RNPS1通过Notch信号通路参与调控胰腺癌细胞的生存及进展

目的:探讨富含丝氨酸结构域1的RNA结合蛋白(RNA-binding protein with serine-rich domain 1,RNPS1)在胰腺癌进展中的作用及可能分子机制。方法:免疫组织化学与免疫荧光检测RNPS1与Notch3在胰腺癌组织及癌旁组织的表达;RTq PCR、免疫荧光检测RNPS1与Notch3在胰腺癌细胞中的表达情况;Hoechst与CCK-8实验检测胰腺癌细胞凋亡与增殖;划痕实验与transwell实验检测胰腺癌细胞迁移与侵袭能力;Western blot实验检测胰腺癌细胞中N-Cadherin和E-Cadherin的表达;Western blot与RT-q PCR实验检测胰腺癌细胞中Notch3与HEY1的表达。结果:与癌旁组织与正常细胞系相比较,RNPS1与Notch3在胰腺癌组织中及胰腺癌细胞的表达均增高(F=121.612、34.649,均P<0.05);与对照组相比较,敲低RNPS1抑制生物标志物N-Cadherin的表达(t=39.922,P<0.05),促进E-Cadherin的表达(t=8.281,P<0.05),敲低RNPS1可减弱癌细胞的生存、迁移侵袭的能力(t=2.017、4.874、19.747,均P<0.05,),促进了细胞凋亡(t=33.673,P<0.05);敲低RNPS1降低了癌细胞中Notch3与HEY1的表达(t=17.546、6.258,均P<0.05)。结论:RNPS1的表达与胰腺癌细胞生存、恶性表型有关,RNPS1可能通过调控Notch3/HEY1信号通路促进胰腺癌细胞的生存及肿瘤进展。

添加次黄嘌呤对环磷酸腺苷发酵产苷的影响

研究了由次黄嘌呤发酵制造cAMP时发酵培养基中次黄嘌呤质量浓度及次黄嘌呤添加方式对cAMP发酵产苷的影响.结果表明:发酵培养基中次黄嘌呤采用一次性添加和分两批添加,经过发酵培养,次黄嘌呤质量浓度在0.018 g/L时cAMP产苷最高达6.86 g/L,在此条件下,次黄嘌呤分量两次添加cAMP发酵产苷最高可达7.23 g/L.过量的次黄嘌呤对菌种生长有抑制作用,发酵培养基中次黄嘌呤只有在最适的质量浓度下才能有效地提高cAMP发酵产苷水平,且采用次黄嘌呤分批添加更有利于cAMP发酵产苷.

Kv1.3钾离子通道阻断剂抑制NLRP3炎症小体活化的研究

NLRP3炎症小体在炎症反应中发挥重要作用.为了探讨Kv1.3钾离子通道阻断剂对NLRP3炎症小体活化的抑制作用.通过体外培养THP-1细胞,佛波酯诱导其分化为巨噬细胞,LPS联合ATP刺激,试验组提前加入Kv1.3通道阻断剂ADWX-1和不同浓度的PAP-1干预,ELISA检测上清中炎性细胞因子IL-1β分泌,Western blotting检测IL-1β、caspase-1蛋白表达,免疫荧光检测ASC的表达和斑点的形成等试验进行研究.结果显示:浓度为100 pmol/L ADWX-1和不同浓度的Kv1.3通道阻断剂PAP-1(浓度分别为100 nmol/L,1μmol/L,10μmol/L)能够浓度梯度依赖的抑制THP-1细胞上清中细胞炎性因子IL-1β产生.浓度为100 pmol/L ADWX-1处理能够抑制IL-1β成熟片段p17的分泌,浓度为10μmol/L PAP-1处理能够抑制caspase-1切割片段p10的生成.THP-1细胞中LPS,ATP双刺激能够形成ASC斑点,浓度为10μmol/L PAP-1处理能够抑制ASC的表达和斑点的形成.