miRNA-20a作为CHO-K1细胞抗凋亡调控靶标的研究

通过分析miRNA表达谱发现,miRNA-20a在凋亡CHO-K1细胞中的表达降低。通过构建稳定表达miRNA-20a的重组细胞株,分析该重组细胞的抗凋亡能力。分别构建携带miRNA-20a前体序列或反义序列的重组慢病毒,转染CHO-K1细胞,得到miRNA-20a功能获得或功能抑制的重组细胞。无血清过度消耗培养液应激环境下培养重组细胞,分析靶基因E2F1的表达水平,通过细胞活力和Caspase3/7活性分析评价细胞的抗凋亡能力。结果显示,miRNA-20a过表达的细胞株,E2F1的表达受到显著抑制,在无血清过度消耗的应激环境下,细胞活力显著提高,Caspase3/7活性降低。相反,miRNA-20a抑制表达的细胞株中,E2F1表达增加,而细胞活性显著降低,抗凋亡能力显著下降。上述结果提示,miRNA-20a有望作为哺乳动物宿主细胞的遗传重构靶标,构建耐受应激环境的抗凋亡细胞。

CH_2CO+NCO多通道反应的理论研究

用密度泛函B3LYP/6-311G**方法和CCSD(T)理论研究了CH2CO与NCO自由基反应的微观机理,揭示了该反应存在的加成—消除机理和直接吸氢机理。研究结果表明生成CO的反应是主反应通道。理论计算研究结果较好地解释了实验观察到的主要产物和副产物并存的现象。