染料木黄酮抑制前列腺癌进展和转移的机制研究

目的探讨染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法将前列腺癌细胞株LNCaP和CWR22RV1细胞分为对照组(常规培养)和实验组(50μmol/L染料木黄酮处理)。采用噻唑蓝(MTT)法分析染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖能力的影响,通过细胞划痕实验和Transwell实验分析染料木黄酮对前列腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。Western blot检测上皮间质转化(EMT)中间质标志物E-钙黏蛋白(ECadherin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)以及肿瘤干细胞标志物CD44和Oct4的蛋白水平。结果MTT实验结果表明,染料木黄酮具有抑制前列腺癌细胞增殖的作用。实验组LNCaP和CWR22RV1细胞划痕闭合率较对照组下调,穿过Transwell膜的细胞数量减少(P<0.05)。Western blot实验证实,染料木黄酮能够下调前列腺癌细胞中间质的标志物N-Cadherin、Vimentin和肿瘤干细胞的标志物CD44与Oct4蛋白表达,上调上皮细胞标志物ECadherin表达(P<0.01)。结论染料木黄酮通过抑制EMT过程并降低前列腺癌细胞的干性,从而降低前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

外泌体源性长链非编码RNA同源框基因A-反义转录本3通过吸附微小RNA-29b-3p调节前列腺癌去势抵抗的作用机制

目的探讨外泌体来源长链非编码RNA(lncRNA)同源框基因A-反义转录本3(HOXA-AS3)对前列腺癌(PCa)去势抵抗的作用机制。方法建立PC-3与LNCaP共培养体系,用双荧光素酶报告基因检测、荧光定量聚合酶链反应(PCR)和挽救实验等验证HOXA-AS3参与PCa去势抵抗和进展的机制。采用动物实验和人PCa组织切片,探究HOXA-AS3在由雄激素依赖性向非依赖性的转化过程中的作用。采用两样本t检验和单因素方差分析(One-WayANOVA)进行统计分析。结果ASO-NC转染组LNCaP细胞侵袭数量显著低于ASO-miR-29b-3p转染组[(116.00±5.10)个比(146.33±4.78)个,t=6.135,P<0.05],NC转染PC-3组显著高于miR-29b-3pmimic转染组[(394.33±11.95)个比(111.67±7.41)个,t=28.425,P<0.05]。LNCaP-HOXA-AS3-exo中HOXA-AS3显著高于LNCaP-exo(1.46±0.08比1.01±0.02,t=7.634,P<0.05),而PC-3-HOXA-AS3-ASO-exo中HOXA-AS3显著低于PC-3-exo(0.53±0.06比1.00±0.09,t=5.943,P<0.05)。转染miR-29b-3p-mimic组的野生型HOXA-AS3、野生型STAT3-3和野生型Mcl-1组的细胞荧光素酶活性低于对照组(1.00±0.04比0.51±0.02、1.00±0.02比0.56±0.04、1.00±0.02比0.57±0.02,t=18.058、15.857、26.081,P<0.01)。同时转染pcDNA3.1-STAT3和Mcl-1-promotor载体组免疫荧光强度高于对照组(1.72±0.05比1.00±0.03,t=18.717,P<0.05),并且cytochromec和Caspase-9的表达低于对照组(0.46±0.01比0.81±0.01、0.28±0.01比0.59±0.01,t=92.492、97.212,P<0.01)。结论HOXA-AS3通过吸附miR-29b-3p调节STAT3/Mcl-1/cytochromec/Caspase-9轴,调节PCa的去势抵抗。