王辉武从“心神-使道”论治肿瘤相关性抑郁经验

王辉武认为恶性肿瘤患者在历经怀疑、确诊、治疗、康复(衰竭)的病程中,心神的巨大变化导致神失调控最终发展为肿瘤相关性抑郁(TRD),其核心病机为“使道不通,心神失养”。他提出治疗TRD之良策在于“通使道,养心神”,以“超药物疗法”直接调伏心神;以四气、治气、通阳等治气调神“通使道”;以活血化瘀、祛湿化痰、养血滋阴法治形调神“通使道”;以扶正抗郁为主兼以祛邪抗郁为辅,达到“御神”之效。综合施治,屡获佳效。

恶性腹水采用针灸联合顺铂腹腔灌注治疗的临床观察

目的:观察药灸、针刺联合顺铂腹腔内灌注治疗恶性腹腔积液的临床疗效。方法:67例确诊的恶性肿瘤伴恶性腹水患者,以随机数表法分为观察组(35例)和对照组(32例)。两组均行腹腔穿刺置管引流腹水,对照组单纯以顺铂腹腔内灌注化疗,每周1次,观察组在此治疗上联合每日药灸神阙穴,同时针刺中脘、归来、水分、水道、关元、内关等穴,治疗2周为1个疗程。结果:腹水治疗的有效率和控制率在观察组分别为60.0%(21/35)和88.6%(31/35),分别高于对照组的53.1%(17/32)和81.2%(26/32),观察组较对照组的中医证候改善更明显,患者体能状态更好,且观察组较对照组提高了尿量(P<0.05)。结论:药灸、针刺联合顺铂腹腔内灌注能提高恶性腹腔积液的疗效,改善症状,提高生活质量。

^(131)I标记CD133单链抗体对人肝癌CD133^+ HepG2干细胞的抑制作用

目的:研究131I标记CD133单链抗体(single chain rariable fragment,ScFv)在体外对人肝癌CD133+HepG2干细胞的抑制作用。方法:免疫磁珠分选HepG2细胞,流式细胞术检测分选前后HepG2细胞的CD133表达率,克隆形成实验及体内成瘤实验验证CD133+HepG2细胞的"干性"。氯胺T法131I标记CD133 ScFv并测定标记率、比活度、放射性浓度。将分选出的CD133+HepG2细胞分为131I-CD133抗体治疗组、131I治疗组、CD133抗体治疗组和131I+CD133抗体治疗组,MTT法检测各组中对CD133+HepG2细胞生长抑制的最适剂量和不同药物在12、48、72 h三个时间点对CD133+HepG2干细胞的生长抑制作用,流式细胞术检测各组细胞周期的变化。结果:分选的HepG2细胞的CD133表达率显著高于未分选细胞[(97.71±1.13)%vs(1.52±0.78)%,t=1.13、P=0.000]。CD133+HepG2细胞相对于CD133-HepG2细胞具有更强的体外成球、克隆形成能力[(45.03±1.35)%vs(7.4±0.54)%;t=3.92,P=0.000]和体内成瘤能力。131I-CD133 ScFv的标记率为88.92%,放射化学纯度为98.63%。当131I为3.7 MBq/100μl、CD133抗体为1μg/100μl时,对CD133+HepG2细胞的抑制率最高,达(89.58±0.74)%;在此剂量下131I-CD133 ScFv治疗组对CD133+HepG2细胞生长抑制率显著高于其余各实验组,且呈时间依赖性。131I-CD133 ScFv治疗组G0/G1期细胞比例为(27.50±1.12)%,较其余各组均明显减少(P<0.05)。结论:成功制备的131I-CD133 ScFv在体外能有效抑制人肝癌CD133+HepG2干细胞的生长。

分离、鉴定CD133^+人肝癌干细胞以及^(131)I-CD133mAb对其生物学效应的影响

目的分离、鉴定CD133+人肝癌干细胞以及131I-CD133mAb对其生物学效应的影响。方法为选择最适的细胞系,流式细胞仪检测Huh-7和HepG2细胞中CD133表达率;磁珠分选Huh-7细胞,流式细胞仪检测分选后CD133表达率;体外成球、克隆形成实验及体内成瘤实验验证干细胞特性;氯胺T法制备131I标记CD133单克隆抗体(131ICD133mAb)并鉴定;取分选后的CD133+-Huh-7细胞、Huh-7细胞和HepG2细胞进行实验,将每种细胞分成4组(131ICD133mAb组、131I组、CD133mAb组、131I+CD133mAb组);MTT法检测各组对CD133+-Huh-7细胞生长抑制的最适剂量和各组在最适剂量作用后24、48、72 h对3组细胞生长抑制率;流式细胞仪检测131I-CD133mAb作用3组细胞72 h时细胞凋亡和细胞周期的变化。结果 Huh-7和HepG2细胞系CD133表达率分别为18.8%和5.2%,故选用Huh-7细胞进行分选;磁珠分选后CD133+-Huh-7细胞CD133的表达率为99.28%,与分选前比较差异有统计学意义(P<0.01)。CD133+-Huh-7细胞相对于CD133--Huh-7细胞具有更强的体外成球能力、克隆形成能力和体内成瘤能力。131I-CD133mAb标记率为87.92%,放射化学纯度为97.54%,具有较好的稳定性和免疫活性。当131I 4.8 MBq/100μL、CD133mAb 4.8μg/100μL时对CD133+-Huh-7细胞抑制率最高(P<0.05),取此放射性浓度进行实验。24、48、72 h时各组对CD133+-Huh-7细胞的抑制作用明显高于Huh-7和HepG2细胞组,131I-CD133mAb组对3种细胞生长抑制率明显高于其余各组,抑制率随时间的增加而升高(P<0.01)。131I-CD133mAb作用CD133+-Huh-7细胞72 h后凋亡率为31.21%,明显高于其余2组(P<0.05)。细胞周期检测结果显示CD133+-Huh-7细胞G0/G1期减少54.77%,明显高于其余2组(P<0.05)。结论 CD133+细胞具有肿瘤干细胞特性,131I-CD133mAb能特异性结合CD133+-Huh-7细胞,调控细胞周期和诱导细胞凋亡。

通络散浴疗联合隔物灸治疗铂类药物所致周围神经病变临床研究

目的:观察通络散浴疗联合隔物灸法治疗铂类药物所致周围神经病变的临床疗效。方法:100例采用随机数字表法分为观察组和对照组各50例。观察组用通络散浴疗联合隔物灸法治疗,对照组用温水浴疗联合隔物灸法治疗。结果:观察组起效时间、外周神经感觉传导速度提升均明显优于对照组(P<0.05),生活质量评分明显改善(P<0.05),肢端麻木、冰凉感症状改善、CIPN分级1级和2级的效果尤为明显(P<0.01)。结论:通络散浴疗联合隔物灸不仅能有效改善铂类化疗药物致CIPN的症状,提高生活质量,还能提高周围感觉神经神经传导速度。

中西医治疗化疗药物所治周围神经病变研究进展

化疗是恶性肿瘤综合治疗的重要方法，而化疗药物引起的周围神经病变（ chemotherapy induced peripheral neuropathy, CIPN ）是临床常见的并发症之一。引起CIPN的化疗药物主要包括铂类、微管蛋白抑制剂（紫杉类、长春碱类等）、烷化剂、氟尿嘧啶类等，临床大多表现为以肢体远端为主的对称性感觉、运动及自主神经功能障碍，下肢最为多见。初期常表现为肢体末梢的感觉过敏和感觉异常如烧灼感、疼痛感、麻木感，逐渐出现感觉减退，严重者肢体感觉消失，肌肉萎缩而瘫痪。现将近年来中西医治疗CIPN的研究进展综述如下。

两性霉素B通过调节HIF-1α活性抑制缺氧环境下食管癌Eca109细胞的侵袭迁移能力

目的研究在缺氧环境下,两性霉素B(AmB)对食管癌Eca109细胞侵袭迁移能力的影响及其可能的机制。方法取常规培养(37℃,5%CO2,95%空气)对数生长期Eca109细胞,分别加入0、1.25、2.5、5μg/ml的AmB,放入三气培养箱(37℃,3%O2,5%CO2,92%N2)中缺氧培养24 h;采用细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测各组细胞迁移及侵袭能力;采用Real-time PCR和Western Blot检测各组细胞HIF-1α、MMP-2和E-cadherin mRNA及蛋白水平的表达。结果与对照组(0μg/ml)比较,各AmB处理组Eca109细胞体外迁移能力均显著降低(P<0.05),Eca109细胞体外穿过Matrigel胶的细胞数量均显著减少(P<0.05);与对照组(0μg/ml)比较,各AmB处理组Eca109细胞MMP-2 mRNA及蛋白表达水平均显著下调(P<0.05),E-cadherin mRNA及蛋白表达水平均上调(P<0.05),HIF-1α蛋白水平均下调(P<0.05),HIF-1αmRNA水平无明显变化(P>0.05)。结论 AmB能抑制缺氧条件下食管癌细胞Eca-109细胞的侵袭迁移能力,其机制可能为通过调控HIF-1α及其下游MMP-2、E-cadherin的表达。

^(131)I-CD133mAb联合顺铂在体内外有效抑制人肝癌细胞的生长

目的观察131I-CD133mAb在体内外对高表达CD133抗原的Huh-7人肝癌细胞的靶向抑制作用。方法采用氯胺T法制备并鉴定131I-CD133mAb;流式检测Huh-7和HepG2细胞中CD133的表达,免疫组化检测瘤体内CD133的表达;实验设131ICD133mAb与顺铂(cisplatin,DDP)联用组、131I-CD133mAb组、DDP组及空白对照组。MTT法检测各组中不同药物处理对肝癌Huh-7细胞的生长抑制作用和计算每组药物的IC50值。成功构建人肝癌Huh-7细胞移植瘤模型,随机分为4组,1次/2 d给予尾静脉用药,连续2周,每周测量2次小鼠的体质量,测肿瘤的长径、短径。用药结束后处死小鼠,比较肿瘤的体积、质量,计算抑瘤率;HE染色法观察肿瘤组织病理学改变。结果131I-CD133mAb抗体标记率为90.25%,放射线化学纯度为97.78%;流式检测Huh-7细胞中CD133的表达为79.53%,明显高于HepG2细胞;免疫组化结果显Huh-7细胞CD133表达明显高于HepG2细胞;MTT法检测131I-CD133mAb+DDP组的细胞抑制率及体内抑瘤率明显高于131I-CD133mAb组、DDP组和空白对照组。结论131ICD133mAb+DDP在体内体外能有效地抑制高表达CD133抗原的肝癌细胞生长。

AG490对食管鳞癌Eca-109细胞增殖、凋亡及放疗敏感性的影响

目的研究Janus激酶抑制剂AG490对食管鳞癌Eca-109细胞增殖、凋亡及放疗敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法用不同浓度(0、25、50、100μmol/L)的AG490处理Eca-109细胞,采用MTT法检测细胞增殖,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,克隆形成实验检测细胞放疗敏感性,Western blot检测各组细胞Stat3、p-Stat3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与对照组比较,AG490各浓度组(25、50、100μmol/L)在AG490作用后第1～5天Eca-109细胞增殖减慢,呈量效-时效关系(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,AG490各浓度组(25、50、100μmol/L)在AG490作用48 h后Eca-109细胞凋亡率增加,呈量效关系(P<0.01)。与对照组比较,各剂量X射线照射后50μmol/L组细胞存活率降低,放射生物学参数SF2、D0、Dq、N值均降低(P<0.05),SERD0和SERDq值增加(P<0.05)。与对照组比较,AG49050μmol/L+4Gy组和AG490 50μmol/L组p-Stat3蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,AG490各浓度(50和100μmol/L)组Bcl-2的表达降低(P<0.05)、Bax的表达增加(P<0.05)。结论 AG490抑制Eca-109细胞增殖,增加细胞凋亡,增加放疗敏感性,其机制可能是通过阻断Stat3蛋白的活化,调控凋亡蛋白(Bcl-2和Bax)的表达。

放射性肺炎中医分期辨证论治

放射性肺炎是肺癌、食管癌和乳腺癌等胸部肿瘤的放射治疗后常见且危害较大的并发症,多由于大剂量、大面积照射引起,其发生率为29.6％～50.3％,表现为急性放射性肺炎和肺纤维化.放射性肺炎临床表现为刺激性咳嗽、气急、高热、胸闷,严重影响患者的生活质量.西医治疗本病主要采用抗菌素、激素以及抗凝血及抗组胺制剂等治疗,虽有一定疗效,但不良反应较大,因此不宜作预防性给药或长期使用.中医学认为本病属于“肺痿”范畴,《金匮要略·肺痿肺痈咳嗽上气病脉证治》云“热在上焦者,因咳为肺痿.肺痿之病,从何得之？师曰：或从汗出,或从呕吐,或从消渴,小便利数,或从便难,又被快药下利,重亡津液,故得之”.

健脾和胃合剂缓解胰腺癌伽玛刀放疗后胃肠道反应的临床观察

目的观察健脾和胃合剂缓解胰腺癌伽玛刀放疗后出现胃肠道反应的临床疗效。方法对60例行伽玛刀放疗的胰腺癌患者进行回顾性分析,采用随机分组法将患者分为实验组和对照组,伽玛刀放疗第1天起,实验组给予肌肉注射胃复安联合口服健脾和胃合剂治疗,对照组给予肌肉注射胃复安治疗。观察伽玛刀放疗过程中和放疗结束后7 d内两组缓解胃肠道反应的临床疗效。结果实验组胃肠道反应总控制率明显高于对照组(P<0.05)。结论健脾和胃合剂具有益气健脾、和胃降逆之功效,能有效缓解胰腺癌伽玛刀放疗后胃肠道反应,改善患者食欲。

CD133^+细胞的干性鉴定及^(131)Ⅰ-CD133抗体对其体内外抑制作用

目的:研究CD133+细胞的干性鉴定和131I-CD133抗体在体内外对人肝癌CD133+-HepG2干细胞的抑制作用。方法:氯胺T法制备并鉴定131I-CD133抗体;免疫磁珠(magnetic-activated cell sorting,MACS)分选CD133+-HepG2细胞;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测分选前后CD133表达率;体外克隆形成实验、成球实验和体内成瘤实验验证其干细胞特性;将分选出的CD133+细胞分组为CD133抗体、131I、131I-CD133抗体和131I+CD133抗体4个组,MTT法检测不同处理后不同组中CD133+细胞生长抑制率;成功构建人肝癌CD133+-HepG2移植瘤模型;随机分4组,1次/2 d给予尾静脉用药,共14次。4周后,处死小鼠,比较肿瘤的体积、质量、计算抑瘤率;HE染色观察肿瘤组织病理学改变。结果:131I-CD133抗体标记率为89.34%,放化纯度为98.21%。流式显示分选前后CD133表达率分别为(1.78±0.54)%和(98.46±0.97)%。成球实验、克隆形成实验和裸鼠成瘤实验显现CD133+细胞相对于CD133-细胞更具有干细胞特性。131I-CD133抗体治疗组体外对细胞抑制率及体内抑瘤率明显高于其余各实验组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:131I-CD133抗体在体内外均能有效抑制人肝癌CD133+-HepG2细胞的生长。

^(131)I-CD133mAb诱导CD133^+HepG2肝癌干细胞间质-上皮逆转分化

目的研究131I-CD133mA b可诱导CD133+Hep G2肝癌干细胞间质-上皮逆转分化(mesenchymal-epithelial transition,MET)及可能分子机制。方法 1用免疫磁珠分选法分选Hep G2人肝癌细胞,采用流式细胞术检测分选前后CD133的表达率,体外成球和体内成瘤实验鉴定其干细胞特性。2氯胺T法制备131I标记CD133mA b并用γ免疫计数器检测标记率、放化纯度。用不同剂量(0、2.4、4.8、9.6 MBq)的131I-CD133mA b作用CD133+Hep G2细胞,用Transwell侵袭实验检测侵袭能力,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平。结果流式细胞术显示分选前后CD133表达率分别为(7.21±0.05)%和(95.26±0.05)%。CD133+细胞体外成球和体内成瘤能力强于CD133-细胞。γ免疫计数器检测131I-CD133抗体标记率为86.97%,放化纯度为98.84%。Transwell侵袭实验示131I-CD133mA b各处理组(2.4、4.8、9.6 MBq)24 h细胞穿过Matrigel胶的细胞分别为(107.7±3.2)、(76.3±2.5)、(44.0±3.0)/视野,显著少于对照组(0 MBq,P<0.01)。Western blot结果显示,与对照组(0 MBq)相比,131I-CD133mA b(2.4、4.8、9.6 MBq)处理组N-cadherin和Vimentin的蛋白表达量降低(P<0.01),E-cadherin的蛋白表达量增加(P<0.01)。结论在体外131I-CD133mA b作用于人肝癌CD133+Hep G2细胞可诱导间质-上皮逆转分化。

中医综合外治法治疗铂类化疗药物周围神经毒性临证探讨

周围神经毒性是铂类药物化疗后常见的并发症,影响患者生活质量及治疗进程,由于其神经毒性机制尚未明确,目前尚无标准的治疗方法。中医外治法近年在防治化疗毒副作用方面成果显著。自拟方通络散浴疗联合隔物灸治疗铂类周围神经毒性避免了药物胃肠道反应及肝肾损害,简便安全,在临床应用中取得了较为满意的疗效。

氟哌噻吨美利曲辛片致谵妄2例病例报道

氟哌噻吨美利曲辛片（黛力新）是一种由盐酸氟哌噻吨和盐酸美利曲辛组成的复方制剂。氟哌噻吨，一种噻吨类神经阻滞剂，小剂量具有抗焦虑、抗抑郁作用。美利曲辛是一种双相抗抑郁剂，低剂量应用时，具有兴奋特性。黛力新用于治疗轻、中度抑郁和焦虑，尤其是治疗心身疾病伴发的焦虑抑郁。近年来该药在癌性疼痛的联合治疗中也有较好运用，且取得了良好的治疗效果。临床上虽已广泛应用，但相关不良反应报道较少，现作者就诊治过程中出现的2例以谵妄为主要表现的不良反应报道如下。