沙棘总黄酮对活性氧自由基的清除作用

用ESR自旋捕集技术研究了沙棘总黄酮(TFH)对活性氧自由基(AOR)的清除作用,并用化学发光(CL)法测定了该药对多形核白细胞(PMN)产生CL的影响。结果表明1.7mg/L TFH对PMA刺激PMN生成的AOR有明显清除作用;TFH(0.03～3mg/L)对黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统生成的O^(2·)有显著剂量依赖性的清除作用。该药对光照核黄素产生O^(2·)的清除作用较弱。TFH(3mg/L)对Fenton反应生成的OH·有明显清除作用。TFH(1mg/L)显著抑制PMN产生的CL。该药对O^(2·)的清除作用明显强于VitE。

活性氧参与一氧化氮诱导的神经细胞凋亡

采用激光共聚焦成像技术 ,用氧化还原敏感的特异性荧光探针 (DCFH DA和DHR12 3)直接研究了一氧化氮供体S 亚硝基 N 乙酰基青霉胺 (SNAP)诱导未成熟大鼠小脑颗粒神经元凋亡过程中的细胞胞浆、线粒体中活性氧水平的变化 ,发现神经细胞经 0 5mmol/LSNAP处理 1h后 ,细胞胞浆及线粒体中活性氧水平大大增加 .一氧化氮清除剂血红蛋白能够有效抑制细胞胞浆、线粒体中活性氧的产生 ,防止细胞凋亡 .外源性谷胱甘肽对细胞也具有良好的保护作用 ,而当细胞中谷胱甘肽的合成被抑制后 ,一氧化氮的神经毒性大大增强 .实验结果表明一氧化氮通过促进神经细胞产生内源性活性氧而启动细胞凋亡程序 ,而谷胱甘肽可能是重要的防止一氧化氮引发神经损伤的内源性抗氧化剂 .

脂溶性茶多酚抗氧化特性的研究

从化学、仿生物、细胞三个层次，水溶、脂溶两种体系研究了脂溶性茶多酚（ＬＴＰ）的抗氧化特性，并与维生素Ｅ（ＶＥ ），绿茶多酚（ＧＴＰ）等进行了比较⒚结果表明：对水溶性体系中的·ＯＨ，巨噬细胞呼吸爆发产生的氧自由基的清除效果为ＧＴＰ＞ ＬＴＰ＞ ＶＥ⒚对大分子稳定的二苯基苦基肼基（ＤＰＰＨ）自由基，ＬＴＰ，ＧＴＰ效果接近且均显著优于ＶＥ⒚在膜体系中，ＧＴＰ对Ｆｅ２＋ 诱导的膜脂质过氧化的抑制作用优于ＬＴＰ，ＶＥ⒚而ＶＥ 对２，２＇偶氮２，４二甲基戊腈（ＡＭＶＮ）诱导的膜脂质过氧化的抑制作用显著优于ＬＴＰ， ＧＴＰ，当浓度大于５０ μｇ／ｍ Ｌ时，ＬＴＰ的抑制作用保持在２５％ 左右并显著优于ＧＴＰ⒚ＬＴＰ基本保留了原有茶多酚优良的抗氧化特性，在脂溶性体系中效果较好⒚同时给出了抗氧化剂在各体系中 ５０％抑制率或清除率时的浓度，即ＩＣ５０

葡萄籽中多酚类物质对氧自由基清除作用的ESR研究

用ＥＳＲ 自旋捕集技术研究了从葡萄籽分离的单体、二聚体和三聚体等多酚类物质对羟基自由基和超氧阴离子的精除作用，并与化学发光法的测定结果进行了比较，得到了较一致的结果，证明葡萄籽中多酚类物质对氧自由基的确有较好的清除作用。

用自旋捕集技术研究氟化物刺激人多形核白细胞呼吸爆发产生的活性氧自由基

用ESR波谱研究证明,F^-刺激人多形核白细胞(PMN)呼吸爆发产生活性氧自由基(O_2^-和·OH),同时消耗O_2.用DMPO自旋捕集技术表明,在高浓度F^-刺激下PMN产生DMPO-OOH加合物;在低浓度F^-刺激下则产生DMPO-OH;在适中浓度F^-刺激下PMN先产生DMPO-OOH,随浓度降低变为DMPO-OH.用超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的实验确定氧自由基主要来自O_2^-.用CTPO和CrOX的自旋探针测氧法证明,PMN受F^-刺激产生氧自由基时消耗的O_2是细胞外介质中的O_2.

银杏叶提取物对自由基所致脑神经细胞损伤的保护作用研究

从细胞分子水平，采用大脑皮层神经细胞分离技术，自旋标记技术，酶学方法及细胞染色技术探讨自由基对神经细胞的损伤及ＥＧｂ保护作用。结果显示，用自由基攻击的细胞其自旋标记膜的序参数Ｓ，旋转相关时间τｃ及膜蛋白巯基的Ｓ／Ｗ比对照组高（Ｐ＜０．０５），提示：受自由基攻击的细胞膜，其流动性比正常减低，且蛋白质构象发生了改变。加ＥＧｂ保护后，可减少自由基引起的膜流动性及蛋白质构象改变，起到保护神经细胞的作用。经·ＯＨ攻击的神经细胞，其ＬＤＨ活性及死细胞比率都比对照组高，而ＥＧｂ对此有保护作用。本文结果说明一定浓度ＥＧｂ可保护大脑皮层神经细胞免受自由基的损伤。

溶血磷脂酸损伤小脑颗粒神经元并诱导细胞凋亡

目的 研究溶血磷脂酸 (LPA)对原代培养大鼠小脑颗粒细胞的细胞毒性作用及其损伤机制。方法 将原代培养的大鼠小脑颗粒细胞暴露于不同剂量LPA中 ,测定噻唑蓝 (MTT) ;应用流式细胞仪、透射电镜、激光共聚焦显微镜等技术观察细胞的凋亡率、凋亡细胞的核形态及细胞胞质和线粒体内活性氧自由基 (ROS)的形成。结果 LPA对小脑颗粒细胞的损伤呈剂量依赖效应。经 5 0 μmol/LLPA作用后 ,细胞生存率为正常细胞的 (5 4.8± 11.5 ) % ,细胞凋亡率达 (4 0 .5± 2 .3) % ,细胞染色质发生浓缩和形成凋亡小体 ,细胞胞质和线粒体内ROS形成增加 ,而经四甲基吡嗪 (TMP)预处理 ,细胞生存率升至 (84.7± 8.8) % ,细胞凋亡率减至 (16 .7± 5 .8) % ,细胞核形态无明显改变 ,细胞胞质和线粒体内ROS形成被抑制。结论 LPA具有神经毒性作用。通过增加线粒体内ROS形成 ,继而诱导神经元凋亡可能是其损伤机制之一。

褪黑素拮抗鼠肝线粒体自由基产生的实验研究

目的观察褪黑素拮抗氧自由基和对膜脂质过氧化损伤的保护作用。方法用电子自旋共振技术，以ＤＭＰＯ和４－ＰＯＢＮ为捕集剂，捕集Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的羟自由基和Ｆｅ２＋启动的鼠肝线粒体膜脂质过氧化产生的脂类自由基，以脂肪酸自旋标记物５－Ｄｏｘｙｌ和１６－Ｄｏｘｙｌ标记线粒体膜，研究脂质过氧化损伤后膜流动性的变化。结果褪黑素对羟自由基和脂类自由基有良好的清除作用，５０％清除浓度分别为１８６μｍｏｌ·Ｌ－１和４５０μｍｏｌ·Ｌ－１，而且在５００μｍｏｌ·Ｌ－１浓度范围内能防止脂质过氧化引起的线粒体膜流动性降低。结论褪黑素是一个有效的抗氧化剂，能防止生物膜的脂质过氧化损伤。

用ESR研究缺血再灌注组织和多形核白细胞产生的NO自由基

总结了近年来我们实验室用低温顺磁共振（ESR）技术在生物体系，特别是在组织缺血再灌注和多形核白细胞中研究NO自由基的技术，波谱解析和所得到的结果．

巨噬细胞产生NO.和O_2^-自由基的分子机理

建立了用顺磁共振（ＥＳＲ）和化学发光技术测定巨噬细胞产生ＮＯ和氧自由基的方法．捕捉到了巨噬细胞受佛波酯刺激产生的ＮＯ．和Ｏ－２自由基．测定了在不同浓度Ｌ－精氨酸存在时佛波酯刺激后巨噬细胞产生的ＮＯ自由基．研究了巨噬细胞产生的ＮＯ和氧自由基的分子机理．结果表明巨噬细胞不仅产生氧自由基而且产生ＮＯ自由基．ＮＡＤＰＨ氧化酶产生氧自由基的部位位于巨噬细胞膜的外侧．ＮＯ合成酶活化产生ＮＯ自由基比ＮＡＤＰＨ氧化酶活化产生氧自由基晚几分钟．

褪黑激素对线粒体膜脂质过氧化损伤的保护作用

褪黑激素对线粒体膜脂质过氧化损伤的保护作用李明阳田侠侯京武＊赵保路＊忻文娟＊（空军总医院老年病科，北京１０００３６）褪黑激素（Ｍｅｌａｔｏｎｉｎ）是体内主要由松果体分泌的一种激素，有研究报道褪黑激素具有很强的抗氧化作用，能有效地清除羟自由基及烷过氧自...

用DETC铁络合物捕捉生物组织NO自由基的ESR波谱解析

一氧化氮自由基具有重要的生物功能．但目前使用的自旋捕捉剂都不能有效捕捉细胞和组织体系产生的一氧化氮自由基．实验表明ＤＥＴＣ（ｍｏｎｏｎｉｔｒｏｓｙｌｄｉｔｈｉｏｃａｒｂａｍａｔｅ）铁络合物可以有效捕捉生物体系产生的一氧化氮自由基，但用ＤＥＴＣ在细胞和组织体系检测一氧化氮自由基需要在低温检测．生物组织在低温的ＥＳＲ波谱和ＤＥＴＣ铁络合物捕捉的一氧化氮自由基的ＥＳＲ波谱互相重叠，使谱线解析有一定困难．本文分析了用ＤＥＴＣ铁络合物检测细胞和组织体系产生一氧化氮自由基在低温可能出现的ＥＳＲ信号的ｇ值和超精细分裂常数．提出了克服使用ＤＥＴＣ铁络合物检测生物体系一氧化氮自由基困难的方法．

茜草双脂和S-2-(3-氨丙基胺)乙基硫代磷酸对人多形核白细胞吞噬作用中化学发光和电子顺磁共振的影响

应用化学发光法和电子顺磁共振自旋捕集技术观察茜草双脂和WR2721对人多形核白细胞(PMN)受刺激剂PMA刺激后产生的氧自由基的清除作用。结果表明茜草双脂和WR2721对人PMN受PMA刺激后产生的氧自由基有较明显的清除作用,茜草双脂对水溶液体系中的O_2和~·OH的清除百分率分别为52.8与33.4,WR2721对水溶液体系O_2和~·OH的清除百分率分别为14.5与42.6。

茶多酚及其单体结构自由基的ESR研究

通过ＥＳＲ检测方法研究了邻苯三酚、茶多酚及其四种单体的自氧化醌类自由基的ＥＳＲ波谱信号。

冠心病心力衰竭与体内氧自由基关系初探

本研究用化学发光法和TBA法分析测定冠心病心力衰竭患者多形核白细胞(PMN)受促癌剂佛波醇(PMA)刺激后,呼吸爆发产生的活性氧自由基含量及血中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量,以期探讨其在心力衰竭的防治及发病学中的意义。

用自旋捕集和电子自旋共振技术观察雷公藤对氧自由基的影响

用自旋捕集和电子自旋共振技术及化学发光法观察了雷公藤二萜类成分内酯醇（T(10)）和雷酚内酯（D7）对水溶系统与细胞体系氧自由基的影响。结果提示在黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统中，T(10)和D7对O2信号表现明显抑制而不抑制黄瞟呤氧化酶活性。在Fenton反应系统，T(10)对OH无清除作用D7则能部分清除OH。T(10)μg／ml、D7，2μg／ml和3μg／ml时能抑制人多核白细胞的化学发光。且不影响其氧耗，但T(10)在3μg／ml则使多核白细胞的化学发光增强。结果证实，二种成分均有一定清除氧自由基活性的能力。

慢性肾衰病人血清和红细胞抗氧化能力的ESR研究

用电子自旋共振(ESR)自旋捕集技术研究了正常人和肾衰病人血清和红细胞对黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系产生的氧自由基的作用.结果发现:(1)正常人血清和红细胞能够有效地清除超氧阴离子自由基(O_2^-),而肾衰病人血清和红细胞清除O_2^-的能力明显比正常人血清和红细胞低;(2)正常人血清能有效地把黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系产生的O_2^-转化为·OH,病人血清在这方面与正常人血清有显著性差异.

五味子酚对突触体膜脂质过氧化损伤保护作用的ESR研究

本文用自旋标记方法研究了经过脂质过氧化作用后脑突触体膜的生物物理特性的变化以及抗氧化剂五味子酚对膜的保护作用．用脂肪酸标记物５－ＤＯＸＹＬ和１６－ＤＯＸＹＬ标记研究了膜脂流动性，结果表明，受脂质过氧化损伤后膜脂流动性降低；用马来酰亚胺自旋标记研究了脂质过氧化对脑突触体膜蛋白上巯基的影响，结果发现，脂质过氧化后，ＥＳＲ波谱的弱强固定化比值Ｗ／Ｓ增大，总的效应表现为膜蛋白上巯基结合位点裸露程度变大。加入五味子酚后能抑制膜流动性的降低，且能使弱强固定化比值Ｗ／Ｓ趋向于未受脂质过氧化损伤的突触体膜的弱强固定化比值Ｗ／Ｓ，证明了五味子酚能降低脂质过氧化对膜的损伤程度，对膜起保护作用。

冬凌草甲素对活性氧自由基的清除作用(英文)

目的：研究冬凌草甲素对不同模型系统产生的活性氧自由基的清除作用。方法：自由基检测用电子自旋共振自由基旋捕集技术和化学发光法。结果：二种方法检测均发现Ｏｒｉｄ明显清除黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶系统产生的超氧自由基（Ｏ－２）以及Ｆｅｎｔｏｎ反应中的羟自由基（·ＯＨ）．Ｏｒｉｄ１７０ｍｏｌ／Ｌ对Ｏ－２和·ＯＨ的清除率分别为４９４％和７５２％。Ｏｒｉｄ对多形核白细胞（ＰＭＮ）呼吸爆发时产生活性氧自由基同样显示明显清除作用。在本实验条件下，Ｏｒｉｄ并不影响ＰＭＮ呼吸爆发时的氧消耗。结论：Ｏｒｉｄ可能是一个抗氧化剂。

一氧化氮损伤神经细胞线粒体并诱导细胞凋亡

研究了一氧化氮对原代培养的大鼠小脑颗粒神经元的细胞毒性及其作用机理 .实验结果表明 ,一氧化氮供体S 亚硝基 N 乙酰基青霉胺 (SNAP ;5 0 0 μmol/L)可诱导未成熟小脑颗粒神经元凋亡 .流式细胞分析及HPLC分析表明 ,神经细胞经SNAP处理后线粒体跨膜电位及细胞内ATP含量均明显下降 .一氧化氮清除剂血红蛋白可有效保护线粒体 ,防止细胞凋亡 .实验结果提示 ,一氧化氮通过抑制线粒体呼吸链的活力、降低细胞内ATP含量而启动细胞凋亡程序 .