4种新污染物对5种不同细胞的联合毒性研究

随着人类社会的发展,新污染物的种类逐渐增多。目前新污染物的毒性研究主要集中于单一毒性的评价,由于人类可能通过各种途径暴露于新污染物的混合物,因此评估新污染物混合物对人类健康的潜在风险越来越受到关注。本研究采用5种常见的体外毒性研究细胞模型——人正常肝细胞L02、小鼠正常肝细胞AML12、人肾小管上皮细胞HK2、大鼠胶质瘤细胞C6、小鼠海马神经元细胞HT22,测定不同浓度炔雌醇(ethinyl estradiol,EE2)、双酚A(bisphenol A,BPA)、邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)、全氟辛酸(perfluorooctanoic acid,PFOA)对5种细胞的相对生长抑制率,分别计算污染物在不同生长抑制率下的效应浓度(F%-maximum effective concentration,EC F,其中F=10、20、25、33、50)。按照EC 50∶EC 50(半数效应浓度)、E C 33∶EC 33∶EC 33(生长抑制率为33%下的效应浓度)、EC 25∶EC 25∶EC 25∶EC 25(生长抑制率为25%下的效应浓度)的比例分别进行二元、三元、四元等毒性比例混合,以1/2为稀释因子进行浓度梯度处理,计算抑制率并拟合实际作用曲线,采用浓度加和(concentration addition,CA)模型和独立作用(independent action,IA)模型预测不同污染物之间的联合效应。4种污染物对5种细胞的生长抑制均存在剂量-效应关系。暴露48 h后,在所有细胞中EE2的毒性最大,PFOA的毒性最小,HK2细胞对4种污染物的敏感性最弱。在二元组合中,EE2与BPA的混合物在2种神经细胞C6与HT22上都存在明显的协同作用。随着混合物的组分增加,三元和四元混合物更易产生相加与拮抗作用。4种污染物对所有的受试细胞都具有一定的毒性,其联合效应会随着组分及浓度等的变化而不同。

兽药抗生素对生态环境的混合毒性研究进展

抗生素是环境中普遍存在的污染物,畜牧水产养殖是其主要来源之一.环境中可能同时存在多种抗生素残留,因此单一药物的毒性评价难以反映抗生素对生态环境的影响,应探究其混合物的毒性效应.本文在总结大量文献的基础上,介绍了兽用抗生素的残留现状,总结了兽用抗生素对生态环境的混合毒性研究进展,讨论了兽用抗生素残留对土壤生物和水生生物的生态毒性效应,最后对兽用抗生素的环境混合毒性研究进行了展望.

恩诺沙星、喹烯酮、土霉素和硫酸多黏菌素B对细胞的联合毒性研究

【目的】探讨常见兽药恩诺沙星(ENR)、喹烯酮(QCT)、土霉素(OTC)和硫酸多黏菌素B(PMB)对细胞的单一及联合毒性效应。【方法】以L02、AML12、Marc145、HEK293T、TM3和SK-N-SH细胞为模型,通过结晶紫染色获得不同浓度下4种药物对6种细胞的相对抑制率,进行浓度-效应方程拟合,并分别计算药物在不同生长抑制率下的效应浓度(EC_(F),其中F=10、20、25、33、50)。按EC_(50)∶EC_(50)、EC_(33)∶EC_(33)∶EC_(33)、EC_(25)∶EC_(25)∶EC_(25)∶EC_(25)的比例分别进行二元、三元、四元药物等毒性比混合,以1/2为稀释因子进行浓度梯度处理,计算抑制率并拟合实际作用曲线,采用浓度加和模型(CA)和独立作用模型(IA)法评价不同药物之间的联合效应。【结果】4种药物对6类细胞的生长抑制均存在剂量-效应关系,无论在哪种细胞中,QCT的毒性最强,PMB毒性最小。4种抗菌药两两组合出现协同的概率较高,尤其是与OTC的组合,OTC+QCT在6种细胞中均有明显的协同抑制。TM3细胞中易出现相加而对肝细胞和肾细胞协同的可能性更大,对不同的细胞同一组合的效应变化可能不同。在三元和四元组合中,相加效应出现的概率上升且变化更为复杂,易随浓度的变化出现多段效应。【结论】常见兽药对肝脏、肾脏、神经及生殖细胞具有一定毒性,且这些药物的联合毒性效应不是简单的相加,组分、浓度等会影响联合效应,在应用时要注意配伍禁忌。

环丙沙星和恩诺沙星联合肝毒性及其机制研究

研究动物性食品中常见抗菌药环丙沙星(Ciprofloxacin,CFX)和恩诺沙星(Enrofloxacin,ENR)残留联合肝毒性及其分子机制。以小鼠肝实质细胞AML12细胞为模型,通过结晶紫染色法与联合指数计算确定CFX、ENR引起协同毒性的浓度比,并使用蛋白免疫印迹法、Annexin V-FITC/PI双染法等方法探究两者联用产生协同毒性的分子机制。结果显示:当CFX、ENR以浓度比2︰1作用于AML12细胞时,可显著抑制AML12细胞增殖,诱导细胞凋亡,产生协同毒性。CFX可激活内质网应激,从而上调Bim表达量。同时ENR抑制Akt的激活,从而诱导Bim的转录。两者联用后显著上调Bim蛋白的表达(P<0.01),激活caspase-3,切割多聚DAP-核糖聚合酶(PARP),最终诱导caspase依赖型细胞凋亡。结论:CFX与ENR可通过诱导AML12细胞发生caspase依赖型细胞凋亡,从而产生协同毒性。