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多表位疫苗的研究进展
被引量:
4
1
作者
余霁
刘景晶
《中国生化药物杂志》
CAS
CSCD
2002年第6期322-324,共3页
综述了最近几年国内外在多表位疫苗方面的研究进展。
关键词
多表位疫苗
研究进展
新表位
发现
表位组合
优化
下载PDF
职称材料
C端融合RGD三肽的重组L-门冬酰胺酶基因克隆、表达和对血液系统的影响
被引量:
1
2
作者
曹荣月
钱之玉
+4 位作者
余霁
王学军
李亚君
徐群为
刘景晶
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2003年第6期353-357,共5页
利用加端PCR技术构建asnB-RGD工程菌,获得C末端带有RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸,Arg-Gly-Asp)三肽的门冬酰胺酶(AnsB-RGD),以改进L-门冬酰胺酶的作用。以pUA18为模板,利用pUC18上游普适引物和根据L-门冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)C末端下游序...
利用加端PCR技术构建asnB-RGD工程菌,获得C末端带有RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸,Arg-Gly-Asp)三肽的门冬酰胺酶(AnsB-RGD),以改进L-门冬酰胺酶的作用。以pUA18为模板,利用pUC18上游普适引物和根据L-门冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)C末端下游序列设计的引物来扩增目标基因。将目标基因连于pMD18-T载体,转化宿主菌JM109,筛选出的阳性克隆通过HindⅢ、Nco I双酶切下目标基因连到含T7启动子的高效表达载体pET28a上,再转化BL21宿主菌。高效表达的工程菌摇瓶发酵,渗透休克法提取AnsB-RGD融合蛋白,12%的SDS-PAGE检测酶蛋白并考察酶的活力、特异性及其对血液系统的影响。2%琼脂糖凝胶电泳、DNA测序鉴定构建的pET28a-ansB-RGD工程菌,奈氏法、SDS-PAGE及免疫学方法检测AnsB-RGD融合蛋白。DNA序列分析证明RGD三肽已经连接在L-门冬酰胺酶的C末端,带有RGD三肽的融合蛋白仍然能与抗L-门冬酰胺酶的抗体结合,初步发现AnsB-RGD融合蛋白有促进血液凝固作用,但酶活力下降。
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关键词
L-门冬酰胺酶
PCR技术
DNA测序
RGD三肽
下载PDF
职称材料
低特异性L-苏氨酸醛缩酶基因工程菌的构建
被引量:
1
3
作者
韦平和
吴滔
+1 位作者
吴梧桐
余霁
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2000年第2期86-89,共4页
应用PCR技术从E coliJM 10 5中扩增出长约 1kb的低特异性L 苏氨酸醛缩酶基因 ,将其插入高表达载体 pET 11c的NdeI/BamHI位点 ,转化E coliBL 2 1(DE3) ,构建高产低特异性L 苏氨酸醛缩酶基因工程菌。SDS PAGE和薄层扫描表明 ,经IPTG诱导 2...
应用PCR技术从E coliJM 10 5中扩增出长约 1kb的低特异性L 苏氨酸醛缩酶基因 ,将其插入高表达载体 pET 11c的NdeI/BamHI位点 ,转化E coliBL 2 1(DE3) ,构建高产低特异性L 苏氨酸醛缩酶基因工程菌。SDS PAGE和薄层扫描表明 ,经IPTG诱导 2h ,工程菌低特异性L 苏氨酸醛缩酶的表达量占菌体总可溶性蛋白的 72 9%。酶活测定结果表明 ,39株工程菌低特异性L 苏氨酸醛缩酶的活力比宿主菌均有不同程度的提高 ,其中 86号是宿主菌的 31倍。
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关键词
低特异性L-苏氨酸醛缩酶
基因工程菌
合成
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职称材料
题名
多表位疫苗的研究进展
被引量:
4
1
作者
余霁
刘景晶
机构
中国药科大学生物制药学院
出处
《中国生化药物杂志》
CAS
CSCD
2002年第6期322-324,共3页
文摘
综述了最近几年国内外在多表位疫苗方面的研究进展。
关键词
多表位疫苗
研究进展
新表位
发现
表位组合
优化
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R979 [医药卫生—药品]
下载PDF
职称材料
题名
C端融合RGD三肽的重组L-门冬酰胺酶基因克隆、表达和对血液系统的影响
被引量:
1
2
作者
曹荣月
钱之玉
余霁
王学军
李亚君
徐群为
刘景晶
机构
中国药科大学
江苏省递药系统重点实验室
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2003年第6期353-357,共5页
文摘
利用加端PCR技术构建asnB-RGD工程菌,获得C末端带有RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸,Arg-Gly-Asp)三肽的门冬酰胺酶(AnsB-RGD),以改进L-门冬酰胺酶的作用。以pUA18为模板,利用pUC18上游普适引物和根据L-门冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)C末端下游序列设计的引物来扩增目标基因。将目标基因连于pMD18-T载体,转化宿主菌JM109,筛选出的阳性克隆通过HindⅢ、Nco I双酶切下目标基因连到含T7启动子的高效表达载体pET28a上,再转化BL21宿主菌。高效表达的工程菌摇瓶发酵,渗透休克法提取AnsB-RGD融合蛋白,12%的SDS-PAGE检测酶蛋白并考察酶的活力、特异性及其对血液系统的影响。2%琼脂糖凝胶电泳、DNA测序鉴定构建的pET28a-ansB-RGD工程菌,奈氏法、SDS-PAGE及免疫学方法检测AnsB-RGD融合蛋白。DNA序列分析证明RGD三肽已经连接在L-门冬酰胺酶的C末端,带有RGD三肽的融合蛋白仍然能与抗L-门冬酰胺酶的抗体结合,初步发现AnsB-RGD融合蛋白有促进血液凝固作用,但酶活力下降。
关键词
L-门冬酰胺酶
PCR技术
DNA测序
RGD三肽
Keywords
L-asparaginase, Polymerase chain reaction, DNA sequence, Arg-Gly-Asp pepitide
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
低特异性L-苏氨酸醛缩酶基因工程菌的构建
被引量:
1
3
作者
韦平和
吴滔
吴梧桐
余霁
机构
中国药科大学生物制药学院
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2000年第2期86-89,共4页
文摘
应用PCR技术从E coliJM 10 5中扩增出长约 1kb的低特异性L 苏氨酸醛缩酶基因 ,将其插入高表达载体 pET 11c的NdeI/BamHI位点 ,转化E coliBL 2 1(DE3) ,构建高产低特异性L 苏氨酸醛缩酶基因工程菌。SDS PAGE和薄层扫描表明 ,经IPTG诱导 2h ,工程菌低特异性L 苏氨酸醛缩酶的表达量占菌体总可溶性蛋白的 72 9%。酶活测定结果表明 ,39株工程菌低特异性L 苏氨酸醛缩酶的活力比宿主菌均有不同程度的提高 ,其中 86号是宿主菌的 31倍。
关键词
低特异性L-苏氨酸醛缩酶
基因工程菌
合成
Keywords
Low-specificity L-threonine aldolase, β Hydroxy α amino acid, Genetic engineered strain
分类号
R914.5 [医药卫生—药物化学]
R963 [医药卫生—微生物与生化药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
多表位疫苗的研究进展
余霁
刘景晶
《中国生化药物杂志》
CAS
CSCD
2002
4
下载PDF
职称材料
2
C端融合RGD三肽的重组L-门冬酰胺酶基因克隆、表达和对血液系统的影响
曹荣月
钱之玉
余霁
王学军
李亚君
徐群为
刘景晶
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2003
1
下载PDF
职称材料
3
低特异性L-苏氨酸醛缩酶基因工程菌的构建
韦平和
吴滔
吴梧桐
余霁
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2000
1
下载PDF
职称材料
已选择
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