秋水仙碱在急性冠脉综合征中的有效性及安全性研究

目的探讨急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)早期及长期抗炎干预治疗的有效性和安全性,以及探索更小剂量秋水仙碱治疗下的有效性和安全性。方法选取2021年7月—2022年3月在广州市花都区人民医院心血管内科住院,并经冠状动脉造影检查确诊为冠心病急性冠脉综合征,同时超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)升高的患者310例,随机分配至秋水仙碱0.5 mg组(治疗1组,107例)、秋水仙碱0.25 mg组(治疗2组,108例)和空白对照组(对照3组,95例),根据各分组的基线数据具有可比性。入组后进行12个月的随访,比较三组受试者之间非计划再次血运重建、再发急性冠脉综合征、已复苏的心脏停搏、因心血管疾病死亡的复合终点事件的发生率,并评估受试者用药的安全性。结果进行中位时间为11.3个月的随访。随访结果显示,治疗1组复合心血管终点事件发生率低于对照3组,差异有统计学意义(P=0.039,风险比0.45;95%CI 0.21~0.96)。而治疗2组与对照3组对比,差异无统计学意义(P=0.102,风险比1.54;95%CI0.26~1.13)。三组受试者的安全事件发生率对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论小剂量秋水仙碱能减少ACS患者复合终点事件发生率,而更小剂量秋水仙碱对ACS患者的获益仍需进一步研究证实。小剂量及更小剂量秋水仙碱相对对照3组,安全性可接受。

转录因子IRF8抑制Th17细胞分化并减轻T细胞免疫介导的小鼠结肠炎

目的:转录因子干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)家族与Th17的发育密切相关,近年来发现Th17细胞在炎症性肠病的发病中发挥重要作用,本研究探讨IRF8对Th17发育及T细胞转染免疫介导的小鼠实验性肠炎的影响。方法:(1)采用流式细胞术分选野生型(WT)或IRF8全基因敲除(IRF8-/-)小鼠脾脏和淋巴结的naive CD4+T细胞(CD4+CD62L+CD44low),在Th1、Th2或Th17极化的条件下培养,采用流式细胞术检测Th1、Th2和Th17的比例。(2)建立实验性肠炎模型:采用免疫磁珠法分选WT或IRF8-/-小鼠中的脾脏和淋巴结中CD4+CD25+Treg,WT小鼠的CD4+CD45RBhiT细胞单独或者分别联合WT或IRF8-/-小鼠的CD4+CD25+Treg腹腔注射给RAG1-/-小鼠;WT或IRF8-/-小鼠的naive CD4+CD45RBhiT细胞腹腔注射给RAG1-/-小鼠;观察上述小鼠每周体重的变化,第5周时处死小鼠,进行结肠炎病理评分和肠系膜淋巴结T淋巴细胞亚群检测。结果:(1)IRF8-/-较WT的naive CD4+T细胞在极化条件下向Th17细胞分化更明显(P<0.01),而对Th1和Th2细胞的分化无影响(P>0.05)。(2)CD4+CD45RBhiT细胞转染给RAG1-/-小鼠,IRF8-/-较WT供体鼠引起的RAG1-/-小鼠体重显著降低(P<0.05),结肠炎评分显著增高(P<0.05),且肠系膜淋巴结中IL-17+CD4+细胞比例明显增高(P<0.01),而IFN-γ+CD4+和Foxp3+CD4+细胞比例无影响(P>0.05);IRF8-/-小鼠的CD4+CD25+Treg对WT小鼠CD4+CD45RBhiT细胞转染给RAG1-/-小鼠诱发的免疫介导的结肠炎显示出正常的免疫抑制作用。结论:转录因子IRF8基因敲除促进CD4+T细胞向Th17细胞分化,促进转染naive CD4+T细胞诱导的实验性结肠炎的发生,IRF8基因敲除小鼠Treg细胞免疫抑制功能正常。

IL-17调控DLBCL小鼠VEGF表达对肿瘤生长的作用

目的:建立弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)小鼠模型并接种体外培养的Th17细胞,对比接种组与对照组IL-17及VEGF表达水平的变化,分析IL-17水平与VEGF表达的相关性及其与肿瘤发生发展的关系。方法:Mini MACS免疫磁珠分离系统分离纯化BALB/c小鼠脾来源的CD4+CD62L+nave T细胞,加入antiCD3、anti-CD28、TGF-β、IL-6进行Th17细胞体外培养,SUDHL-4细胞进行传代培养后接种于SCID小鼠建立DLBCL小鼠模型,对荷瘤小鼠进行Th17细胞接种,ELISA法检测DLBCL小鼠肿瘤组织中IL-17及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:接种Th17细胞后DLBCL小鼠IL-17表达水平较对照组升高,VEGF表达水平较对照组降低;随着肿瘤病程进展IL-17表达水平降低,VEGF表达水平升高。IL-17与VEGF之间存在显著负相关。结论:IL-17可下调VEGF的表达从而影响DLBCL的疾病进程,联合检测IL-17和VEGF表达水平对判断DLBCL疾病状态及进程更有参考价值。

盘龙七片对膝骨性关节炎患者疗效与外周血Th17细胞及相关细胞因子的关系

目的探讨膝骨性关节炎患者不同中医证型患者外周血Th17细胞和相关的细胞因子(IL-17、IL-1β和IL-6)的水平与盘龙七片疗效的关系。方法选取淤血阻滞、阳虚寒凝、肾虚髓空三种中医证型患者各25、24和26例,正常对照组24例,患者采用盘龙七片治疗,每日3次,每次3片,治疗前和治疗6周后,留取正常对照组和患者外周血,采用流式细胞术和ELIS法检测Th17细胞和血清细胞因子IL-17、IL-1β和IL-6浓度,并进行疗效评估。结果肾虚髓空、阳虚寒凝、瘀血阻滞三种中医证型患者Th17细胞比例和细胞因子浓度均高于正常对照组,且呈现逐渐增高的趋势,差异有统计学意义(P<0.05);三种中医证型有效治疗者,Th17细胞比例和细胞因子浓度显著降低,差异有统计学有统计学意义(P<0.05);三种中医证型患者疗效呈现增高的趋势,肾虚髓空型高于另外两种证型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论膝骨性关节炎患者外周血Th17细胞比例和细胞因子IL-17、IL-1和IL-6浓度与盘龙七片的疗效有关,可作为中医证型和预后的参考指标。

成功救治大剂量维格列汀和二甲双胍致顽固性休克1例并文献复习

目的:探讨服用大剂量维格列汀和二甲双胍致顽固性休克诊断与治疗。方法:回顾分析1例服用大剂量维格列汀和二甲双胍患者的临床资料,并结合相关文献进行讨论。结果:大剂量服用维格列汀和二甲双胍导致顽固性休克、乳酸酸中毒、胰腺损伤,予有创血流动力学监测、CRRT、血管活性药物综合治疗,患者好转出院。结论:大剂量服用维格列汀和二甲双胍,尽早有创血流动力学监测、液体复苏、CRRT治疗,期待获得更好的临床预后。

重组人粒细胞集落刺激因子调节IL-27和IRF8表达诱导供受者免疫耐受机制的初步研究

目的 rhG-CSF既是造血干细胞动员剂,也是免疫耐受诱导剂,可减轻移植物抗宿主病(GVHD);干扰素调节因子8(IRF8)拮抗小鼠RORγt的作用,可以抑制小鼠初始T细胞向Th17细胞分化;本文旨在研究rhG-CSF动员对IRF8基因表达及蛋白水平、外周血Th17和Treg细胞的比例和Th17分化的负性调控因子IL-27的调节作用。方法 采集10名造血干细胞移植供者rhG-CSF动员前后(第5天)外周血,通过免疫磁珠法分离CD4+T细胞,qRT-PCR及Western blotting检测CD4+T细胞IRF8基因及蛋白水平,流式细胞术检测Th17(CD3+CD8-IL-17+)和Treg细胞(CD4+CD25+Foxp3+)比例,ELISA法检测血清中IL-17及IL-27的浓度。结果 动员前、后外周血外周血单个核中细胞的比例(%):Th17细胞(2.597±1.993)%比(0.355±0.129)%(P<0.01)),Treg细胞(0.468±0.522)%比(1.491±1.216)%(P<0.01);动员前、后IL-17A(pg/ml):(21.75±18.77)pg/ml比(15.53±10.89)pg/ml(P<0.01);动员前、后IL-27(pg/ml):(5 180.06±1 860.75)pg/ml比(3 806.56±1 658.89)pg/ml(P<0.01)。IRF8基因表达在动员后基因表达相对增加1.69倍,IRF8蛋白在动员后比动员前表达显著增加。结论 rhG-CSF抑制供者外周血Th17细胞、促进Treg细胞群分化,诱导免疫耐受,可能与rhG-CSF促进CD4+T细胞中IRF8、IL-27和IRF8负性调控Th17细胞分化有关。

花样游泳的组合练习

花样游泳组合是由一系列的花样动作、游泳动作、划水、打腿、混合动作等专门的技巧组合而成的。在音乐的伴奏下而表现出令人愉悦的风格。运动员为了通过等级测验的目的,应该在教练的指导下编排自己的组合,这样做的目的是帮助她们掌握一些基本的自选动作编排和游动路线结构,这里不必牵涉到她们对音乐的理解以及与音乐的协调。

allo—HSCT后外周血TH17细胞／Treg细胞的平衡与aGVHD的相关性

目的探讨异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后受者外周血Tnl7细胞／辅助性T淋巴细胞（Treg细胞）平衡与急性移植物抗宿主病（aGVHD）的相关性，以及抗胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）对外周血Treg细胞的影响。方法78例接受含或不含ATG预处理的allo-HSCT受者，10例健康志愿者作为对照组。应用流式细胞术检测外周血rrHl7细胞百分比、Treg细胞百分比及T淋巴细胞亚群绝对值，并采用酶联免疫吸附法检测血清THl7细胞相关细胞因子白细胞介素（IL）-17、IL-21、IL-22、IL-23、7干扰素（IFN-7）及转化生长因子81（TGF-β）的水平。结果无aGVHD组和对照组间Treg细胞百分比、THl7细胞百分比及TH17细胞／Treg细胞比值的差异均无统计学意义（P〉0．05）。与对照组和无aGVHD组相比，1～2度aGVHD受者的Treg细胞百分比显著下降，THl7细胞百分比显著增高，THl7细胞／Treg细胞比值显著上升，差异均有统计学意义（P〈0．叭）；随着aGVHD加重，3～4度aGVHD受者的上述差异更为显著（P〈0．01）。aGVHD组IL-17、IL-23、IL-21、IFN-y浓度均高于对照组（P〈0．01）和无aGVHD组（P〈0．05）。aGVHD组较对照组和无aGVHD组血清TGF-~I水平明显下降（P〈0．01）；而aGVHD组与对照组和无aGVHD组间IL-22浓度的差异均无统计学意义（尸〉0．05）。使用ATG者外周血淋巴细胞总数显著低于对照组（P〈0．01）。使用ATG者THl细胞、THl7细胞、CD3’CD4’细胞和非THl／17细胞绝对值显著低于未使用ATG者（P=0．0000），而二者间淋巴细胞总数、CD3’CD4-细胞、TH1／17细胞绝对值的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论allo-HSCT后TH17细胞／Treg细胞平衡及相关细胞因子与aGVHD的发生密切相关，ATG影响早期Tnl7细胞和Tnl细胞的重建。

Th17细胞过继免疫对DLBCL小鼠CXCL6／CCL2表达的影响及其意义分析

目的建立弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B lymphoma,DLBCL)小鼠模型,在肿瘤发生发展阶段中给予Th17细胞过继免疫治疗,检测肿瘤组织中趋化因子CXCL6/CCL2的表达,了解Th17细胞对DLBCL肿瘤微环境中CXCL6/CCL2表达的影响,及其与DLBCL发生发展的相关性。方法人生发中心B细胞(germinal center B cell,GCB)样DLBCL细胞株SUDHL-4进行传代培养后接种10只SCID小鼠建立DLBCL小鼠模型,观察小鼠肿瘤发生发展过程并得出DLBCL小鼠肿瘤中位发病时间T1及小鼠中位生存时间T2。体外培养Th17细胞,在接种肿瘤细胞株时予30只DLBCL小鼠注射Th17细胞行过继免疫,并分别于T0(接种Th17细胞后)、T1和T2这3个时间点处死小鼠,获得A0、A1和A2组,每组10只小鼠。实时定量PCR法检测DLBCL小鼠肿瘤组织CXCL6/CCL2表达,与同一时间点15只小鼠的生理盐水对照组(B0、B1和B2组,每组5只)进行对比,并对比T0、T1和T2这3个时间点各组CXCL6/CCL2的表达。结果 A0组、A1组和A2组CXCL6mRNA表达量分别为0.115±0.021、0.657±0.142和0.935±0.322,差异有统计学意义,F=7.013,P=0.025。B0组、B1组和B2组CXCL6mRNA表达量分别为0.175±0.024、0.321±0.011和0.631±0.027,差异有统计学意义,F=6.007,P=0.008。A0组CXCL6mRNA表达量与B0组对比差异无统计学意义,t=2.03,P=1.25;A1组明显高于B1组,t=6.43,P<0.01;而A2组也明显高于B2组,t=6.35,P<0.01。A0组、A1组和A2组CCL2mRNA表达量分别为0.133±0.015、0.654±0.534和0.928±0.322,差异有统计学意义,F=7.021,P=0.023。B0组、B1组和B2组CCL2mRNA表达量分别为0.124±0.013、0.327±0.025和0.628±0.322,差异有统计学意义,F=6.005,P=0.007。A0组CCL2mRNA表达量与B0组对比差异无统计学意义,t=1.98,P=1.75;A1组明显高于B1组,t=6.13,P<0.01;A2组也明显高于B2组,t=7.59,P<0.01。结论随着DLBCL肿瘤进程,CXCL6和CCL2的表达上升,CXCL6和CCL2可能是影响DLBCL肿瘤发生发展的因子,而Th17过继免疫治疗可以上调DLBCL肿瘤组织CXCL6和CCL2的表达,可能会对DLBCL肿瘤的发生发展产生影响。

白细胞介素17调节弥漫大B细胞淋巴瘤小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ的表达及其与肿瘤进展关系的研究

目的 通过体外培养的Th17细胞过继免疫治疗弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）小鼠,分析白细胞介素17（IL-17）水平与主要组织相容性复合体Ⅱ（MHCⅡ）表达的相关性及其与肿瘤发生发展的关系.方法 免疫磁珠法分离纯化BALB/c小鼠脾来源的CD4＋CD62L＋T细胞,加入抗CD3抗体、抗CD28抗体、转化生长因子β（TGF-β）、IL-6体外培养Th17细胞,人生发中心B细胞样（GCB）DLBCL细胞株SUDHL-4传代培养后接种到严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠,建立DLBCL小鼠模型.将荷瘤小鼠分为Th17细胞实验组（30只）和对照组（20只）,实验组荷瘤小鼠接种Th17细胞,对照组注射0.9％NaCl溶液.分别于预实验得到的小鼠肿瘤中位发病时间和小鼠中位生存时间处死半数小鼠.酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠肿瘤组织IL-17表达,免疫组织化学法检测MHCⅡ的表达.结果 DLBCL小鼠肿瘤中位发病时间为8d,中位生存期为28d.Th17细胞接种后IL-17表达水平[（11.93±0.56）pg/ml]较对照组[（9.82±0.26）pg/ml]升高（P＜ 0.000 1）,随着肿瘤病程进展,IL-17表达水平降低[（9.53±0.18）pg/ml]（P＜ 0.000 1）;Th17细胞接种后MHCⅡ阳性细胞比例[（69.13±0.36）％]较对照组[（42.59±0.12）％]升高（P＜ 0.000 1）,随着肿瘤病程进展,MHCⅡ阳性细胞比例降低[（54.63±0.45）％]（P＜ 0.000 1）.IL-17与MHCⅡ之间存在正相关性（r=0.89,P=0.000）.结论 IL-17可上调DLBCL小鼠肿瘤组织MHCⅡ表达,且随着肿瘤病程进展,MHCⅡ表达下降.MHCⅡ表达水平可作为DLBCL疾病状态的判断指标,而其正向调控因子IL-17表达水平的上调会影响DLBCL的疾病进程,联合检测IL-17和MHCⅡ表达水平对判断DLBCL疾病状态及进程可能更有参考价值.