干扰素应答因子1对不同p53状态骨肉瘤凋亡的调节作用

目的观察干扰素应答因子1（IRF-1）基因对不同p53状态骨肉瘤细胞凋亡的调节作用，并探讨其机制。方法利用u20s（p53^＋/＋）和Saos2（p53^-/-）骨肉瘤细胞作为研究模型，用不同剂量阿霉素处理后，Western blot检测IRF-1表达的变化。进一步通过过表达IRF-1基因或敲除IRF-1基因，检测其对骨肉瘤细胞凋亡的影响。并通过实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测IRF-1对p53下游靶基因B细胞淋巴瘤/白血病-2相关x蛋白（bax）和p21的调节作用。结果不同剂量阿霉素处理U20S和Saos2后，Westernblot结果显示IRF-1的表达明显增高。进一步过表达IRF-1后，乳酸脱氢酶（LDH）法检测细胞死亡率明显增高（P〈0．05）；干涉IRF-1基因后，全量LDH检测细胞死亡率则明显降低（P〈0．05）。RT-qPCR检测显示，IRF-1对p53下游靶基因bax和p21在p53^-/-SaOS-2细胞中具有明显的促进作用（P〈0．05），而对于p53^＋/＋U20S中的作用并不明显（P〉0．05）。结论IRF-1可通过调节p53下游靶基因bax和p21的表达，从而显著促进阿霉素诱导的骨肉瘤细胞凋亡。