从现代医学的血液循环角度探析“营卫生会”理论

从现代医学的血液循环角度探析“营卫生会”理论。营卫之气在人体内营周不休,发挥防御、温养、调节、营养等作用,与现代医学血液循环在人体内循环往复运行,发挥物质运输、体液调节、维持内环境稳态、实现血液防御、调节内分泌等功能颇为相似。“营卫生会”与人体血液循环之间存在某种内在联系,但“营卫生会”的含义又远不止于血液循环。

银屑病中免疫抑制性细胞及中医药对其调控作用的研究进展

银屑病是一种常见的难治性皮肤病,以过度激活的T细胞产生的异常免疫应答为主要特征。在机体免疫系统内,免疫抑制性细胞主要包括髓源抑制细胞(MDSCs)、调节性T细胞(Tregs)、调节性B细胞(Bregs)、巨噬细胞(Mφ)等,它们可以预防T细胞等免疫效应细胞的异常活化和增殖,维持免疫稳态。近年来随着对银屑病研究的深入,发现银屑病中的免疫抑制性细胞存在异常表现,可能影响银屑病的发生发展,但根据文献检索发现,国内医学尤其是中医药对银屑病中免疫抑制性细胞的探讨明显匮乏,故本文以此为切入点,探讨银屑病中免疫抑制性细胞的募集和功能变化以及中医药对此类细胞的调控作用,旨在更深入和全面地了解银屑病的发病机制,为临床上延缓银屑病进程提供新的策略。

小鼠经骨髓注射肺转移和术后复发模型的建立

目的建立经骨髓注射肺转移和术后复发模型,揭示骨髓注射法构建模型的优越性和可行性,为研究恶性肿瘤肺转移提供新的研究基础。方法将小鼠分为乳垫注射组、皮下注射组、尾静脉注射组和骨髓注射组。使用4T1细胞构建不同的模型,观察不同组别原发肿瘤的生长、生存期和转移效率。注射不同数量的4T1细胞,观察肺部转移发生的时间。经骨髓注射4T1-luc细胞构建术后复发模型,将小鼠分为假截肢组、第3天截肢组、第7天截肢组和第10天截肢组,通过活体成像观察小鼠肺转移情况。结果与乳垫注射法和皮下注射法相比,骨髓注射法对原发肿瘤的生长没有影响,但其生存期显著缩短。与乳垫注射法、皮下注射法和尾静脉注射法相比,骨髓注射法肺转移效率最高。骨髓注射法仅需1×105个4T1细胞数量即可在第12天发生肺转移。经骨髓注射的模型小鼠在截肢后,仍会造成肺转移和原发肿瘤的复发。结论成功建立经骨髓注射肺转移小鼠模型和术后复发小鼠模型,使用该注射方法的小鼠模型具有生存期短和高转移效率的特点,可用于恶性肿瘤肺转移的机制研究及药物筛选。

肿瘤微环境中单核细胞样髓源抑制细胞M-MDSCs的免疫抑制作用及其相关治疗的研究进展

肿瘤微环境(TME)在肿瘤发生发展中发挥重要促进作用。广泛存在于TME中的髓源抑制细胞(MDSCs)是介导肿瘤免疫逃逸的主要效应细胞群。单核细胞样髓源抑制细胞(M-MDSCs)作为MDSCs中除中性粒细胞样髓源抑制细胞(PMN-MDSCs)以外的另一主要亚型,因其具备PMN-MDSCs不具备的广谱免疫抑制活性和高度可塑性,即M-MDSCs在癌症初期被招募至肿瘤部位,对T细胞、NK细胞等发挥直接免疫抑制作用,另可分化为肿瘤相关巨噬细胞(TAM)、炎症性树突状细胞(Inf-DCs)和PMN-MDSCs,从而增加肿瘤治疗难度,故研究者逐渐把目光由数量上占主导的PMN-MDSCs转向占比较少的MMDSCs。根据M-MDSCs在TME中募集迅速、分化多样和功能复杂的特点,以其为靶点的免疫疗法可从耗竭数量、干预分化和抑制功能3方面入手,以期增强临床抗肿瘤疗效。虽然国内外PMN-MDSCs研究颇丰,但聚焦于M-MDSCs的中文综述鲜有报道,本文拟从TME中M-MDSCs特点出发,首次对M-MDSCs免疫抑制作用及其靶向治疗进行综述。

髓源抑制细胞在非肿瘤疾病中的研究进展

髓源抑制细胞(MDSC)是来源于骨髓的一群具有免疫抑制作用的异质性细胞群体,在病理状态下扩增,发挥调节机体自身免疫的作用。MDSC的早期研究聚焦于其在肿瘤微环境中的免疫抑制活性方面,近年逐渐有研究者将视角拓展至其在自身免疫性疾病、器官移植、妊娠和炎症等非肿瘤领域的作用。在非肿瘤疾病中,MDSC在一定程度上发挥正向调节作用,其通过调节T细胞、B细胞、NK细胞等免疫细胞,抑制过激的免疫反应,进而影响疾病的发展。加强MDSC在非肿瘤疾病中作用的研究,才能更加全面地认识MDSC,从而更好地阐明MDSC在不同疾病中的作用。

芩麻方通过调控髓源抑制细胞抑制非小细胞肺癌的机制研究

目的研究芩麻方对肺癌原位模型小鼠的抑瘤功效及可能作用机制。方法通过给小鼠肺内注射非小细胞癌Lewis肺癌细胞-荧光素酶标记(LLC-luc)建立肺癌原位小鼠模型。将所有造模小鼠随机分为空白对照组,顺铂组(2 mg/kg腹腔注射,每周2次),芩麻方高、中、低剂量组(2.0、1.0、0.5 g/kg,每日1次),连续给药4周。观察小鼠的外观表现(精神、毛发、活动等)并统计生存期。MTT法检测芩麻方对LLC-luc细胞增殖的抑制作用。流式细胞术检测小鼠脾脏和肿瘤中髓源抑制细胞(MDSCs)和T细胞数量变化,以及CD8+T细胞CD107α脱颗粒状况。RT-PCR检测小鼠脾脏中精氨酸酶(Arg1)、一氧化氮合酶(iNOS)、信号转导和转录活化因子3(STAT3)、信号转导和转录活化因子1(STAT1)基因表达。Western blot法检测小鼠脾脏中Arg1、STAT3和p-STAT3蛋白表达。HE染色和ELISA检测不同剂量的芩麻方的肝肾毒性。结果中剂量芩麻方可延长小鼠生存期(P<0.05);不同质量浓度的芩麻方干预对LLC-luc肺癌细胞增殖并无直接抑制作用;中剂量芩麻方可降低小鼠脾脏、肿瘤中MDSCs的数量(P<0.01),增加T细胞的数量,且以CD8+T细胞为主(P<0.01),同时增强CD8+T细胞CD107α脱颗粒作用(P<0.01);中剂量芩麻方干预后,与MDSCs活化相关的Arg1、STAT3 mRNA表达水平降低,Arg1、STAT3和p-STAT3蛋白表达下调(P<0.01);芩麻方干预对小鼠肝肾组织切片及生化指标无显著影响。结论芩麻方可能通过下调STAT3信号通路抑制MDSCs增殖和活化从而延长肺癌荷瘤小鼠生存期,且具有用药安全性。该研究有利于芩麻方临床应用的拓展,同时也丰富了肺癌痰污染理论的科学内涵。

基于“肺主皮毛”理论探讨银屑病与肺癌共病免疫机制

目的:基于“肺主皮毛”理论探究银屑病与肺癌共病的内在免疫机制。方法:C57BL/6J小鼠64只,随机分为肺癌组、共病1组、肺癌-甲氨蝶呤组、共病1-甲氨蝶呤组、银屑病组、共病2组、肺癌-顺铂组、共病2-顺铂组,每组8只,分别根据前期研究给予肺癌和银屑病造模,甲氨蝶呤组给予200μL甲氨蝶呤1 m g/k g灌胃治疗,顺铂组给予2 mL/kg顺铂100μL腹腔注射,每日1次,连续7 d。观察银屑病皮肤红斑和鳞屑及病理学变化,活体成像检测肺癌小鼠肺部荧光信号,流式细胞术检测免疫细胞数量。结果:与肺癌组比较,共病1组小鼠肺部荧光信号显著增强(P<0.01),CD3+T细胞、MDSCs数量显著增加(P<0.01),CD4+T、CD8+T细胞数量显著减少(P<0.01);与银屑病组比较,共病2组皮损无显著改变,CD3+T细胞、CD4+T细胞显著减少(P<0.01),MDSCs数量显著增加(P<0.01);顺铂改善共病2组小鼠脾肿大,增加CCR6+T细胞数量(P<0.01),减少MDSCs数量(P<0.01);甲氨蝶呤显著改善小鼠脾肿大,并增加CD8+T细胞数量(P<0.01)。结论:银屑病显著促进共病模型肺癌进展,肺癌削弱了银屑病的治疗,顺铂和甲氨蝶呤干预在一定程度上缓解了共病模型进展。

基于网络药理学和体外实验探讨驻景丸治疗老年性黄斑变性的作用机制

目的运用网络药理学和体外实验探讨驻景丸治疗老年性黄斑变性(AMD)的作用机制。方法检索Genecards、OMIM数据库与AMD相关的作用靶点,使用Jvenn在线工具获取驻景丸活性成分与AMD的交集靶点,构建“药物-成分-靶点”网络以及蛋白互作(PPI)网络。采用DAVID数据库对交集靶点的GO功能和KEGG通路富集分析,将网络中度值较高的成分与靶点进行分子对接。通过体外MTT实验和Western Blot实验,使用驻景丸有效成分干预人视网膜色素上皮细胞(ARPE19),进行核心靶点和通路的初步验证。结果网络药理学结果显示,共筛选出驻景丸中38个活性成分、150个交集靶点。蛋白互作网络显示关键靶点有MAPK1、Akt1、VEGFA等。GO富集分析涉及到247个生物过程、36个细胞组分和64个分子功能。KEGG通路分析得到HIF-1信号通路、PI3K-Akt信号通路、前列腺癌等85条相关通路。分子对接结果显示驻景丸治疗AMD的主要活性成分可以与MAPK1、Akt1、STAT3和MAPK3有较稳定的结合,其中Akt1与异鼠李素结合性最强。MTT结果显示驻景丸活性成分异鼠李素、槲皮素和山柰酚均可以促进碘酸钠损伤的ARPE19细胞增殖(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。Western Blot结果证实碘酸钠通过激活STAT3信号通路诱导细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP、BAD表达(P<0.01,P<0.001),异鼠李素、槲皮素和山柰酚则可以通过抑制STAT3信号通路进而抑制Caspase-3、PARP、BAD凋亡蛋白表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论本研究从网络药理学角度预测了驻景丸治疗AMD的药效物质基础及分子机制,并通过体外实验进行核心靶点和通路的初步验证,为驻景丸等中药复方研究提供了新的思路。