SAHA对骨肉瘤143B细胞的抑制作用及机制研究

目的:探讨伏立诺他(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对骨肉瘤细胞143B增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法:以2~32μmol/L的SAHA作用于体外培养的143B细胞,采用MTT法检测SAHA对细胞活力的影响;选用SAHA作用的最适浓度和时间点进行后续的研究,并以加入最大剂量为1 ml/L的DMSO处理组作为空白对照。流式细胞仪检测细胞周期和凋亡水平变化;real-time PCR检测细胞周期和凋亡相关基因Cyclin D1、Bax、Bcl-2以及组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)的基因表达;化学比色法检测143B细胞中HDACs活性的变化;荧光素酶报告基因筛选SAHA处理后细胞内可能激活的信号通路;Western blot检测143B细胞中Cyclin D1、Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3、cleaved-PARP及AP1蛋白的表达水平。结果:SAHA在2~32μmol/L浓度范围内可以抑制143B细胞的增殖,并且呈时间和剂量依赖性,48 h引起143B细胞半数抑制的浓度约为8μmol/L。SAHA可将143B细胞周期阻滞在G0/G1期,并且可以引起细胞的早期凋亡及Cyclin D1、Bcl-2、HDAC1、HDAC3的m RNA表达量下调,Bax的m RNA表达量上调;SAHA处理143B细胞后可以降低细胞内HDACs的活性,促进细胞中转录因子AP1的表达,并且能够下调细胞中Cyclin D1、Bcl-2的蛋白表达,促进Bax、cleaved-Caspase-3、cleaved-PARP及AP1的蛋白表达。结论:SAHA可以通过抑制HDACs的活性,激活AP1信号通路从而诱导143B细胞的凋亡及周期阻滞。

miR-145、miR-146a在慢性阻塞性肺疾病合并冠心病患者血清中的表达及临床意义

目的探究慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并冠心病(CHD)患者血清miR-145、miR-146a的表达水平及临床意义。方法收集2014年至2019年本院就诊的COPD稳定期患者96例,以COPD稳定期合并CHD患者38例作为COPD+CHD组,COPD稳定期未合并CHD患者58例作为COPD组,另选取同期在本院体检健康者45例作为健康人对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组血清miR-145、miR-146a的表达水平,并分析其与C反应蛋白(CRP)、纤维蛋白水平、肺功能、血气指标及Gensini评分关系。结果健康人对照组、COPD组、COPD+CHD组血清miR-145(1.01±0.32 vs 0.73±0.25 vs 0.47±0.14)、miR-146a(0.99±0.28 vs 0.81±0.21 vs 0.45±0.13)的表达水平依次降低,差异有统计学意义(F分别为47.429、64.532,P均<0.05)。COPD+CHD组患者血清miR-145、miR-146a水平分别与CRP、纤维蛋白原水平及Gensini评分呈负相关(r分别为-0.398/-0.384、-0.403/-0.395、-0.407/-0.413,P均<0.05),而与肺功能指标FEV1/FVC、血气指标PaO2水平呈正相关(r分别为0.421/0.405、0.357/0.362,P均<0.05)。此外,高CRP水平、低PaO2水平、低FEV1/FVC水平、高Gensini评分、低miR-145水平、低miR-146a水平是影响COPD并发CHD的独立危险因素(P均<0.05)。血清miR-145、miR-146a联合诊断COPD合并CHD的曲线下面积(AUCROC)为0.887(95%CI:0.821~9.520),明显高于miR-145、miR-146a单独诊断。结论血清miR-145及miR-146a表达下调与COPD患者肺功能降低、病情加重有关,是患者并发CHD的独立危险因素。

医学检验科应对新型冠状病毒肺炎的管理方案及医务防护措施

医学检验科作为医院中重点科室之一,接触临床标本的同时也排放大量医疗废物,是新型冠状病毒肺炎易感高危科室,为了进一步提高医学检验科对于新型冠状病毒肺炎的管理,做好科室医务人员在国家突发公共卫生事件一级响应期间的预防和保护措施,该文重点从加强专业知识培训、标本检验流程管理、医疗废物管理、个人防护、重视科室人员及家属的心理状态进行阐述,旨在降低医务人员感染的风险。

浅析血清肌红蛋白检测在急性心肌梗死临床检验中的应用价值

研究血清肌红蛋白检测在急性心肌梗死患者临床检验中的应用价值。方法 选择2021年1月至2022年1月期间收治的60例急性心肌梗死患者以及健康体检者,比较两组人员的检查结果。结果 观察组的各项检查指标和对照组比较(P<0.05)。结论 检验血清肌红蛋白水平评估急性心肌梗死,评估价值高,值得推广。

结缔组织生长因子对体外模拟微环境中人骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响

目的 :采用体外共培养技术模拟骨肉瘤微环境,研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)对人骨肉瘤143B细胞增殖和迁移的影响,并探讨其可能的分子作用机制。方法 :将重组腺病毒Ad CTGF导入骨肉瘤143B细胞,然后与骨髓基质细胞HS-5建立间接共培养体系。共培养3 d后,采用MTT法检测143B细胞的增殖能力变化,划痕愈合实验和Transwell小室法检测143B细胞的迁移能力变化,RT-PCR法及蛋白质印迹法检测CTGF和β-连环素(β-catenin)的表达水平变化,蛋白质印迹法检测磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(phosphorylated glycogen synthase kinase 3β,p-GSK3β)的表达水平变化。结果 :重组腺病毒Ad CTGF感染后,共培养体系中骨肉瘤143B细胞的CTGF过表达。在体外模拟的骨肉瘤微环境中,过表达CTGF能有效促进骨肉瘤143B细胞的增殖(P<0.01),且明显提高细胞划痕愈合率和穿膜细胞数(P<0.01)。过表达CTGF后,143B细胞中β-catenin、p-Akt和p-GSK3β表达水平均显著上调(P均<0.05)。结论 :在模拟骨肉瘤微环境中过表达CTGF可促进骨肉瘤143B细胞的增殖和迁移,其作用机制可能与磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt和Wnt/β-catenin信号通路有关。

肾母细胞瘤过表达基因对人骨肉瘤143B细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的:探讨肾母细胞瘤过表达(nephroblastoma overexpressed,NOV)基因对人骨肉瘤细胞143B增殖、凋亡和迁移的影响及其可能的作用机制。方法:分别采用半定量反转录聚合酶链反应(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹法筛选NOV低表达的骨肉瘤细胞株。将重组腺病毒Ad NOV和Ad GFP(空载体阴性对照组)分别感染骨肉瘤143B细胞,培养24 h后,在荧光显微镜下观察重组腺病毒Ad NOV和Ad GFP在143B细胞中的感染效率,并通过半定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测NOV m RNA和蛋白在143B细胞中的表达情况。分别采用MTT法、FCM法和Transwell小室法检测NOV过表达对143B细胞增殖、凋亡及迁移的影响;半定量RT-PCR法及蛋白质印迹法检测NOV过表达的143B细胞中NOV、抗凋亡因子B细胞淋巴瘤基因-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)表达水平的变化以及磷酸化p38(phospho-p38,p-p38)、总p38、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phospho-c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)和总JNK表达水平的变化。结果:NOV在骨肉瘤细胞143B中的表达水平最低(P<0.05)。荧光显微镜下观察发现,重组腺病毒Ad NOV在143B细胞中的感染效率约为60%;NOV在143B细胞中成功过表达(P<0.05)。NOV过表达可抑制143B细胞的增殖(P<0.05),将细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.05),促进了143B细胞的凋亡(P<0.001);并可提高143B细胞的迁移能力(P<0.001)。NOV过表达后,143B细胞中促凋亡因子Bax表达上调(P<0.001),抑制凋亡因子Bcl-2表达下降(P<0.05);同时,p-p38与p-JNK表达水平均显著上调(P<0.001)。结论:腺病毒介导的NOV过表达抑制了骨肉瘤143B细胞的增殖,促进了其凋亡和迁移,其作用机制可能与p38/丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)和JNK/MAPK信号通路的激活有关。

SAHA与顺铂联合用药对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响

该文研究了组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA(suberoylanilide hydroxamic acid)联合顺铂(cisplatin,DDP)对骨肉瘤细胞的作用。骨肉瘤143B细胞分别经不同浓度的SAHA、DDP、SAHA+DDP作用48 h。利用倒置显微镜观察细胞形态学变化;分别采用MTT法、流式细胞术、细胞划痕实验、克隆形成实验检测SAHA、DDP及二者联用对143B细胞活力、细胞凋亡、细胞迁移和集落形成能力的影响。利用Western blot检测143B细胞中cleaved-Caspase-8、cleaved-PARP蛋白表达水平。结果显示,SAHA+DDP组143B细胞大量坏死,抑制细胞增殖的现象明显高于单药组;中低剂量SAHA与DDP联用表现为协同作用,而较高剂量的联用表现为单纯相加作用;SAHA+DDP组较单药组细胞早期凋亡率增加、迁移率明显降低,且SAHA+DDP组的细胞集落形成能力明显降低;SAHA+DDP组能够促进cleaved-Caspase-8、cleaved-PARP的蛋白表达。以上结果表明,SAHA联合顺铂对骨肉瘤细胞143B细胞有协同增敏作用,能够明显抑制其增殖和迁移并促进其凋亡。

临床免疫检验质量控制的相关性措施对于检验结果的可靠性与准确性的影响分析

研究临床免疫检验质量控制的相关措施于检验结果的可靠性以及准确性的影响效果。方法 选择60例于2018年7月-2020年7月期间收治的患者,比较两组患者临床疗效。结果 观察组的临床疗效高于对照组(P<0.05)。结论 可对检验结果的准确性产生影响的因素较多,一旦可靠性以及准确性被影响,则会对临床诊疗效果产生影响。现做出如下阐述。