胃肠道间质瘤相关基因突变体对格列卫敏感性研究

目的:探讨胃肠道间质瘤相关基因突变体KIT Ins IPYD579和PDGFRA L839P对格列卫治疗的药物敏感性。方法:采用脂质体法将胃肠道间质瘤相关基因突变体KIT De1559-560、KIT Ins IPYD579、PDGFRA D842V及PDGFRA L839P重组质粒分别瞬时转染中国仓鼠卵巢上皮细胞系(CHO),表达24h后与格列卫共孵育90min,用Western-blot法检测的相关蛋白表达及其磷酸化状态。另外,用MTT法检测各组稳转PDGFRA基因突变体的CHO细胞与不同浓度格列卫共孵育72h后的增殖变化。结果:当格列卫浓度为0.1μM时,转染KIT De1559-560重组质粒的CHO细胞磷酸化KIT蛋白表达量明显降低。当格列卫浓度为1μM时,转染KIT Ins IPYD579和PDGFRA L839P重组质粒的CHO细胞的相应蛋白磷酸化形式不能检出。而转染PDGFRA D842V重组质粒的CHO细胞直至格列卫浓度提高至5μM时,其磷酸化PDGFRA蛋白表达水平仍无明显降低。MTT法显示:当格列卫浓度提高至1μM时,转染PDGFRA L839P重组质粒的CHO细胞增殖百分比明显降低,而转染PDGFRA D842V重组质粒的CHO细胞增殖百分比直至格列卫浓度为5μM时仍无明显变化。结论:格列卫在短时间内可使PDGFRA L839P或KIT Ins IPYD579突变体磷酸化蛋白表达减少,长期作用时对表达PDGFRA L839P突变体的细胞增殖具有明显的抑制作用。

浅析如何提高初中美术教学的有效性

随着社会对综合型人才需求日益凸显,随之而来对教育要求也越来越高,基础课堂教学已由应试教育向素质教育、终身教育方面转型。初中美术教育作为素质教育重要组成部分,教学有效性问题备受人们关注。教育改革的推行,初中美术课堂得到了一定的改善,但实质性问题没有得到根本的解决。如何提高初中美术教学的有效性,是当前教育部棘手且刻不容缓的难题。本文围绕如何提高初中美术教学的有效性进行了详细阐述。