灵芝酸G诱导Vβ3^+CD8^+T细胞抗肿瘤活性的研究

为探讨SEA(Staphylococcus Enterotoxin A,SEA)存在下的灵芝酸G(Licochalcone-G,LG)对小鼠CD8+细胞活化及杀伤肿瘤细胞的作用,采用流式细胞技术分别检测CD8+细胞表面分子表达及活化后细胞内的颗粒酶B(Granzyme B,Gr B)和穿孔素(Perforin,Pf)的水平、Caspase-3酶的活性分析肿瘤细胞凋亡。结果为:SEA组和SEA+LG组经过3 d刺激能激活小鼠CD8+细胞Vβ3和Vβ11分别为7.4±0.45,11.5±0.72。体外实验显示,SEA组和SEA+LG组的Vβ3+CD8+T细胞内Gr B%的水平分别为70.2±8.04,91.6±8.16;Pf%的水平分别为67.3±6.86,86.4±7.17,与对照组相比有显著性差异(t=5.24,t=6.43;t=4.31,t=5.47,P<0.01);SEA组和SEA+LG组的HL-60肿瘤细胞内Caspase-3酶的活性分别为37.6±4.81,68.8±6.82,与对照组相比有显著性差异(t=3.18,t=5.27,P<0.01);SEA组和SEA+LG组的A20肿瘤细胞内Caspase-3酶的活性分别为23.7±3.58,54.1±5.71,与对照组相比有显著性差异(t=4.23,t=4.88,P<0.01)。SEA依赖的LG能促使小鼠CD8+T细胞Vβ3和Vβ11分子活化,活化的Vβ3+CD8+T细胞内分泌大量的Gr B和Pf,并通过Caspase-3的信号途径诱导肿瘤细胞凋亡。

教学实验用阿米巴原虫培养方法的筛选与评价

为满足医学寄生虫课原虫教学实验所需,筛选来源于自然界的阿米巴原虫进行培养,以便找到更有效、便捷、经济且能满足临床教学所需阿米巴原虫的培养方法。采用1640细胞培养液、洛氏培养液、青菜水培养液培养来源于自然界的阿米巴原虫,观察其生长状态,分别比对阿米巴原虫到达包囊期和滋养体期所需的培养时间及不同时间复苏时的成活率。结果为:青菜水培养液方法对自然界的阿米巴原虫培养效果最佳,青菜水和1640培养液到达包囊阶段时间分别为(16±0.35)h、(18±0.50)h,与洛氏培养液到达包囊时间(22±1.2)h相比均有显著性差别(P<0.05);青菜水和1640培养液到达滋养体的时间分别为(22±2.24)h、(26±3.45)h,与洛氏培养液到达滋养体时间(30±2.5)h相比均有显著性差别(P<0.01);青菜水培养液和1640培养液6个月后再次复苏成活率分别为88%、78%,与洛氏培养液的62%相比均有显著性差别(P<0.01)。青菜水培养液法可作为自然界的阿米巴原虫培养的首选方法,培养原虫时间较短、复苏成活率高,且经济安全,培养的原虫可作为人体寄生虫学实践教学用样本的替代品。

氧化石墨烯衍生物对L6细胞活性的影响

目的研究氧化石墨烯(GO)衍生物对L6细胞活性的影响。方法原代的L6细胞经过1 d或3 d培养,倒置荧光显微镜观察细胞形态并采取电子图片保存;收集对数期成熟的L6细胞,MTT法测定细胞增殖活性;对数期成熟的L6细胞,经GO衍生物3 d的刺激培养,收集细胞培养上清液,采用ELISA方法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)。结果原代L6经过3 d培养,80%以上细胞分化为成熟的L6细胞;0.3μg/m L GO衍生物(GO-L和GO-D)经过3 d刺激,GO-L刺激细胞增殖的OD值为(0.52±0.28),GO-D刺激细胞增殖的OD值为(0.81±0.34),两者与对照细胞OD值(0.18±0.06)比较差异有显著统计学意义(F=6.05,P<0.01);其中D型衍生物对L6细胞增殖活性强于L型衍生物,两者之间比较差异有统计学意义(F=4.54,P<0.05);L型衍生物和D型衍生物均能诱导L6细胞分泌TNF-α[(18.6±5.36)vs(24.9±8.86)]和少量IFN-γ[(14.3±3.78)vs(13.8±2.62)]。但IFN-γ分泌两者差异无统计学意义(F=0.82,P>0.05)。结论 GO衍生物能诱导L6细胞活化和分泌TNF-α,可能会影响L6细胞中糖的代谢与调节。