C57BL/6小鼠关节软骨细胞的提取及凋亡模型的建立

目的体外培养C57BL/6小鼠关节软骨细胞,建立符合骨关节炎实验需求的凋亡模型。方法采用两步酶消化配合机械吹打法分离C57BL/6小鼠关节软骨细胞,倒置相差显微镜分别观察5代软骨细胞的形态及生长情况,甲苯胺蓝、Ⅱ型胶原免疫荧光染色鉴定软骨细胞,CCK-8法分别检测5代软骨细胞的活力情况,实时荧光定量(RT-PCR)法分别检测5代软骨细胞中Ⅱ型胶原mRNA的变化。在培养基中加入不同浓度(0,5,10,20μmol/L)的星形孢菌素及200μmol/L H_(2)O_(2)作用24 h,通过检测细胞凋亡率,选择合适的浓度,并利用AOEB法进一步验证10μmol/L星形孢菌素的促凋亡作用。结果体外培养的C57BL/6小鼠关节软骨细胞,第1代类圆形,第2代三角形,第3代三角形及短梭形,3代后软骨细胞主要呈长梭形且形态不规则,胞核增大,胞质边缘模糊化。经甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光染色证实为软骨细胞。与第1代软骨细胞相比,第4代和第5代软骨细胞的细胞活力显著降低(均P<0.05)。与第1代软骨细胞相比,第4代和第5代软骨细胞的Ⅱ型胶原mRNA相对表达量显著降低(均P<0.001)。与H_(2)O_(2)阳性对照相比,10μmol/L星形孢菌素作用软骨细胞24 h凋亡率为(63.97±1.67)%,差异无统计学意义。AOEB结果显示,与正常细胞相比,10μmol/L星形孢菌素作用软骨细胞后,凋亡早期细胞核质体呈绿色,细胞形状不规则;凋亡晚期细胞,核质体呈橙色,细胞核碎裂成点状,大小不一。结论本研究成功培养了C57BL/6小鼠关节软骨细胞,10μmol/L星形孢菌素作用3代内软骨细胞24 h建立凋亡模型最适宜。

ZIF-8在改造修饰方面的研究进展

沸石咪唑骨架材料(Zeolitic imidazolate framework-8,ZIF-8)是一种由锌离子(Zn^(2+))和2-甲基咪唑(2-MIM)配位形成的结构稳定生物安全性良好的多孔骨架材料,良好的自组装和在肿瘤部位酸敏感释药的性质使其在改善药物不良反应,靶向递送等方面具有巨大前景。目前ZIF-8的递送策略主要是利用各种合成修饰提高载药量、响应性、靶向能力等。本文主要介绍了近年来关于ZIF-8在改造修饰方面的研究进展,并对其未来进行合理展望。

“双万计划”背景下生物药剂学课程思政教学设计与实践

“双万计划”与课程思政是新时期为落实立德树人根本任务的重要举措,也是构建高水平人才培养体系的基础工程和关键环节。生物药剂学是一门研究药物体内过程的药学专业课程,蕴含丰富的课程思政资源。本文从专业建设和课程建设两个层面介绍生物药剂学课程思政的必要性、设计要点和效果分析方法,希望为生物药剂学及其他药学类课程思政教学改革提供借鉴和参考。

癌细胞膜伪装的纳米递药系统的初步构建与评价

目的制备肺癌细胞膜(lung cancer cell membrane,CM)包裹的仿生纳米靶向载体,并对其进行评价。方法通过一锅包封法将槲皮素(quercetin,QT)载入沸石咪唑骨架(zeolitic imidazolate framework-8,ZIF-8),得到纳米药物(zeolitic imidazolate framework-8@quercetin,ZIF-8@QT)。将A549细胞膜与二硬脂酰基乙醇胺(distearoyl phosphoethanolamine,DSPE)混合,并与ZIF-8@QT通过水浴超声法包裹到纳米药物上,完成仿生纳药物(lung cancer cell membrane-distearoyl phosphoethanolamine-zeolitic imidazolate framework-8@quercetin,CMD-ZIF-8@QT)的构建。对CMD-ZIF-8@QT的粒径、形貌、稳定性、封装效率、体外释药性进行评价,并进行体内分布与药效实验。结果表征实验结果显示CMD-ZIF-8@QT的平均粒径为(176.4±2.72)nm,形状为类球形。制剂学评价表明仿生纳米药物载药量为16.8%±0.64%,包封率为84.2%±1.42%,且具有良好的酸敏感性和稳定性。体内分布实验结果表明,与Cy5组相比,Cy5-CMD-ZIF-8组仿生纳米载体在体内富集到肿瘤部位(P<0.01)。体内药效实验结果表明,与QT相比,载QT的仿生载体在体内具有更突出的治疗效果(P<0.01)。结论本研究成功制备了一种仿生纳米药物,提高了药物对肿瘤的靶向性与治疗效果,降低了槲皮素的副作用,提高了用药安全性。

纳米载体药物的溶酶体逃逸机制及合成修饰研究进展

纳米载体药物需要穿过细胞膜,通过溶酶体逃逸,最终释放于细胞质才能发挥作用,其中溶酶体逃逸是纳米载体递送药物的关键步骤。具有溶酶体逃逸能力的纳米药物近年来越来越受到研究者们的关注,因此掌握溶酶体逃逸机制并对纳米载体药物进行修饰迫在眉睫。本文对溶酶体的逃逸机制及对纳米载体进行合成修饰两方面进行综述。