减氮施肥对菠菜生长发育及品质的影响

以菠菜为试材,采用随机区组方法,研究尿素不同施肥处理对菠菜生长发育的影响,以期达到菠菜生产合理施肥的目的。结果表明:适量的减氮施肥对菠菜植株生长发育及生理指标影响不显著,但过量的减施会显著影响菠菜的株高和产量。随着施氮量的减少,菠菜的维生素C和可溶性糖含量均显著增加。可溶性蛋白质含量有所下降,品种间菠菜硝酸盐含量下降及草酸含量下降,分别达到显著水平。综合比较,以"夏丽"品种在减氮20%处理下效果最佳。

双价反义载体构建及对大白菜的遗传转化

为获得抗芜菁花叶病毒病、耐抽薹的大白菜植株,进行了双价反义植物表达载体的构建和遗传转化研究。在利用TuMV-Nib、LFY基因,构建成反义双价植物表达载体,转化农杆菌LBA4404,获得工程菌株的基础上,采用农杆菌介导的真空渗入法转化大白菜4个高代自交系材料,获得了经PCR检测和TuMV感染鉴定的16株转基因植株。经田间鉴定有7株表现为抗病毒和耐抽薹。该结果可为抗病毒病、耐抽薹的转基因大白菜提供种质材料。

无选择标记转基因大白菜的检测

通过对转基因大白菜进行TuMV-C4病毒摩擦接种鉴定、ELSIA检测、提取转基因大白菜DNA进行PCR检测,并通过PCR-Southern杂交、RT-PCR检测转基因大白菜,构建了针对无选择标记转基因大白菜的系统检测方法。试验结果表明:转基因大白菜通过摩擦接种TuMV-C4病毒抗病性鉴定,188株表现为抗性,初步筛选率为19.46%;进行ELISA检测抗病植株中TuMV含量,有63株明显低于非转化植株,筛选率达到26.25%;对抗TuMV植株直接进行目的基因PCR检测,有25株呈阳性,筛选率达到13.30%。经PCR-Southern杂交检测和RT-PCR检测,表明转基因大白菜中不仅整合了Nib基因,而且获得了表达。这种逐级递进的检测系统可以高效地获得无选择标记的转基因植株。