。

染料木素乙酰阿魏酸酯的合成

基于Schotten-Bamann反应原理,以阿魏酸和染料木素为起始原料,首次合成得到两种新化合物:染料木素-7-乙酰阿魏酸酯(即5-羟基-3-(4-羟苯基)-4-羰基-4H-苯并吡喃-7基3-(4-乙酰基-3-甲氧苯基)丙烯酸酯,1)和染料木素-7,4′-二-乙酰阿魏酸酯(即3-{4-[3-(4-乙酰氧基-3-甲氧苯基)丙烯酰氧基]苯基}-5-羟基-4-羰基-4H-苯并吡喃-7基3-(4-乙酰基-3-甲氧苯基)丙烯酸酯,2),对其进行了UV,IR,1H,13C NMR和MS结构表征。

槲皮素铬(Ⅲ)配合物合成及清除自由基活性研究

本文合成了槲皮素铬(Ⅲ)配合物,采用红外、紫外、热分析及元素分析等方法对其结构进行了表征,并研究了配合物清除羟基自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的活性。研究结果表明,配合物的分子式为[Cr(C15H9O7)2Cl·H2O]·7H2O,配合物较配体具有更强的清除羟基自由基、超氧自由基和DPPH自由基活性。

RP-HPLC法测定丰城鸡血藤提取物中大豆黄酮、染料木素、刺芒柄花素和美皂异黄酮

目的 研究RP—HPLC法分离丰城鸡血藤提取物的条件并建立其中4种异黄酮活性成分的测定方法。方法 以乙腈-0．1％磷酸为流动相．采用Spherisord ODS柱（250mm×4mm，5μm），梯度洗脱，体积流量0．8mL／min．检测波长260nm，研究流动相组成和梯度变化对丰城鸡血藤提取物分离效果的影响。结果 大豆黄素、染料木素、刺芒柄花素和美皂异黄酮的线性范围、相关系数和平均加样回收率分别为6．24～31．2μg／mL。r=0．9999、99．32％；10．00～130．0μg／mL、r=0．9997、102．20％；5．99～125.9μg／mL、r=0．9999、100．08％和6．96～34．8μg／mL，r=0．9993、99．52％。各组分的加样回收率RSD分别为1.79％、1.51％、1．51％和2．01％（n=5）。结论 该法可用于丰城鸡血藤提取物中成分的分离及其中4种异黄酬活性成分的测定。

染料木素7,4′-二-β-D-吡喃葡萄糖苷的合成

The synthesis of genistein 7,4′-di-O-βD-glucoside by phase transfer catalyzed method was investigated,and the structural charcterization of target compound was also conducted by IR,1H NMR,13C NMR and MS spectra.

丰城鸡血藤黄酮提取物清除自由基活性研究

本文考察了丰城鸡血藤不同提取物对.DPPH、O2-.和.OH清除活性,分别采用紫外可见分光光度法、邻苯三酚自氧化法和Fenton反应-邻菲罗啉显色法,测定受试物对.DPPH、O2-.和.OH的清除活性。实验结果表明受试物对.DPPH清除活性较强,对O2-.的清除活性次之,对.OH的清除活性较弱。丰城鸡血藤不同提取物黄酮组成和含量存在差异,其自由基清除活性也有所不同,提示它们的自由基清除作用机制和生物活性可能存在差异。

高效液相色谱-质谱法分析丰城鸡血藤中刺芒柄花素

采用高效液相色谱-质谱法分析丰城鸡血藤中刺芒柄花素。以乙腈—0.1%甲酸为流动相,流速0.8ml/min,经反相色谱柱SpherisordODS(250mm×4mm,5μm)梯度洗脱分离后进行质谱分析,采用正负电喷雾离子源同时进行信号采集。经HPLC/MS定性确证,丰城鸡血藤含有刺芒柄花素。方法的线性范围为6.0～126.0μg/ml,检出限(S/N=3)和定量下限(S/N=10)分别为0.8和2.7μg/ml,加标回收率为99.6%～104.3%。该方法简便、快速、灵敏度高,可用于丰城鸡血藤中刺芒柄花素分析测定。

速差动力学光度法同时测定葡萄糖和果糖的研究

利用葡萄糖和果糖在碱性条件下烯醇化反应速度不同，提出了速差动力学光度法同时测定葡萄糖和果糖的新方法。通过实验条件的选择，确定了葡萄糖和果糖与斐林试剂反应，与磷钼酸显色的动力学反应级数为零级；且反应表观速率常数分别为：０．１０８ｍｇ／Ｌ·ｍｉｎ，０．４２７ｍｇ／Ｌ·ｍｉｎ；测量浓度的线性范围均为：２～８ｍｇ／Ｌ；最低检测限为１．０×１０－９ｇ／Ｌ；对人工合成样品测定结果的相对标准偏差为１．２０％～３４１％；对实际样品测定结果的标准回收率为９５％～１０２％。

迷迭香提取物的抗乳腺癌活性研究

目的 : 研究天然香料迷迭香提取物 ( rosemary extract)及其主要抗氧化组分的抗乳腺癌活性。方法 : 采用常规的 MTT法 ,考察迷迭香提取物及其主要抗氧化组分鼠尾草酸( carnosic acid) ,鼠尾草酚 ( carnosol) ,rosmanol和迷迭香酸 ( rosmarinic acid)等对扩散型大鼠乳腺癌细胞 F3II和人乳腺癌细胞 MCF- 7增殖的抑制活性。结果 : ( 1 )鼠尾草酚和 rosmanol对乳腺癌细胞增殖抑制较强 ,鼠尾草酸和迷迭香提取物对乳腺癌细胞增殖抑制较弱 ,而迷迭香酸在该实验条件下基本上对增殖无抑制活性。 ( 2 )鼠尾草酚是一个选择性很高的乳腺癌细胞增殖抑制剂 ,其对乳腺癌细胞呈现较强的抑制活性 ,而对正常乳腺细胞增殖则基本上无抑制活性或抑制活性很低。结论 : 迷迭香主要抗氧化组份鼠尾草酚和 rosmanol对乳腺癌细胞增殖呈现较强的抑制活性 ,其中鼠尾草酚的抑制活性具有良好的选择性 ,是一个极有希望的乳腺癌增殖抑制剂 。

半枝莲、白花蛇舌草及其药对提取物抗氧化及清除自由基活性

采用几种化学及生物学模型考察了半枝莲、白花蛇舌草及其药对提取物抗氧化及清除自由基活性。研究结果表明三种提取物中,半枝莲提取物还原能力、清除DPPH及.OH自由基能力最强,药对提取物螯合Fe2+能力以及保护DNA免受自由基损伤能力最强。提示提取物抗氧化及清除自由基活性可能与其黄酮组成及含量相关。推测药对的抗癌作用机理可能与金属离子的螯合能力和对DNA损伤的保护作用等有关。

共轭亚油酸异构体的抗乳腺癌活性研究

目的 : 研究共轭亚油酸 (CLA)两种主要异构体 (9,1 1 - CLA和 1 0 ,1 2 - CLA)对两种人乳腺癌细胞 (MCF- 7,MDA- MB- 2 31 )和大鼠扩散乳腺癌细胞 (F3 )活性的异同。方法 : 采用MTT方法研究两种主要 CLA异构体在不同浓度、不同作用时间及不同给药方式下 ,抑制上述几种癌细胞增殖的能力。结果 : 1 0 ,1 2 - CLA对所有的试验癌细胞均呈现较强的抑制活性 ,而 9,1 1 -CLA仅对 MCF- 7呈现抑制活性 ,对 MDA- MB- 2 31和 F3 基本无活性 ;1 0 ,1 2 - CLA对 F3 的抑制活性与处理时间和给药方式密切相关 ,加药后不更换培养液处理 72 h可使其抑制能力达到最大值 ;细胞周期研究显示 1 0 ,1 2 - CLA对 MCF- 7呈微弱的 G0 / G1期抑制 ,而对 F3 细胞周期则无影响。结论 : CLA的两种主要异构体在该实验条件下对上述三种癌细胞增殖抑制能力和作用机制有着明显的差异 ,其中 1 0 ,1 2 - CLA活性明显强于 9,1 1 - CLA。 1 0 ,1 2 - CLA是通过其代谢物对 F3

金银花的高效液相色谱指纹图谱和聚类分析

采用Agilent TC-C18色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,在254 nm波长下对15批不同产地和不同品种的金银花进行测定,建立了金银花的高效液相色谱指纹图谱。采用程度相似度计算法结合聚类分析对15批金银花所共有的15个特征峰进行比较分析,从而对其质量和品质进行评价,判定结果与实际情况相吻合。通过实验方法学考察,表明该高效液相色谱指纹图谱法具有良好的精密度和重现性。该方法准确、可行,为金银花药材的质量控制提供实验依据。