肝靶向肽-人肿瘤坏死因子融合基因的克隆、可溶性表达及鉴定

目的获得可溶性且纯度高的肝靶向肽-人肿瘤坏死因子融合蛋白。方法首先以HepG2 cDNA为模板,RT-PCR克隆人肿瘤坏死因子(TNFα)基因,SOEing PCR扩增肝靶向肽-人肿瘤坏死因子(CSP-TNFα)融合基因,通过双酶切连接构建融合基因原核表达载体,利用ProtParam对原核表达载体中CSP-TNFα开放阅读框进行生物信息学分析,最后进行可溶性表达和Ni柱纯化并SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果获得TNFα基因序列、CSP-TNFα融合基因和表达载体CSP-TNFα/pET21b;融合基因编码融合蛋白CSP-TNFα含有肝靶向肽CSPⅠ-plus-人肿瘤坏死因子TNFα-纯化标签6*His,稳定性较好,有利于原核系统表达。在20℃,诱导20 h,融合蛋白CSP-TNFα可溶性表达成功;纯化后融合蛋白纯度约97%。结论成功克隆肝靶向肽-人肿瘤坏死因子CSP-TNFα融合基因,并获得较纯的可溶性CSP-TNFα融合蛋白,为下一步研究其生物学活性奠定了基础。

影像学检查对胰腺癌的鉴别诊断价值——全国多中心回顾性研究

[目的]评价不同影像学检查对中国胰腺癌患者的鉴别诊断价值。[方法]收集全国七大区14家医院2005-2014年收治的首诊为胰腺肿瘤的患者病历,对其影像学检查资料进行分析,比较常用影像学技术单独检测的灵敏度、特异度、检出率及准确率,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析影像学技术联合检测的鉴别诊断效能。[结果]共3537例患者纳入研究。对于胰腺肿瘤性质的鉴别,在单独检测中,磁共振常规序列检查检出率、准确率、灵敏度最高,CT检查仅次于磁共振常规序列检查,经腹超声检查特异度最高。在联合检测中,CT与磁共振常规序列串联试验具有最高AUC值及约登指数,且均高于单独检测。[结论]CT与磁共振常规序列检查能够有效检测出胰腺部位肿瘤,其串联试验对胰腺癌的鉴别诊断可提供良好的灵敏度、特异度,有较高的鉴别诊断价值,可为临床诊断提供一定参考。

和尚吃馒头

中国古代有许多经典的数学问题，十分有趣。比如有一次，我在一本书上看到“和尚吃馒头”的古代数学问题，立刻产生了浓厚的兴趣。这道题目是：