植物抗盐胁迫研究进展

盐胁迫严重制约了农业生产,解析盐胁迫机理受到关注。随着抑制消减杂交和基因表达序列分析等大规模表达基因鉴定技术在抗盐研究中的应用,盐碱胁迫下功能基因的获得量迅速增加。综述了近年来在酵母、拟南芥、水稻等生物上利用基因芯片等方法进行抗盐机理研究取得的成果,并介绍了结合系统生物学的方法进行抗盐研究取得的进展,以及植物抗盐胁迫研究的发展前景。

转录因子DREB1A基因的克隆与Gateway克隆技术构建植物表达载体

目的:研究转录因子DREB1A在植物抗渗透胁迫反应中的作用,并探讨利用Gateway克隆技术构建植物表达载体的方法。方法:根据GenBank中登录的DREB1A基因的全长mRNA序列设计引物,克隆了拟南芥的转录因子DREBIA基因。根据Gateway克隆技术的要求,设计含有attB接头的引物,利用高保真的PlatinumpfxDNA聚合酶,通过PCR方法在克隆基因的两端加上B序列。通过BP反应将包含有attB接头的PCR产物克隆到含有attP的donor载体上以产生Entry克隆,通过LR反应将已经重组入Entry载体的DREB1A基因再克隆到pH2GW7双元载体。结果:对重组载体pH2GW7-DREB1A的鉴定结果表明成功构建了DREB1A基因的植物表达载体。结论:利用Gateway克隆技术构建植物表达载体简便易行,该结果为遗传转化研究奠定了基础。

地被菊新品种‘火玫瑰’和‘神韵’

地被菊‘火玫瑰’(秋艳×多父本)、‘神韵’(富丽×多父本),是用多父本混合杂交的种子,经166·67～200kV/m高压静电场辐射,从其后代中选育而来。‘火玫瑰’花色深红色,‘神韵’花色浅粉色。这两个新品种株型丰满,花色艳丽,抗寒性强,抗病性强,是东北地区秋季绿化的新品种。

菊花新品系叶片外植体不定芽再生体系的研究

以‘东林4号’、‘东林6号’、‘东林9号’3个优良菊花品系叶片外植体为试材,探讨了基因型、叶龄、潮霉素浓度等因素对菊花叶片不定芽再生的影响。结果表明:基因型是影响不定芽再生的重要因素,不同品系叶片不定芽再生的激素配比存在明显差异;同一品系,上层幼嫩叶片分化率明显高于中下部。‘东林9号’品系叶片不定芽分化率高达90%,‘东林9号’叶片及不定芽在30 mg/L的潮霉素中表现为全部死亡。东林4号最适分化培养基为:MS+3 mg/L BA+0.1 mg/L 2,4-D;东林6号最适分化培养基为:MS+2 mg/L BA+1 mg/L NAA;东林9号最适分化培养基为:MS+0.5 mg/L BA+1.5 mg/L NAA。

小菊‘类锌指蛋白’基因植物表达载体构建及对烟草的转化

为了建立耐盐碱小菊(Chrysanthemum morifolium)中克隆到的'类锌指蛋白基因'CmSTZF(DQ864730)的烟草遗传转化体系,并研究其抗逆特性。本研究借助Gateway技术构建了小菊'类锌指蛋白'基因CmSTZF的过量表达载体pH7WG2D-CmSTZF,并以烟草NC89(N.plumbaginifolia'NC89')的叶片为试材,通过农杆菌介导的转化,成功地建立了烟草遗传转化体系,经PCR-Southern鉴定获得CmSTZF的转基因烟草株系。