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高温酸性磷酸酶acp基因的克隆、表达和功能的初步鉴定
被引量:
1
1
作者
余霖霖
杨灵
+3 位作者
李轶女
周庆祥
朱越雄
沈桂芳
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2007年第2期135-138,142,共5页
从高温塘泥(温度在40~85℃之间)中分离到一组嗜热微生物,提取环境基因组DNA,通过随机测序,发现许多基因与Thermus属的DNA相似性很高,根据Genbank上Thermus thermophilusHB8基因组序列中推定的酸性磷酸酶基因(TTHA1616),设计引物,PCR扩...
从高温塘泥(温度在40~85℃之间)中分离到一组嗜热微生物,提取环境基因组DNA,通过随机测序,发现许多基因与Thermus属的DNA相似性很高,根据Genbank上Thermus thermophilusHB8基因组序列中推定的酸性磷酸酶基因(TTHA1616),设计引物,PCR扩增得到一段798bp的DNA序列,测序结果与Thermus thermophilusHB8基因组中酸性磷酸酶基因相似性达98%,含有完整的酸性磷酸酶保守区,于是将该基因在大肠杆菌中表达,得到一条约33KD的特异蛋白条带,酶活检测证实该推定蛋白具有酸性磷酸酶活力。
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关键词
酸性磷酸酶
Thermus属
基因表达
下载PDF
职称材料
Geobacillus sp.POT5 α-淀粉酶基因的克隆及表达
被引量:
2
2
作者
杨灵
侯瑛
+2 位作者
余霖霖
刘国生
张志芳
《河南师范大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期135-139,共5页
从高温环境土壤中分离到1株能在75℃生长并产生α-淀粉酶的菌株(POT5),扩增了其16Sr DNA核苷酸序列,序列分析表明该菌属于Geobacillus属.根据该属全基因序列测定数据中推定的α-淀粉酶基因,利用PCR方法从G.sp.POT5基因组中扩增得到该菌...
从高温环境土壤中分离到1株能在75℃生长并产生α-淀粉酶的菌株(POT5),扩增了其16Sr DNA核苷酸序列,序列分析表明该菌属于Geobacillus属.根据该属全基因序列测定数据中推定的α-淀粉酶基因,利用PCR方法从G.sp.POT5基因组中扩增得到该菌α-淀粉酶基因(amyP).序列分析表明该基因全长1.545 kb、G+C含量51.33%,编码514个氨基酸.构建重组表达质粒pET22b(+)-amyP,转化Escherichia coliBL21系统,表达产物经SDS-PAGE分析、活性染色及淀粉酶活力分析,表明amyP基因得到了表达,且产物具有生物学活性.
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关键词
GEOBACILLUS
16SrDNA
淀粉酶
基因表达
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职称材料
题名
高温酸性磷酸酶acp基因的克隆、表达和功能的初步鉴定
被引量:
1
1
作者
余霖霖
杨灵
李轶女
周庆祥
朱越雄
沈桂芳
机构
苏州大学生命科学学院
中国农业科学院生物技术研究所
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2007年第2期135-138,142,共5页
文摘
从高温塘泥(温度在40~85℃之间)中分离到一组嗜热微生物,提取环境基因组DNA,通过随机测序,发现许多基因与Thermus属的DNA相似性很高,根据Genbank上Thermus thermophilusHB8基因组序列中推定的酸性磷酸酶基因(TTHA1616),设计引物,PCR扩增得到一段798bp的DNA序列,测序结果与Thermus thermophilusHB8基因组中酸性磷酸酶基因相似性达98%,含有完整的酸性磷酸酶保守区,于是将该基因在大肠杆菌中表达,得到一条约33KD的特异蛋白条带,酶活检测证实该推定蛋白具有酸性磷酸酶活力。
关键词
酸性磷酸酶
Thermus属
基因表达
Keywords
Acid phosphatase
Thermus
Gene expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
Geobacillus sp.POT5 α-淀粉酶基因的克隆及表达
被引量:
2
2
作者
杨灵
侯瑛
余霖霖
刘国生
张志芳
机构
河南师范大学生命科学学院
中国农业科学院生物技术研究所
出处
《河南师范大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期135-139,共5页
基金
国家自然科学基金(30670082)
文摘
从高温环境土壤中分离到1株能在75℃生长并产生α-淀粉酶的菌株(POT5),扩增了其16Sr DNA核苷酸序列,序列分析表明该菌属于Geobacillus属.根据该属全基因序列测定数据中推定的α-淀粉酶基因,利用PCR方法从G.sp.POT5基因组中扩增得到该菌α-淀粉酶基因(amyP).序列分析表明该基因全长1.545 kb、G+C含量51.33%,编码514个氨基酸.构建重组表达质粒pET22b(+)-amyP,转化Escherichia coliBL21系统,表达产物经SDS-PAGE分析、活性染色及淀粉酶活力分析,表明amyP基因得到了表达,且产物具有生物学活性.
关键词
GEOBACILLUS
16SrDNA
淀粉酶
基因表达
Keywords
Geobacillus
16Sr DNA
u-amylases
gene expression
分类号
Q93 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高温酸性磷酸酶acp基因的克隆、表达和功能的初步鉴定
余霖霖
杨灵
李轶女
周庆祥
朱越雄
沈桂芳
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2007
1
下载PDF
职称材料
2
Geobacillus sp.POT5 α-淀粉酶基因的克隆及表达
杨灵
侯瑛
余霖霖
刘国生
张志芳
《河南师范大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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职称材料
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