棕榈酸通过cGAS-STING-IRF3通路降低心肌细胞的自噬功能

目的探究棕榈酸(PA)对心肌细胞自噬功能的影响及潜在机制。方法提取大鼠乳鼠心肌细胞(NRCMs)并体外培养24 h,分别加入10%BSA以及不同浓度的PA(0、0.1、0.3、0.5、0.7 mmol/L)共培养24 h。Western blotting检测NRCMs中自噬指标(PINK1、Parkin、p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)以及cGAS、STING、p-IRF3/IRF3的蛋白表达水平。CCK8法检测细胞活性,筛选0.7 mmol/L PA用于后续实验。进一步将cGAS siRNA转染入NRCMs中以敲降cGAS的表达,将NRCMs细胞分为:空白对照组(Control组,无特殊处理)、阴性对照组(NC组,转染NC序列)、cGAS siRNA组(转染cGAS-siRNA敲降cGAS)、PA组(0.7 mmol/L PA处理24 h)、cGAS siRNA+PA组(转染cGAS-siRNA后予以0.7 mmol/L PA处理24 h)。Western blot检测NRCMs自噬相关蛋白指标表达变化,CCK8法检测细胞活性,免疫荧光检测p62和LC3阳性着色情况。结果经不同浓度PA作用24 h后,NRCMs中PINK1、Parkin,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ+Ⅱ蛋白表达量明显降低(P<0.05),p62蛋白表达量明显增高(P<0.05),且心肌细胞活性明显下降(P<0.05)。将cGAS敲降后,可明显逆转PA诱导的NRCMs自噬功能降低,并改善心肌细胞活性(P<0.05)。结论PA通过介导cGAS-STING-IRF3通路激活,抑制心肌细胞的自噬功能,导致细胞活性降低。