果树组织中总RNA提取的新方法

本研究设计了一种新的RNA提取方法 ,解决了RNA提取时容易被降解和污染这一关键问题。通过加入Rnase抑制剂 ,消除了同外源RNase对RNA的降解 ,结合DNA难呈低盐溶液(140mmol·L -1NaCl)的原理 ,去除了DNA对RNA提取液的污染 ;先后使用酚和氯仿 ,有效地去除了蛋白质和酚类物的污染 ,利用抗氧化剂PVP和巯基乙醇 ,消除了内源酚类物质氧化变色对病毒RNA逆转录的影响。采用上述方法可以在4～5h内得到纯度高、含量大、完整性好的果树总RNA ,并获得了逆转录活性较强的病毒RNA ,同时使提取RNA的成本降低。这些方法对苹果、葡萄、桃、樱桃等果树总RNA的提取均适用。

苔藓植物DNA提取方法研究

提取高质量的 DNA是对苔藓植物遗传多样性进行研究的基础。该文以苔藓植物为试材 ,用 5种方法 ,即快速提取法、改良 CTAB法、CTAB法、SDS法及高盐法 (第一种为自行设计 ,第二种是对原有方法的改进 )对苔藓植物 DNA提取方法进行了比较研究。结果表明 ,快速提取法和改良 CTAB法是 2种适合于苔藓植物 DNA提取的方法。这 2种方法提取的 DNA浓度和纯度均比较高 ,凝胶电泳显示无明显降解现象 ,适宜作为 PCR扩增的模板 ,并成功地进行了 RAPD扩增。

李矮缩病毒RT-PCR方法建立及检测应用

以感病和健康指示植物GF305的总RNA为模板,进行cDNA的合成和PCR扩增,结果从感病材料中扩增出与预期的172bp大小一致的目的片段,而健康的材料无此扩增产物。对此PCR扩增产物克隆测序,进一步佐证了RT-PCR检测结果。经过多次试验验证该检测体系,都可得到很好的重演性,从而建立了李矮缩病毒快速、灵敏、准确的RT-PCR检测技术,并进行了实际应用。

逆转录-聚合酶链式反应检测果树RNA病毒

为调查主要果树携带苹果褪绿叶斑病毒 (ACLSV)、苹果茎沟病毒 (ASGV)、苹果茎痘病毒 (ASPV)和李属坏死环斑病毒 (PNRSV)的情况 ,以指示植物为试材 ,优化了四种病毒的逆转录 -聚合酶链式反应 (RT—PCR)检测体系。使用该优化体系检测了苹果树、樱桃树、桃树中携带上述四种病毒的情况。结果 :建立了特异性强、灵敏度高、成本低的RT—PCR检测体系 ;同时又证明主要果树被这几种病毒单独感染和复合感染的程度均较高。

应用RT-PCR方法检测桃和樱桃及其组培苗上的PNRSV和PDV

报道了PNRSV和PDV的RT-PCR检测的优化体系。利用该体系在北京和大连地区对露地桃树和樱桃树以及甜樱桃茎尖组培苗携带PNRSV和PDV的情况进行了调查,结果表明被检材料这2种病毒的感染率均较高,但程度不同。

20世纪果树病毒检测技术的回顾与展望

简要阐述了果树病毒对果树生产的危害 ,详细介绍了果树病毒检测技术的原理、方法和各自特点 ,并对果树病毒检测技术的发展前景进行了展望。

苹果花叶病毒RT-PCR检测技术

根据苹果花叶病毒的外壳蛋白基因序列设计、合成引物,以带毒和不带毒苹果品种国光的总RNA为模板,进行cDNA的合成和PCR扩增,结果从感病材料中扩增出与预期的161 bp大小一致的目的片段,而健康的材料无此扩增产物。对此PCR扩增产物克隆测序,进一步佐证了RT-PCR检测结果。经过多次试验验证该检测体系,都可得到很好的重演性,从而建立了ApMV快速、灵敏、准确的RT-PCR检测技术。

中国东北15种藓类植物RAPD分析及其分类学意义

本研究选用 1 5种东北藓类植物 ,其中塔藓、赤茎藓、垂枝藓、拟垂枝藓、羽平藓、木藓、万年藓等为北半球广泛分布的大型藓类 ,而褶叶藓、粗枝藓、球蒴金发藓等则是东亚特有种。在野外调查和采集的基础上 ,进行RAPD分析 ,旨在从DNA水平上对它们的亲缘关系和分类问题加以研究 ,为它们的分类问题和亲缘关系提供分子证据。结果 :从分子水平上进一步验证了 1 5种东北藓类植物形态分类的正确性。不同种类分别聚在金发藓目 (Polytrichinales) ,变齿藓目 (Isobryales)和灰藓目 (Hypnobryales)中 ,与现采用分类系统一致。东北特产属褶叶藓属 (Okamuraea)和粗枝藓属(Gollania)与垂枝藓科 (Hyitidiaceae)植物关系较近 ,而赤茎藓 (Pleurozium)与绢藓 (Entodon)有一定亲缘关系。因此 ,将赤茎藓置于塔藓科 (Hylocomiaceae)是合适的。

应用RT-PCR检测歇马杏李属坏死环斑病毒

利用作者已建立的PNRSV RT-PCR检测体系对辽宁省大连市地方特产歇马杏田间植株携带PNRSV的情况进行了调查,结果表明被检植株PNRSV的感染率达83.33%,但带毒程度不同。

逆转录—聚合酶链式反应技术检测“歇马杏”李矮缩病毒

为选择不携带主要病毒的植株,利用作者已建立的PDVRT-PCR检测体系对辽宁省大连市地方特产“歇马杏”田间植株携带PDV的情况进行了调查,结果表明,被检植株PDV的感染率达90%,但程度不同。

苹果褪绿叶斑病毒检测:PCR技术与ELISA技术灵敏度比较

苹果褪绿叶斑病毒（ＡＣＬＳＶ）是感染仁果类和核果类果树的重要病毒．作者应用ＲＴ－ＰＣＲ技术和ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ技术成功地检测了该病毒，并对指示植物中感染该病毒的检测结果进行了报道．试验结果表明，ＲＴ－ＰＣＲ技术的检测灵敏度是ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ技术的８０００倍．

科学管理 发挥生命科学工作室的积极作用

生命科学代表着现代自然科学的前沿,对于21世纪的大学生,了解并掌握必要的生命科学知识是培养自己具有创新思维和创新能力高素质人才的重要环节,对于自己未来的发展与提高都是十分有益的。生命科学工作室是普及生命科学知识的平台,是进行生命科学研究工作的基地。扼要论述了通过科学管理,大连大学生命科学工作室在教学、科研、人才培养等工作中所发挥的积极作用。

分子标记在苔藓植物上的应用

本文介绍了几种分子标记的特点和基本原理,概述了分子标记技术在苔藓植物上的应用和研究进展,评价了它们的应用前景和存在的问题.

三种DNA片段回收纯化方法的比较

本文采用三种方法对苹果褪绿叶斑病毒RT-PCR的特异DNA片段进行了回收纯化。结果表明:用普通琼脂糖替代低融点琼脂糖,回收纯化后产物的浓度及纯度与低融点琼脂糖法基本一致,完全可以用普通琼脂糖替代低融点琼脂糖进行DNA片段的回收纯化,从而降低成本,简化操作.玻璃奶法的回收纯度明显高于低融点琼脂糖法和普通琼脂糖法,且更快速安全.

迷你蝴蝶兰花梗侧芽组织培养技术的研究

筛选出迷你蝴蝶兰花梗侧芽组织培养过程中的最适增殖培养基和生根培养基。利用无菌操作技术,将蝴蝶兰花梗侧芽进行繁殖。通过本研究方法最终获得了蝴蝶兰组织培养过程中最适的增殖培养基和最适的生根培养基。最适增殖培养基为1/2MS+6-BA 8.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂8 g/L+蔗糖30 g/L+香蕉泥30 g/L+活性炭2 g/L;最适生根培养基为1/2MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.8 mg/L+琼脂8 g/L+蔗糖30 g/L+香蕉泥30 g/L+活性炭2 g/L。

山楂过氧化物同工酶的研究报告

以山楂属100个品种为试材,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析其过氧化物同工酶酶谱特征与分类上的关系.研究结果表明:山楂过氧化物同工酶酶谱特征与其自然分类有着密切的联系,可以作为山楂属植物分类的重要依据之一。

苔藓植物与分子生物学标记技术

介绍了随机扩增多态性DNA (RAPD)、限制性片段长度多态性 (RFLP)、DNA扩增指纹(DAF)、扩增片段长度多态性 (AFLP)、序列特异扩增区域 (SCAR)、序列标志位点 (STS)、微卫星DNA(SSR)、DNA序列测定 (DNASequencing)和同工酶 (Isoenzyme)分析技术等 9种分子生物学标记技术的特点和基本原理 ,概述了分子生物学标记技术在苔藓植物上的应用和研究进展 ,评价了它们的应用前景和存在的问题。

甜樱桃砧木‘Colt’小茎尖离体再生体系的建立

[目的]建立甜樱桃砧木Colt的离体培养体系.[方法]采取小茎尖离体培养的方法.[结果]在茎尖分化培养中,合适的培养基为1/2MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L IBA.在增殖培养中,经过筛选认为,最佳培养基为1/2MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L IBA+0.5 mg/L GA3,增殖系数高,植株生长势旺,增殖阶段最适的pH值为5.2～6.0.最适的蔗糖浓度是2%～3%.生根培养阶段,培养基1/2MS+0.5 mg/L IBA上试管苗的生根效果最好,生根率高.[结论]对茎尖培养各个阶段的多种影响因素组合进行了研究,初步建立了一套较为完整的甜樱桃砧木Colt的小茎尖培养体系.

采用RT-PCR技术检测甜樱桃“红灯”上的PNRSV

[目的]调查大连市特色水果品种甜樱桃“红灯”的田间植株携带PNRSV的情况．[方法]利用作者已建立的PNRSV RT-PCR检测体系．[结果]被检植株PNRSV的感染率达100％,但程度不同．[结论]对于其中感染PNRSV较轻的植株可以作为今后培育无PNRSV苗木的原材料．

省精品课程《普通生物学》课程建设的探索与实践

精品课程建设对于高校的专业建设和人才培养质量的提高具有十分重要的意义。该文从教学内容的改革与建设、教学方法和手段的改革与建设、考核与评价方式的改革与建设等方面介绍了辽宁省精品课程《普通生物学》课程建设的过程与成果。