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鞘磷脂对小鼠肌卫星细胞C2C12成肌分化的影响 被引量:2
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作者 侯乃鹏 王煜 +1 位作者 陶聪 王彦芳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第11期4074-4083,共10页
研究通过检测鞘磷脂对小鼠肌卫星细胞C2C12成肌分化的影响,旨在为阐明鞘磷脂对解偶联蛋白1(UCP1)基因敲入猪骨骼肌生长的影响提供理论依据。用ELISA法检测野生型猪和UCP1敲入猪背部肌肉及血清中总鞘磷脂含量;利用CCK8法检测不同浓度(0、... 研究通过检测鞘磷脂对小鼠肌卫星细胞C2C12成肌分化的影响,旨在为阐明鞘磷脂对解偶联蛋白1(UCP1)基因敲入猪骨骼肌生长的影响提供理论依据。用ELISA法检测野生型猪和UCP1敲入猪背部肌肉及血清中总鞘磷脂含量;利用CCK8法检测不同浓度(0、5、20、50和100μg/mL)鞘磷脂对C2C12细胞增殖和毒性的影响,并通过形态学观察和分化前后细胞成肌分化标记基因生肌因子5(Myf5)、生肌决定因子(MyoD)、肌细胞生成素(Myogenin)、生肌调节因子4(MRF4)的表达检测,建立C2C12成肌分化体系;在成肌分化培养基中添加上述不同浓度的鞘磷脂,诱导分化6 d后,通过形态学和Myogenin免疫荧光染色观察肌管的形成及成肌分化标记基因的mRNA表达水平检测,确定鞘磷脂的最佳添加浓度。用筛选出的最佳鞘磷脂添加浓度诱导细胞成肌分化,在2、4和6 d收集细胞,利用实时荧光定量PCR检测周期蛋白相关基因CyclinD1、CyclinE、CDK2和CDK4的表达水平,CCK8法检测诱导2 d细胞的活力。结果发现,与野生型猪相比,UCP1-KI猪背部肌肉组织中总鞘磷脂含量显著增加(P<0.05);血清鞘磷脂含量差异不显著(P>0.05);不同浓度鞘磷脂对未分化C2C12细胞的增殖无显著影响(P>0.05);成肌分化6 d后,C2C12细胞形成明显的肌管,成肌分化标记基因Myf5、MyoD、Myogenin、MRF4的mRNA和蛋白水平均极显著上调(P<0.01);与未添加鞘磷脂的对照组相比,20μg/mL鞘磷脂组有更多肌管形成,Myogenin阳性信号和肌管融合指数均显著增加(P<0.05),Myogenin、MRF4基因的表达量显著提高(P<0.05)。利用20μg/mL鞘磷脂诱导细胞分化,在分化2 d时,处理组CyclinE、CDK4基因表达量显著高于对照组(P<0.05),细胞活力也显著高于对照组(P<0.05);分化6 d后,处理组CyclinD1、CyclinE、CDK2、CDK4基因表达量均显著低于对照组(P<0.05)。本研究结果表明,20μg/mL鞘磷脂能够提高小鼠肌卫星细胞C2C12分化早期细胞活力和成肌分化效率,可为研究鞘磷脂对骨骼肌生长的影响提供一定的参考。 展开更多
关键词 鞘磷脂 C2C12细胞 成肌分化
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A pig model carrying heterozygous point mutation of NCSTN simulates familial acne inversa and reveals dysregulated cholesterol biosynthesis via the Notch-p AMPK-HMGCR pathway 被引量:2
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作者 Ruigao Song Keqiang Liu +14 位作者 Yu Wang Guosong Qin Meng Xiao Yaping Liu Jun Yang Ruojun Zong Xinghui Yan Qiantao Zheng Hongyong Zhang Naipeng Hou Jing Yao Xiao Wang Yanfang Wang Jianguo Zhao Xue Zhang 《Science Bulletin》 SCIE EI CSCD 2021年第23期2343-2346,共4页
Acne inversa(Al,OMIM#142690)is an autosomal dominant chronic inflammatory disease of the hair follicles[1].Despite medications and procedures aimed at treating Al,patient responses vary widely to different therapies,a... Acne inversa(Al,OMIM#142690)is an autosomal dominant chronic inflammatory disease of the hair follicles[1].Despite medications and procedures aimed at treating Al,patient responses vary widely to different therapies,and no curative regimen or treatment is available[2].In 2010,our group first idenrified nicas-trin(NCSTN),an y-secretase component gene,as a pathogenic gene for familial Al patients[3]. 展开更多
关键词 NOTCH信号通路 猪模型 皮肤屏障 皮肤炎症 背部皮肤 表皮层 动物模型 点突变
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