海菜花浸提液对2种沉水植物的化感作用

以2种沉水植物密刺苦草、菹草为试验材料,用质量浓度5 g/L的海菜花浸提液处理,到期测定因此产生的化感作用。结果表明,在质量浓度5 g/L的海菜花浸提液处理下,菹草和密刺苦草的SOD活性、POD活性和脯氨酸含量均下降,丙二醛含量显著升高。叶绿素a、b含量也有不同程度的下降,其中,浸提液处理组菹草中叶绿素与对照组相比无显著性差异(P>0.05),浸提液处理组密刺苦草叶绿素含量与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。说明海菜花浸提液化感物质对密刺苦草、菹草均有胁迫作用,胁迫作用的强弱顺序为密刺苦草>菹草。

海菜花种植水对2种沉水植物抗逆性的影响

海菜花(Ottelia acuminata)作为国家Ⅱ级保护植物,是一种既可观赏又可食用的植物。就海菜花生长过程中产生的次生物质,以种植水的形式对2种沉水植物(菹草和密刺苦草)的生长过程产生的影响进行研究。结果表明,密刺苦草在不同浓度的海菜花种植水中过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性明显下降,丙二醛(MDA)含量下降,总叶绿素浓度亦有明显的下降,说明密刺苦草对于海菜花种植水中的化感物质表现出明显抗性,海菜花对于密刺苦草的生长起抑制作用。菹草SOD活性出现了明显下降,MDA含量呈先下降后上升的趋势,叶绿素浓度亦是先下降后上升,但是最初呈现的下降趋势均不明显。说明海菜花的化感作用对于密刺苦草比菹草的敏感,密刺苦草更容易受到海菜花化感物质的影响。

海菜花ISSR-PCR反应体系的优化与引物筛选

为建立海菜花ISSR-PCR最优反应体系并筛选出适宜的ISSR-PCR引物,本研究应用L_(16)(3^(4))正交设计试验和单因素实验,筛选ISSR-PCR反应体系中主要参数(引物,2×Taq Master Mix,模板DNA)的最适浓度。结果表明,海菜花最适ISSR-PCR反应体系为引物0.22 ng,2×Taq Master Mix 1.5 U/25μL、模板DNA24 ng。通过最优反应体系进行引物筛选,获得19条适宜海菜花扩增的ISSR引物,并利用10个地理居群的海菜花DNA对该体系进行验证。本研究对海菜花后续的遗传多样性、遗传图谱构建提供参考。

广西10个地理居群海菜花遗传多样性的ISSR分析

为了全面掌握广西境内海菜花野生居群分布的遗传多样性特点,本研究利用ISSR分子标记技术,结合NTSYS 2.10e软件、Popgen32软件对广西10个海菜花自然居群进行遗传多样性和亲缘关系研究。结果表明:筛选出的19条ISSR引物共扩增产生71条条带,其中56条为多态性条带,多态性比率为78.87%。10个海菜花居群的多态位点百分率为58.33%~71.15%,其中靖西市古文乡居群(GW)的多态性百分率最高,为71.15%;永福县百寿镇居群(YF)的多态性百分率最低,为58.33%。遗传多样性分析显示,10个海菜花居群的等位基因数(Na)平均为1.7887;有效等位基因数(Ne)平均为1.4056;Nei’s基因多样性指数(He)平均为0.2515;Shannon信息指数(I)平均为0.3873。多态性百分率、Na、Ne、He、I值均表明广西境内海菜花居群间的遗传多样性处于较低水平。基于Jaccard’s遗传相似系数的UPGMA聚类分析表明,靖西市庞陵村居群(PL)和德保县三合村居群(SH)的遗传关系最近,两个居群的遗传相似系数高达0.9437;鹿寨县中渡镇居群(LZ)和永福县百寿镇居群(YF)划分为一组,与其他8个地理居群的遗传关系稍远。聚类结果表明不同地理居群海菜花的亲缘关系与地理分布密切相关,研究结果为保护这一珍稀濒危物种提供了分子生物学依据和理论基础。