手性固定相法和手性衍生化法拆分β-受体阻断剂类药物及其结构类似物

目的 :建立一些 β-受体阻断剂类药物及其结构类似物的手性高效液相色谱拆分方法。方法 :利用 Chiral-cel OD和 Chiralpak AD两种手性固定相及 GITC手性衍生化试剂 ,对 11种药物进行手性拆分研究。结果 :普萘洛尔、阿替洛尔、比索洛尔、美托洛尔、塞利洛尔、卡维地洛、索他洛尔、普罗帕酮、麻黄碱和佐米曲普坦都在一种或几种色谱条件下得到了较好的分离。柱温对 Chiralcel OD的拆分因子影响较大 ,相同条件下柱温越低 ,药物拆分因子越大。结论 :用 OD和 AD两种手性固定相和 GITC手性衍生化法拆分 β-受体阻断剂等

反相高效液相色谱法测定鼠肝微粒体中依普黄酮及其在代谢研究中的应用

目的 建立鼠肝微粒体中依普黄酮的反相高效液相色谱测定法 ,以研究依普黄酮的体外代谢。方法 本法中依普黄酮与鼠肝微粒体共孵育之后用氯仿提取 ,采用地非三唑为内标 ,以Nova parkC18柱为分析柱 ,乙腈 0 .1%醋酸溶液 ( 6 0∶4 0 )为流动相 ,流速 1.0mL·min-1,紫外检测波长为 2 5 0nm。结果 依普黄酮在 1～ 10 0 μg·mL-1内线性关系良好 (r =0 .9998)。检测限为 0 .0 2 μg·mL-1(S/N≥ 3) ,定量限为 0 .1μg·mL-1(RSD <5 .0 % ,S/N =8,n =3)。方法回收率达 96 .90 %～ 112 .8% ,日内 ,日间RSD分别 <8.0 %和 <10 % (n =5 )。结论 此法简便 ,准确 。

用Chiralcel OD和Chiralpak AD拆分手性药物的研究进展

目的 阐述近几年来用ChiralcelOD和ChiralpakAD拆分药物的研究进展 ,以探索色谱条件对这两种手性固定相 (chiralstationaryphases,CSPs)拆分药物的影响。 方法 查阅相关文献 ,进行综合 ,分析和归纳。结果与结论 ChiralcelOD和Chiral pakAD两种CSPs用于拆分药物时具有互补性 ,一些化合物往往能在一种或是两种CSPs上得到分离 ,且流动相组成和柱温对分离影响较大。

多元化考试模式在药物分析精品课程建设中的实践

改变传统的考试模式,采用开卷、闭卷、实验以及各种形式的自主学习活动等相结合的方式,从理论、实践、创新思维和解决实际问题能力等多方面考核学生的综合能力。实践证明多元化考试方式加强了学生理论联系实际工作能力的培养,较全面、客观地反映了学生的综合能力,受到学生的普遍欢迎。

全程教学质量评价和提高体系的构建

从教学理念、教学内容、教学方法和教学过程等方面,以人为本,与时俱进,坚持以教师为主导和以学生为主体,教学管理部门和师生共同参与,阶段性评价与一次性评价相结合、教学质量评价和提高相结合、内外评价结合以内部评价为主,构建全程教学质量评价和提高体系;通过教学质量评价提高教学质量。

远程药物分析虚拟实验教学探索

设计示教视频、虚拟实验和设计性实验3组不同层次的实验,由此建立了网上药物分析虚拟实验室,探索适合远程学生实验教学的解决方案。真实的实验视频和形象生动的动画实验,增加了学习的趣味性,促进了学生对理论知识的理解,提高了学生的学习积极性。

“药物分析”精品课程建设的探索与实践

本文从药物分析精品课程的教学内容的选择与安排、教学方法的改革、教学队伍建设、学生在教学过程中的参与作用、实验室建设等方面介绍了药物分析精品课程建设的几点做法和体会.

培养学生研究创新能力的多元化教学模式在药物分析教学中的尝试

为培养学生的创新思维和研究能力,在药物分析课程教学中采用传统的课堂教学、新型的以问题为基础(PBL)的教学模式和个性化自主学习相结合的多样化教学方式,包括课堂教学、自学讨论、社会调查、自主实验、论文撰写等。培养了学生的独立工作能力、团队协作精神、创新思维和实验研究能力,体现了为学生全面发展提供优质和个性化服务的教学理念。

研究性自主实验和设计性实验的开设与尝试

通过优化实验结构,开设设计性实验和研究性自主实验,发挥学生在实验中的主体作用,综合评定实验成绩等手段,对药物分析课程的实验教学进行改革。实践表明设计性实验和研究性自主实验充分发挥了学生的主观能动性,提高了学生的分析问题、解决问题和创新思维能力。

HPLC法测定大鼠血浆中咪达唑仑的含量及其在药物相互作用研究中的应用

目的:建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中咪达唑仑含量,并应用于佐米曲坦对大鼠肝细胞中 CYP3A 的诱导作用的研究。方法:采用色谱柱为 Diamonsil^(TM)(钻石)C_(18)(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.01 mol·L^(-1)磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)(58:42),流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为220 nm。咪达唑仑(10 mg·kg^(-1))作为经典 CYP3A 探针底物对3组不同诱导后的大鼠(佐米曲坦样品组、地塞米松阳性对照组或空白对照组)静注给药,测定咪达唑仑的清除率等参数来研究CYP3A 活性的变化。结果:咪达唑仑在0.3～375 μmol·L^(-1)浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9997,n=5),检测限为0.0018 μmol·L^(-1),平均回收率为97.9%。经佐米曲坦诱导的雄性大鼠组中咪达唑仑 AUC_(0-t)和 T_(1/2)与雄性空白大鼠组中咪达唑仑 AUC_(0-t)和 T_(1/2)比,显著降低,清除率增加,与地塞米松组中咪达唑仑的动力学参数相近;而经佐米曲坦诱导的雌性大鼠的动力学参数与空白雌性组比没有明显的变化。结论:本文建立的大鼠血浆中咪达唑仑测定方法稳定、准确、简便,能使咪达唑仑作为探针药物很好地运用于佐米曲坦对大鼠肝中 CYP3A 诱导作用研究中。另外佐米曲坦对大鼠肝中 CYP3A 具有性别差异的诱导作用。

高效液相色谱法测定人肝微粒体中帕洛诺司琼的浓度

目的 研究帕洛诺司琼的体外代谢，建立人肝微粒体中帕洛诺司琼的反相高效液相色谱测定法。方法 帕洛诺司琼与人肝微粒体共孵育之后用乙醚提取，采用地非三唑为内标，以Diamonsil C18柱（4．6mm×200mm，5μm）为分析柱，0．01μmol·L^-1KH2PO4（pH3．0）．甲醇（30：70）为流动相，流速1．0mL·min^-1，紫外检测波长为24nm。结果 帕洛诺司琼在1～100μmol·L^-1内线性关系良好（r=0．9999，n=5），检测限为0．05μmol·L^-1（S／N≥3），定量限为（0．21±0．04）μmol·L^-1（n=5）。方法提取回收率和方法回收率平均分别为89．7％和100．0％，日内，日间RSD均〈10％（n=5）。结论 此法简便，准确，可用于研究帕洛诺司琼在人肝微粒体中的代谢。

自主性实验实践活动培养学生综合能力

本文介绍了药物分析课程教学中为加强大学生综合能力培养而特意开设的自主性实验和社会调查活动。这些活动的开展为大学生科研能力和人文素质的提高创造了良好的学习氛围。

以能力培养为导向的药物分析综合设计性实验的设置与实践

围绕药品质量控制,以学生能力培养为导向,构建药物分析综合设计性实验,设计跨学科的综合性设计性实验,展开各种自主性实验和实践活动,以提高学生全面控制药品质量观念和药品检验胜任能力,培养学生的创新意识、独立工作能力和运用所学知识来解决药品质量问题的实际工作能力。

CN128中残留有机溶剂的顶空GC法测定

目的建立CN128原料药中8种有机溶剂残留量的测定方法。方法采用顶空GC法,色谱柱为Agilent HP-5(30 m×0.25 mm,0.25μm),柱温为程序升温:起始温度为35℃,保持6 min,以50℃/min升温至110℃,再以10℃/min升温至220℃,保持3 min;载气为氮气,柱流速1.0mL/min;气化室温度200℃;FID检测器,检测室温度250℃。有机溶剂检测项目为乙酸乙酯、二氯甲烷、乙醇、乙腈、正己烷、正庚烷、环己烷和氯化苄。结果 8种溶剂的线性关系、精密度、准确度均达到了《中国药典》2015版中残留溶剂限量规定的测定要求。结论建立的方法能有效控制CN128原料药中乙酸乙酯、二氯甲烷、乙醇、乙腈、正己烷、正庚烷、环己烷和氯化苄的残留量。

应用反相高效液相色谱法同时测定积雪草提取物中羟基积雪草苷、积雪草苷及其苷元

目的：采用反相高效液相色谱建立同时测定积雪草提取物中羟基积雪草苷、积雪草苷、羟基积雪草酸及积雪草酸4种主要成分的分析方法。方法：采用Agilent 1100高效液相色谱仪系统，ZORBAX Eclipse XDB -C8色谱柱（4．6 mm ×150 mm，5μm）；流动相为1 mmol/L磷酸二氢钾水溶液-乙腈，梯度洗脱；检测波长205 nm。结果：羟基积雪草苷、积雪草苷、羟基积雪草酸及积雪草酸的色谱响应线性范围良好（R2≥0．9998）；平均回收率分别为97．4％、93．7％、97．5％、99．8％，相对标准偏差值分别为3．4％、1．4％、4．7％、4．4％（n＝9）。结论：采用反相高效液相色谱建立同时测定羟基积雪草苷、积雪草苷及其苷元的方法高效灵敏、重现性好，可以作为积雪草提取物质量控制的检测方法。

人谷胱甘肽硫转移酶的克隆表达及活性鉴定

目的：克隆表达人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1，用于研究化合物的代谢途径。方法：采用反转录PCR得到人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1基因全长cDNA。将测序正确的cDNA连接到pET-28 a阳性表达载体上并在大肠杆菌BL21（ DE3）中稳定表达。利用亲和色谱纯化表达得到重组酶，以2，4-二硝基氯苯为底物，测定340 nm波长处吸收度的变化，检测酶活性。结果：PCR产物与克隆载体pMD19-T连接后的质粒测序结果表明，目的基因的cDNA序列完全正确。表达质粒在大肠杆菌BL21（ DE3）中获得良好的可溶性表达，经镍离子亲和柱纯化后目的蛋白较纯，具有较好的催化活性。所表达的 hGSTA1、hGSTT1和hGSTP1酶比活性分别为17．55、0．02、18．75μmol· min-1· mg-1蛋白。结论：成功构建了人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1的原核表达系统，得到的重组酶可用于药物代谢研究。

孕烷X受体介导佐米曲坦对大鼠肝细胞色素P450 CYP 3A的诱导作用

目的:考察佐米曲坦对大鼠肝细胞色素P450 CYP3A1/2的诱导是否由孕烷X受体(PXR)介导。方法:在构建的基于PXR的荧光素酶报告基因上,观察不同浓度佐米曲坦(10、50、100μmol.L-1)对大鼠肝细胞色素P450 CYP3A1/2的诱导作用。以经典的诱导剂16α-氰基孕烯醇酮(PCN)作为阳性对照,空白溶剂(DMSO)作为阴性对照。结果:与阴性对照组相比,阳性对照组、佐米曲坦在100μmol.L-1浓度时,对CYP3A1有明显的诱导作用,活性分别增加了1.93、1.96倍(P<0.05);阳性对照组、佐米曲坦10μmol.L-1、50μmol.L-1浓度组对CYP3A2也有明显的诱导作用,其活性分别增加了2.51、2.10、1.63倍(P<0.01、<0.05)。结论:PXR通路是佐米曲坦诱导大鼠CYP3A1/2的一个重要途径。

马来酸噻吗洛尔原料和滴眼剂中对映体杂质的含量测定

目的：了解国内生产的马来酸噻吗洛尔及其滴眼液中对映体杂质含量，为我国药典制订手性药物杂质限量提供参考数据。方法：应用手性高效液相色谱法，色谱条件为：Chiralcel OD 手性柱（4．6 mm ×150 mm，5μm）；检测器波长297 nm；流动相为正己烷-异丙醇-二乙胺（480∶20∶1）；柱温25℃；流速1．0 ml/min，进样量5μl。结果：两个对映体的色谱分离度为4．3。不同厂家的两批马来酸噻吗洛尔原料药中的对映体杂质平均含量小于0．67％，3批马来酸噻吗洛尔滴眼液中的对映体杂质平均含量小于0．31％。结论：各批马来酸噻吗洛尔产品中对映体杂质含量均符合欧洲药典标准，我国药典可以参照此数据。

盐酸伐昔洛韦的手性分离及其对映体杂质的含量测定

目的：了解国产盐酸伐昔洛韦中L-对映体杂质的含量，为我国药典制订手性药物杂质限量提供参考数据。方法：应用手性高效液相色谱法。色谱条件：CROWNPAK？ CR（＋）手性柱（4 mm ×150 mm，5μm）；检测器波长254 nm；流动相为水-甲醇-高氯酸（19∶1∶0．1）；流速0．75 ml/min，进样量10μl。结果：D-伐昔洛韦与L-伐昔洛韦完全分离，分离度为12。不同厂家的8批盐酸伐昔洛韦中L-对映体杂质的平均含量为0．65％～2．62％。结论：各批产品中L-对映体杂质含量均符合美国药典标准，我国药典可以参照此数据。