1株羊源多重耐药肺炎克雷伯菌噬菌体的生物学特性及全基因组分析

【目的】多重耐药病原菌的出现对公共卫生安全构成严重威胁,本试验拟对1株羊源多重耐药肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体进行生物学特性和基因组特征分析,为寻找可用于防治肺炎克雷伯菌感染的噬菌体制剂提供参考。【方法】以羊源多重耐药肺炎克雷伯菌分离株YH-2为宿主菌,采用双层琼脂平板法从粪污样品中分离纯化噬菌体,通过透射电镜观察其形态;测定噬菌体宿主谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、热稳定性、酸碱耐受性等生物学特性;基于全基因组测序对其基因组特点进行分析。【结果】试验成功分离到1株肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体,命名为vB_KpnP_PYH-2(简称PYH-2),电镜观察发现PYH-2属于短尾噬菌体科,其噬菌斑中心透亮,周围有晕圈。随着培养时间的延长,晕圈会向四周扩散。噬菌体PYH-2不仅可以裂解1株羊源肺炎克雷伯菌,还能裂解5株奶牛乳房炎源肺炎克雷伯菌。噬菌体PYH-2的最佳MOI为0.001,潜伏期为15 min,爆发期为10 min,裂解量为63 PFU/cell;在40~50℃和pH 4.0~12.0的环境下均能保持稳定活性。噬菌PYH-2基因组全长45958 bp,GC含量为51.86%,不含耐药基因及毒力基因;全基因组中包含52个开发阅读框(ORFs),只有21个为已知功能基因,其中尾部相关蛋白有6个。【结论】本研究分离到1株潜伏期短、生物特性稳定、能高效杀菌的噬菌体,可作为裂解动物源肺炎克雷伯菌的噬菌体候选毒株,为噬菌体防治多重耐药性肺炎克雷伯菌感染奠定了基础。

奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

为了了解新疆石河子地区奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌的耐药表型及耐药基因携带情况,试验对采自石河子地区2个规模化奶牛场患乳房炎奶牛的乳样进行细菌分离,使用种特异性引物对分离株进行鉴定,并采用纸片琼脂扩散法、最小抑菌浓度(MIC)测定法和PCR方法对分离得到的金黄色葡萄球菌的耐药表型和耐药基因进行检测。结果表明:从患乳房炎奶牛的138份乳样中共分离出74株金黄色葡萄球菌,镜检为阳性球菌,经PCR扩增确定为金黄色葡萄球菌,分离率为53.62%(74/138)。所有分离株均有不同程度的耐药性,对万古霉素、甲氧西林、磺胺甲口恶唑、林可霉素、青霉素、恩诺沙星的耐药率分别为97.30%、82.43%、79.73%、71.62%、67.57%、67.57%,其他9种药物的耐药率为16.22%~59.46%;对庆大霉素和多西环素两种药物的敏感性较高,分别为52.70%、74.32%。耐3种及以上抗生素的菌株占90.54%,耐9种及以上抗生素的菌株占56.75%,其中1个分离株对所有检测的抗生素均耐受。74株分离株中共检测到blaZ、linA、ermB、aacA-aphD、aac6-aph2、aph(3′)-a和tetM 7种耐药基因,其中氨基糖苷类耐药基因aacA-aphD检出率最高,为8.10%,其余耐药基因的检出率在2.70%~4.05%之间。说明新疆石河子地区奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌普遍耐药,且多重耐药现象较为严重,建议临床上根据药敏试验结果科学治疗奶牛乳房炎。

2021年新疆部分地区规模化猪场O型口蹄疫病毒抗体检测与分析

为了解2021年新疆不同地区规模化猪场O型口蹄疫的免疫水平,本试验采用液相阻断酶联免疫吸附试验(LPBELISA)方法对采自3个地区的7家规模化猪场的353份血清样品进行抗体检测与分析。结果显示,O型口蹄疫病毒抗体平均阳性率为76.77%(271/353),达到国家规定标准(70.00%);3个地区的O型口蹄疫病毒抗体阳性率均高于70.00%;7个猪场中,仅有B场的抗体阳性率为62.96%,低于国家规定标准,该场需要及时加强免疫,并科学合理地调整其免疫程序。本结果可为新疆地区猪场O型口蹄疫的防控提供依据。